PPARγ激动剂罗格列酮抑制心肌细胞病理性肥大的研究

论文摘要

目的: 试图证明 PPARγ激动剂罗格列酮抑制新生大鼠心室肌细胞肥大并探讨 PPARγ 激动剂是否通过降低 NF-κB 活性和/或减少 TNF-α表达抑制心肌细胞病理性肥大。 方法: 采用胰蛋白酶消化和差速贴壁法分离新生大鼠心室肌细胞并做原代培养。① 3H-亮氨酸（3 H-Leu）掺入法测大鼠心肌细胞蛋白质合成;考马斯亮兰法测细胞总蛋白质含量;图象分析软件测细胞表面积;放射免疫分析法测细胞培养上清液 ANP 含量。②荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术测 NF-κB 活化。 ③ ELISA 法测细胞培养上清液 TNF-α水平;RT-PCR 测细胞内 TNF-αmRNA 表达。 结果: AngII 诱导心肌细胞病理性肥大,模型建立成功。心肌细胞经 AngII 诱导培养后,心肌细胞表面积、总蛋白质含量、3H-亮氨酸（3 H-Leu）掺入量及细胞培养上清液 ANP 含量较对照组分别增加 0.88倍、0.78 倍、0.83 倍、0.66 倍（均为 P<0.01）。 罗格列酮呈浓度依赖性抑制 AngII 诱导心肌细胞病理性肥大。罗格列酮抑制心肌细胞表面积增加[5μmol/L:（1717.93±306.76）μm2→ （1556.93±337.03） μ m2, P < 0.05 ; 50 μ mol/L :（1717.93±306.76）μm2 →（1247.09±257.60） μm2, P<0.01];抑制细胞总蛋白质含量增加[5μmol/L:（1.458±0.71）ng/cell→ （1.305±0.74） ng/cell, P<0.05; 50μmol/L:（1.458±0.71）ng/cell →（1.085±0.81） ng/cell, P<0.01];抑制 3H- 亮氨酸（3 重庆医科大学硕士研究生学位论文3H-Leu）掺入量增加[5μmol/L:（1548.25±107.77）cpm/well→（1265.01±167.47） cpm/well, P<0.01; 50μmol/L:（1548.25±107.77）cpm/well→（996.25±244.49） cpm/well, P<0.01];抑制心肌 细 胞 ANP 分 泌 增 加 [5 μ mol/L :（ 8.3940±1.390 ） ng/ml →（6.8020±0.497） ng/ml, P>0.05;50μmol/L:（8.3940±1.390）ng/ml→（5.5097±0.7053） ng/ml, P<0.01]。NF-κB抑制剂PDTC呈浓度依赖性抑制AngII诱导心肌细胞病理性肥大。PDTC 抑制心肌细胞表面积增加[10μmol/L:（1717.93±306.76）μ m2 → （1431.99±388.28） μ m2, P < 0.05 ; 100 μ mol/L :（1717.93±306.76）μm2 →（921.08±237.08） μm2, P<0.01];抑制总蛋白质含量增加[10μmol/L:（1.458±0.710）ng/cell→ （1.216±0.811） ng/cell, P<0.05;100μmol/L:（1.458±0.710）ng/cell→（0.821±0.054） ng/cell, P<0.01];抑制 3H- 亮氨酸（3 H-Leu）掺入量增加[10μmol/L:（1548.25±107.77）cpm/well→ （1263.25±75.26） cpm/well, P<0.01;100μmol/L:（1548.25±107.77）cpm/well→（809.01±104.95）cpm/well, P<0.01];抑制心肌细胞分泌 ANP[5μmol/L:（8.3940±1.3901）ng/ml→（5.6730±0.7214） ng/ml, P<0.015;0μmol/L:（8.3940±1.3902）ng/ml→（4.6270±0.4370） ng/ml,P<0.01]。50μmol/L 罗格酮、10μmol/L PDTC 均部分抑制血管紧张素 II 诱导心肌细胞内的 NF-κB 免疫荧光强度增加（均为 P<0.01）,10μmol/LPDTC 抑制作用明显大于 50μmol/L 罗格列酮组（均为 P<0.01）。罗格列酮呈浓度依赖性抑制 AngII 诱导心肌细胞 TNF-α表达。AngII 刺激心肌细胞分泌 TNF-α增加A;ngII 刺激心肌细胞 TNF-αmRNA表达增加[0 →（0.78±0.21）,P<0.01] 。罗格列酮抑制 AngII 诱导心肌细胞 TNF-α分泌[5μmol/L:（88.0±0.72）pg/ml→（48.9±3.41）

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文 PPARγ激动剂罗格列酮抑制心肌细胞病理性肥大及其机制的实验研究
• 前言
• 实验一 血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞病理性肥大
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 实验二 PPARγ激动剂罗格列酮抑制血管紧张素 Ⅱ诱导心肌细胞病理性肥大
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 实验三 NF-κB 受体拮抗剂PDTC 抑制 AngⅡ 诱导心肌细胞病理性肥大及 PDTC、罗格列酮对 NF-κB 活性的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 实验四 罗格列酮抑制 AngⅡ诱导心肌细胞分泌TNF-α
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 全文总结
• 图片
• 参考文献
• 综述 过氧化物酶体增殖剂活化受体与心肌重塑
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的文章