实时定量PCR检测肾移植患者PBL细胞因子mRNA表达研究

论文摘要

目的 研究肾移植术后早期患者和CAN患者的免疫状态以及环孢素A效用,探讨TGF-β1与CAN和CsA之间的关系,对比ELISA检测肾移植患者外周血IL-2与实时荧光定量PCR检测PBL IL-2 mRNA表达结果的吻合性和准确性。 材料与方法 利用实时荧光定量PCR方法,检测32例肾移植（KT）患者术前、术后3、7、14、28 d外周血淋巴细胞（PML）有关细胞因子mRNA表达,对于1例DGF患者和2例AR患者附加发病后检测。对其中的20例CsA服用者,术后7d附加CsA服用后2h（C2）时间检测以及CsA空腹（CO）、C2浓度测定:利用双夹心抗体ELISA法测定术前、术后7d CO和C2时间外周血IL-2水平。同时取10例常规手术患者作为对照（OC）,进行相应检测。选取15例CAN和22例非CAN患者,按CsA或MMF分组,行PBL有关细胞因子mRNA表达检测,同时测定其中的20例患者的外周血IL-2水平。 结果 KT组和OC组术前细胞因子mRNA表达无明显差异;KT组术后IL-10 mRNA表达高于OC组（P<0.05）,而IL-2、IFN-γmRNA术后第7天的表达明显低于OC组。2例早期AR患者IL-2、IL-10、IFN-γ、TGF-β1mRNA表达于AR发生前后均增强,以IL-2 mRNA表达增强最为明显。术后7d,C2对应的IL-2、IFN-γmRNA抑制率分别为（69.47±7.09）%和（65.95±8.15）%;C2浓度与IL-2、IFN-γmRNA的抑制率有相关性,R2分别为0.53和0.31,P分别<0.01和<0.05;CO与IL-2、IFN-γmRNA的抑制率无相关性。CAN组IL-2、IL-10 mRNA表达低于非CAN组,而IFN-γ、TGF-β1 mRNA表达明显高于非CAN组,P<0.01。csA组TGF-β1 mRNA表达高于FK506组,P<0.01;TGF-β1 mRNA表达与移植肾功能呈负相关,P<0.01。外周血IL-2水平与PBLIL-2 mRNA表达在术前和术后1～5年呈

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• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分：肾移植患者术后早期PBL细胞因子mRNA表达检测研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分：CAN患者PBL细胞因子mRNA表达检测研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第三部分：肾移植患者外周血IL-2 ELISA检测与PBL IL-2 mRNA实时定量PCR检测的对比研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 总结
• 综述
• 攻读学位期间发表文章情况
• 致谢