乳酸明串珠菌产细菌素研究

论文摘要

近年来,天然的食品,越来越受到注重健康的消费者的注意。食品中可能含有即使在保藏条件下仍能生长的致病菌和腐败菌。食品级乳酸菌产细菌素作为合适的防腐剂,引起人们的广泛关注。对细菌素产生菌的研究,目前主要集中在乳酸菌。本文以乳酸明串珠菌和乳酸片球菌为材料,对高产细菌素菌株筛选、产细菌素菌株培养条件的优化、细菌素粗提物的分离纯化和细菌素抑菌谱拓展及应用进行研究。1、产细菌素菌株的筛选通过交叉拮抗试验对产细菌素菌株的初筛和复筛得到4株乳酸菌,其中一株为乳酸明串珠菌L.lact i（s9）、一株乳酸片球菌和两株肠膜明串珠菌WZ30-2和WZ-9-2。经过进一步的试验确定L.lactis（9）为产细菌素菌株,作为后续试验的供试菌株。2、菌株培养条件的优化研究表明:（1）碳源、氮源、培养基初始pH值和培养温度等因素对L.lactis（9）菌株生长有明显的的影响,最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为大豆蛋白胨,最适培养温度为37℃,最适初始pH为6.0～6.5,最适接种量为3%。（2）选择碳源、氮源、培养温度和接种量进行4因素L16（45）正交试验表明:影响菌株L.lactis（9）生长的因子顺序为培养温度>大豆蛋白胨>接种量>葡萄糖,最佳培养条件为:即大豆蛋白胨添加量1.5%、葡萄糖添加量2%、培养温度37℃以及接种量3%。3、细菌素的分离纯化研究表明:（1）对乳酸明串珠菌L.lactis （9）产细菌素进行了分离纯化;（2）菌株L.lactis （9）产细菌素的分子量不大于14.2kD,约是8kD。4、菌株L.lactis （9）产细菌素的应用研究通过实验拓宽一定程度的抑菌谱,通过与Nisin的对比应用试验,我们初步认为加入乳酸明串珠菌L.lactis（9）细菌素的保存效果要较使用Nisin时好一些。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 引言
• 1.1 乳酸菌产细菌素的类型
• 1.1.1 羊毛硫抗生素
• 1.1.2 Ⅱ类细菌素
• 1.1.3 大的、热不稳定的细菌素
• 1.1.4 复合细菌类
• 1.2 明串珠菌和片球菌产细菌素的特性
• 1.2.1 明串珠菌和片球菌的生物学特征
• 1.2.2 化学性质
• 1.3 影响细菌素活性的因素
• 1.3.1 菌株筛选
• 1.3.2 菌株产生细菌素代谢过程研究
• 1.4 细菌素在食品工业中的应用
• 1.4.1 细菌素在食品发酵中的应用
• 1.4.2 细菌素在食品加工中的应用
• 1.4.3 细菌素在肉品保藏中的应用
• 1.4.4 细菌素在果蔬制品及发酵果蔬饮料中的应用
• 1.4.5 细菌素在酒精饮料中的应用
• 1.4.6 作为栅栏技术的一个环节用于食品的保藏
• 1.5 目前国内的研究现状
• 1.5.1 菌株筛选
• 1.5.2 一般特性研究
• 1.5.3 分子生物学研究
• 1.5.4 应用研究
• 1.6 本项研究目标
• 第二章 产细菌素菌株的筛选
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 仪器设备
• 2.1.3 方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 指示菌的筛选结果
• 2.2.2 产细菌素菌株的筛选结果
• 2.2.3 无细胞培养液中和后抑菌试验结果
• 2.2.4 蛋白类抑菌物质的实验结果
• 2.2.5 产细菌素菌株的筛选
• 2.2.6 L.lactis（9）的生长曲线
• 2.3 结论
• 第三章 产细菌素菌株培养条件优化
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 菌株及来源
• 3.1.2 培养基和培养条件
• 3.1.3 试剂与仪器
• 3.1.4 实验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 碳源
• 3.2.2 氮源
• 3.2.3 培养基初始pH 值
• 3.2.4 培养温度
• 3.2.5 接种量
• 3.2.6 培养条件正交优化试验
• 3.3 小结
• 第四章 菌株L.LACTIS（9）产细菌素的分离纯化
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 主要仪器
• 4.1.2 主要试剂材料
• 4.1.3 实验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 细菌素粗提物电泳
• 4.2.2 细菌素粗提物的提纯
• 4.2.3 细菌素分子量确定
• 4.3 小结
• 第五章 L.LACTIS（9）产细菌素的抑菌谱和应用
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 实验器材
• 5.1.2 试验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 乳酸明串珠菌L.lactis（9）产细菌素的抑菌谱
• 5.2.2 乳酸明串珠菌L.lactis（9）产细菌素的应用
• 5.3 小结
• 第六章 全文总结
• 参考文献
• 个人简介
• 导师简介
• 致谢
• 附录