葡萄糖生物传感器的研制及其分析应用

葡萄糖生物传感器的研制及其分析应用

论文摘要

第一章:简要概述了生物传感器的工作原理、分类及特点,并对生物活性组分的固定化方法及其应用作了综述。第二章:采用包埋法将葡萄糖氧化酶(GOx)夹心于鸡蛋壳膜与壳聚糖膜之间制得壳聚糖/GOx/鸡蛋壳膜,再将其与氧电极偶联制得葡萄糖生物传感器,并对影响传感器响应的壳聚糖浓度、固定酶用量、缓冲液pH、浓度与温度进行了优化。壳聚糖溶液浓度为0.30%(w/v),固定酶量为0.8mg,磷酸缓冲溶液的pH 7.0,浓度为300mM,实验温度为室温,此生物传感器的响应性能良好。该生物传感器的响应时间为60s,葡萄糖浓度在16μM-1.10mM呈现良好的线性关系,检出限为8μM(R/S=3),RSD=2.52%(n=10)。间断使用90天后,响应值为初始值的86.6%。实际样品娃哈哈中可能存在的干扰物对葡萄糖的测定无干扰。将此生物传感器应用于实际样品娃哈哈饮料中葡萄糖的测定,并进行了回收率实验,回收率为97-110%。结果表明:此生物传感器具有操作简单,响应快,寿命长等优点,且对于实际样品的分析测定具有良好的可靠性。第三章:对尼龙网进行了化学修饰使其连接上可和酶作用的双功能试剂,并基于尼龙网化学修饰即活化的原理,对影响尼龙网活化的各因素进行了考察。实验结果表明:尼龙网在60℃的硫酸二甲酯中氧烷基化10min,后与赖氨酸反应3h,再与交联剂戊二醛反应1h,化学修饰后的尼龙网的响应值比较好,且其较高的机械强度与抗细菌侵蚀的特点使尼龙网有望成为固定酶的良好载体。第四章:通过化学键合法将葡萄糖氧化酶固定于已化学修饰的尼龙网上,再将固定有酶的尼龙网紧贴于氧电极表面制得葡萄糖生物传感器,并对影响传感器响应的固定酶用量、缓冲液pH、浓度与温度进行了优化。在优化的实验条件下,该生物传感器的响应时间为80s,葡萄糖浓度在18μM-1.10mM之间呈现良好的线性关系,检出限为9μM(R/S=3),RSD=3.38%(n=10)。而且,此生物传感器具有良好的操作和贮藏稳定性。实际样品血样中可能存在的干扰物对葡萄糖的测定无干扰。将该传感器应用于人血浆中葡萄糖含量的测定,其与葡萄糖试剂盒所测结果基本吻合。另外,对人血液样品进行了回收率实验,回收率为95-104%。结果表明:采用尼龙网作载体制得生物活性敏感材料,具有保持生物活性、机械性能好、多次拆卸不损坏、气液通透性好,它与氧电极组成的葡萄糖生物传感器具有选择性好、响应快速、重现性好、制备简便、使用寿命长等优点。第五章:本章利用碳纳米管可作为高分子材料壳聚糖的增强剂,用溶液混合法将羧基化的碳纳米管分散于壳聚糖溶液中,然后将葡萄糖氧化酶包埋于鸡蛋壳膜与溶有碳纳米管的壳聚糖膜之间,再将其固定于氧电极表面制得葡萄糖生物传感器,并对实验条件进行了初步探索并作了一些探讨。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 绪论
  • 1.1 生物传感器概述
  • 1.1.1 生物传感器的工作原理
  • 1.1.2 生物传感器的分类及特点
  • 1.2 生物传感器的生物组分固定化方法及其应用
  • 1.2.1 吸附法
  • 1.2.2 包埋法
  • 1.2.3 共价键合法
  • 1.2.4 交联法
  • 1.2.5 新的固定酶技术
  • 1.3 本论文的立题背景及主要研究内容
  • 1.3.1 立题背景
  • 1.3.2 主要研究内容
  • 1.3.3 创新点
  • 参考文献
  • 第二章 包埋法固定酶的葡萄糖生物传感器的研制及其分析应用
  • 2.1 引言
  • 2.2 实验部分
  • 2.2.1 仪器与试剂
  • 2.2.2 酶电极的制备
  • 2.2.3 测定方法
  • 2.3 结果与讨论
  • 2.3.1 葡萄糖生物传感器的响应行为
  • 2.3.2 壳聚糖溶液浓度对酶膜响应的影响
  • 2.3.3 固定酶量的影响
  • 2.3.4 用壳聚糖或戊二醛固定酶制得酶膜响应信号比较
  • 2.3.5 缓冲溶液pH值的影响
  • 2.3.6 离子强度的影响
  • 2.3.7 温度的影响
  • 2.3.8 传感器的分析性能
  • 2.3.9 电极的选择性
  • 2.3.10 实际样品的测定
  • 2.4 结论
  • 参考文献
  • 第三章 尼龙网的化学修饰
  • 3.1 引言
  • 3.2 实验部分
  • 3.2.1 实验原理
  • 3.2.2 仪器与试剂
  • 3.2.3 尼龙网的活化
  • 3.2.4 酶电极的制备
  • 3.2.5 测定方法
  • 3.3 结果与讨论
  • 3.3.1 尼龙网活化原理
  • 3.3.2 硫酸二甲酯的影响
  • 3.3.3 赖氨酸的影响
  • 3.3.4 戊二醛的影响
  • 3.4 结论
  • 参考文献
  • 第四章 尼龙网为固定酶载体的葡萄糖生物传感器的研制及其分析应用
  • 4.1 引言
  • 4.2 实验部分
  • 4.2.1 仪器与试剂
  • 4.2.2 酶电极的制备
  • 4.2.3 测定方法
  • 4.3 结果与讨论
  • 4.3.1 葡萄糖生物传感器的响应行为
  • 4.3.2 固定酶量的影响
  • 4.3.3 缓冲溶液pH值的影响
  • 4.3.4 温度的影响
  • 4.3.5 离子强度的影响
  • 4.3.6 传感器的响应性能
  • 4.3.7 电极的选择性
  • 4.3.8 实际样品的分析测定
  • 4.4 结论
  • 参考文献
  • 第五章 复合膜为固定酶载体的葡萄糖生物传感器的研制及其分析应用
  • 5.1 引言
  • 5.2 实验部分
  • 5.2.1 仪器与试剂
  • 5.2.2 酶电极的制备
  • 5.2.3 测定方法
  • 5.3 结果与讨论
  • 5.3.1 碳纳米管的活化
  • 5.3.2 葡萄糖生物传感器的响应行为
  • 5.4 结论
  • 参考文献
  • 硕士期间发表的论文
  • 附录: 发表论文首页
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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