论文摘要
松材线虫病是林业上的一种毁灭性病害,给我国的林业和自然环境造成了严重的危害。在松树中除了松材线虫外,还常存在多种与之形态非常相似的线虫,给松材线虫的准确鉴定带来了困难。本研究以分离自木制包装材料中的一个与松材线虫形态相似的种为研究材料进行了以下研究: 对来自日本木制包装材料中的伞滑刃属线虫（Bursaphelenchus spp.）进行了研究,发现了一个新种B. longispiculis sp. n.。B. longispiculis sp.n.来自日本的木制包装材料,形态上与拟松材线虫、松材线虫等都较为相似,但其雄虫交合刺长度明显长于松材线虫和拟松材线虫,另外在a、c值上也存在明显的差异。 利用ITS区通用引物扩增出B.longispiculis sp.n.及其相似种松材线虫、拟松材线虫的ITS区并测定其ITS区序列。利用所测定的序列及GENEBANK上相似种的ITS区序列进行多序列比较,结果显示各个种之间5.8S区序列差异较小,较为保守,不适合进行进化分析;而ITS1及ITS2区序列种间差异较大,除B.abruptus外各种间ITS1序列差异约在10-30%之间,ITS2区序列差异约在13-48之间,而B.abruptu与其它种序列差异达到50%以上。B.longispiculis sp.n.与松材线虫、拟松材线虫等其它相似种在ITS1区序列差异约为23-28%,在ITS2区序列差异约为33-43%,差异较大。 利用多序列比较结果进行聚类分析并构建进化树。结果显示无论单独以ITS1和ITS2区序列为分析对象还是以ITS1和ITS2区序列组合为分析对象都显示B.longispiculis sp.n.与其它各种遗传距离较远,支持该种与所分析的其它相似种之间种的分歧。 利用创伤接种法测定B.longispiculis sp.n.对黑松和马尾松幼苗的致病性。结果表明,B.longispiculis sp.n.对二年生黑松幼苗致病力很弱,而对二年生马尾松幼苗则无致病力。
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