论文摘要
本实验室以欧洲甘蓝型油菜冬性品种Tapidor和中国半冬性栽培种宁油7号为亲本,构建TN DH群体,包含202个株系；并以该群体为母本,Ningyou7为父本,经过4次回交构建了导入系群体,称之为T-BC4群体。本研究目的为构建甘蓝型油菜双向导入系,因此以Tapidor为父本,构建了世代平衡的回交导入系群体,称之为N-BC4群体。同时,对双导入系群体进行了初步评估,并利用N-BC4群体对A9硫甙性状相关QTL进行了分析和研究。主要结果如下：完成甘蓝型油菜双向导入系的构建。以Tapidor为父本,构建N-BC4导入系群体。经过回交和自交的方法,得到包含大于4000个单株的BC4F1和BC4F2群体,完成了与T-BC4群体世代平衡的甘蓝型油菜双向导入系构建。另外分别得到来源于111个DH系对应239个单株BC2F1,360个单株BC2F2自交种；107个DH系对应501个单株BC3F,,105个DH系对应418个单株BC3F2自交种。以Ningyou7为父本的T-BC4群体,通过自交,得到来源于131个DH系对应BC4F2单株。经过回交,得到85个株系、133个单株的BC5F1回交种。对双向导入系进行了初步评估。结合开花时间,利用A10和C6 QTL区间内特异性分子标记对T-BC4群体和N-BC2群体进行了评估。调查两个群体约2000个单株开花时间,表明花期持续时间为30天,但即使来源于同一DH系的单株开花时间也有较大差异。同时,通过14对C6和3对A10连锁群开花QTL区间内分子标记进行评估,结果表明在双向导入系中同一QTL的作用刚好相反。开花时间早晚是由于导入相应染色体片段引起的,初步证明导入系群体构建成功。加密A9连锁群硫甙性状相关目标QTL所对应的遗传图谱置信区间。同时,利用T-BC4群体,通过A9连锁群硫甙QTL区间内分子标记进行筛选,为构建分离群体做准备。基于早期研究对对叶片、籽粒中各个硫苷分量和总量进行QTL定位分析,共有2个mQTL,表型方差均在20%以上。本研究利用白菜A9连锁群的BAC和Scaffold序列信息开发分子标记,加密QTL所对应的遗传图谱置信区间,完成目标QTL所对应的遗传图谱置信区间与白菜遗传图谱的比对。通过BAC和BAC-end共设计57对引物,其中3对定位到A9连锁群QTL区间内。经过QTL重新整合分析,目标QTL区间缩短为2cM。对来源于7个DH系810个BC4F2单株以及来源于11个DH系2000个BC4F3单株套袋自交,得到自交种,测定硫甙含量。同时利用目标QTL所对应遗传图谱置信区间内分子标记,对基因型进行筛选,结合基因型和表型,为构建分离群体奠定基础。