论文摘要
霍山石斛（Dendrobium huoshanese C.Z.Tang et S.j.cheng）产于安徽省霍山县,为药用石斛中的珍品,对生长条件要求极为苛刻,种子繁殖能力极低,由于过度采挖,自然资源早已枯竭,霍山石斛试管苗出瓶移栽成活率较低,很难进行大规模人工栽培。目前,人工种子的研究已有较多的报道,但霍山石斛为材料制作人工种子并未见报道。因此,可以考虑通过人工种子快速繁殖作为解决资源匮乏的有效途径之一。本文以腋芽、原球茎、不定芽为包埋繁殖体,制作霍山石斛人工种子,采用单因素和正交设计试验,探讨麦芽糖、激素、活性炭、海藻酸钠、离子交换时间对霍山石斛人工种子萌发的影响,研究繁殖体的种类和大小对霍山石斛萌发率和成苗率的影响,对人工种皮的糖分泄漏率和pH的变化以及成苗植株生长特性进行测定,并对人工种子贮藏与防腐等方面进行初步研究,为霍山石斛人工种子深入研究提供技术方法。主要研究结果如下:1由单因素试验得出,麦芽糖为霍山石斛人工种子适宜的碳源,适宜浓度为4.0%,通过正交设计试验,得出麦芽糖是影响霍山石斛人工种子萌发主要因素,适宜的霍山石斛人工种子包埋配方组合为:麦芽糖含量为4.0%、6-BA/NAA 10:1,活性炭浓度0.1%,海藻酸钠浓度4.0%,将含有繁殖体的此配方溶液滴入2%CaCl2溶液中,进行离子交换反应,反应时间10 min。在此包埋配方下,以腋芽、原球茎、不定芽为包埋繁殖体的霍山石斛人工种子萌发率可以达到:65.6%、90.1%、75.2%,萌发后幼苗的存活率分别为16.1%、80.6%和19.1%。2霍山石斛人工种子包埋繁殖体,腋芽、不定芽为适宜的大小为0.6-0.8 cm,原球茎颗粒直径为0.3 cm:其中,原球茎较腋芽和不定芽更适合包埋。3人工种皮糖分泄露率为0.52%,这与包埋配方需要较高的麦芽糖浓度是一致的;以腋芽为包埋繁殖体的霍山石斛人工种子在播种60 d后,以腋芽为包埋繁殖体的霍山石斛人工种皮pH值由5.60下降到4.69,以原球茎,不定芽为包埋繁殖体的霍山石斛人工种皮pH值由5.60分别下降到4.80,4.71,pH值逐渐降低,这可能阻碍人工种子成苗;对照植株生长特性优于人工种子成苗植株,说明人工种皮不能充分满足繁殖体生长所需的营养物质及环境,因此,人工种子的质量还有待于提高。4以原球茎为包埋繁殖体的霍山石斛人工种子的形态指标和生理指标都高于以腋芽、不定芽为包埋繁殖体的霍山石斛人工种子,其成苗植株株高为2.36 cm,茎粗为1.25mm,鲜重为186.23 mg干重为15.01 mg,叶绿素含量为0.31 mg/g·FW。5低温贮藏20 d后,霍山石斛人工种子仍有10.6%的萌发率;一般情况下,霍山石斛人工种子在有菌条件下萌发率为0,利用多菌灵10.0g/L为防腐剂,在自然条件下,霍山石斛人工种子萌发率可以达到13.8%。