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海洛因对子鼠发育中肾和肝脏SOD、GSH、AKP酶活性及肾脏Bax表达的影响研究

2020-11-29阅读(287)

海洛因对子鼠发育中肾和肝脏SOD、GSH、AKP酶活性及肾脏Bax表达的影响研究

论文摘要

吸毒现象已成为近年来我国日益严重的社会问题,而海洛因作为三大毒品之一,给社会带来极大危害。为比较正常后代和海洛因依赖者后代肾脏和肝脏发育过程中SOD、GSH、AKP酶活性及肾脏中Bax表达的变化规律,揭示海洛因对其依赖者后代肾脏和肝脏发育过程中SOD、GSH、AKP酶活性及肾脏中Bax表达的影响。以昆明小白鼠（Kunmingmice）为实验材料,建立海洛因成瘾模型母鼠,取其胚胎15天（E15）胎鼠、生1日（P1）、生7日（P7）和生15日（P15）仔鼠的肝脏和肾脏,测其SOD、GSH和AKP等酶活性。结果表明:（1）对照组和实验组SOD、AKP的活力和GSH的含量的变化趋势为E15期高于生后各期,而生后各期随时间推移,逐渐升高。（2）对照组和实验组相比,对照组和部分实验组的肝脏和肾脏中,SOD和AKP的活力、GSH含量均对照组高于实验组。结论:（1）小鼠肾脏和肝脏在E15时,细胞分裂旺盛,抗氧化能力很强,同时对能量的需求也非常旺盛。（2）在生后1日、7日和15日内,随着这两种器官的发育,结构的完整和功能的完善,抗氧化能力和对能量的需求也逐渐增强。（3）由于小鼠体内海洛因的累积效应,E15到P1期,有一个SOD和AKP的活力、GSH的含量下降过程,而P15期时,由于海洛因的作用被消除,包括抗氧化过程在内的生命活动又有所恢复。（4）由于海洛因作用,脂质过氧化程度升高,供能过程受到影响,肝脏和肾脏细胞受到不同程度的伤害。另外,取前述各期胎鼠和仔鼠肾脏,固定,做石蜡切片,做免疫组织化学检测,检测Bax蛋白的表达。结果表明:（1） Bax蛋白免疫反应阳性表达部位染成橙黄色。（2）在所取四个期中,Bax蛋白免疫反应阳性表达最强列的时期是P7期。（3）从E15期、P1期、P7期到P15期的各期小鼠肾脏中,Bax蛋白呈免疫反应阳性的部位分别出现于生肾区（nephrogeniczone）、S小体（S-likebody）、肾小管、肾小管上皮细胞,细胞内表达于细胞质中。结论:（1）小鼠肾脏发育过程中,从E15期、P1期、P7期到P15期在不同部位始终存在细胞的增殖和凋亡。（2）生后1-15日内,肾小管的细胞凋亡趋势为:从1至7日,逐渐增强,P7时至高峰期,从7至15日,逐渐下降。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 略缩词表
  • 第一部分 综述
  • 1 海洛因与肾脏
  • 1.1 海洛因的化学合成、结构、性质、代谢、来由及种类
  • 1.2 海洛因的危害
  • 1.3 海洛因对肾脏的影响
  • 1.3.1 什么是海洛因肾病
  • 1.3.2 海洛因肾病病理改变
  • 1.3.3 海洛因肾病的致病机制
  • 2 肾脏的发生与发育
  • 2.1 肾脏的发生
  • 2.2 肾脏的发育
  • 2.2.1 肾小体的发育
  • 2.2.2 肾小管和集合管的发生发育
  • 2.2.3 髓质的组织形态发育与细胞凋亡
  • 3 肝脏的发育
  • 3.1 生长分化期
  • 3.2 机能分化期
  • 4 自由基与相关的酶
  • 4.1 自由基概述
  • 4.2 超氧化物歧化酶（SOD）
  • 4.3 还原型谷胱甘肽（GSH）
  • 4.4 碱性磷酸酶
  • 5 Bax的结构、分布、功能及作用原理
  • 5.1 Bax的结构、分布
  • 5.2 Bax的功能及作用原理
  • 6 研究内容、目的及意义
  • 第二部分 SOD、GSH和AKP酶活性的测定
  • 1 材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 药品与试剂
  • 1.3 仪器与器材
  • 2 实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 动物模型的建立
  • 2.3 取材
  • 2.4 酶活性测定
  • 2.4.1 总蛋白测定
  • 2.4.2 总超氧化物岐化酶（T-SOD）测定
  • 2.4.3 还原型谷胱甘肽（GSH）测定
  • 2.4.4 碱性磷酸酶（AKP）测定
  • 2.5 数据统计与分析
  • 3 结果
  • 3.1 海洛因对肝脏中SOD活力的影响
  • 3.2 海洛因对肝脏中GSH含量的影响
  • 3.3 海洛因对肝脏中AKP活力的影响
  • 3.4 海洛因对肾脏中SOD活力的影响
  • 3.5 海洛因对肾脏中GSH含量的影响
  • 3.6 海洛因对肾脏中AKP活力的影响
  • 4 讨论
  • 4.1 海洛因与肝脏中SOD活力之间的关系
  • 4.2 海洛因与肝脏中GSH含量之间的关系
  • 4.3 海洛因与肝脏中AKP活力之间的关系
  • 4.4 海洛因与肾脏中SOD活力之间的关系
  • 4.5 海洛因与肾脏中GSH含量之间的关系
  • 4.6 海洛因与肾脏中AKP活力之间的关系
  • 5 小结
  • 第二部分 BAX的免疫组化研究
  • 1 材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 药品与试剂
  • 1.3 仪器与器材
  • 2 实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 动物模型的建立
  • 2.3 取材
  • 2.4 石蜡切片的制作及免疫组化过程
  • 2.4.1 石蜡切片的制作过程
  • 2.4.2 免疫组化过程
  • 3 结果
  • 4 讨论
  • 参考文献
  • 图版说明
  • 图版
  • 已发表论文
  • 参与科研项目
  • 致谢

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