大麻素1型受体在糖尿病大鼠海马表达的研究

论文摘要

目的糖尿病是威胁我国人民生命安全的重要疾病。糖尿病并发症几乎可以累及全身各个器官和系统,糖尿病神经系统并发症是其中一个重要方面。近年来,以认知功能障碍为主要临床表现的糖尿病中枢神经系统并发症即糖尿病脑病逐渐为医学界所重视,但其发病机制目前仍未明确。大麻素1型受体(CB1R)被发现与代谢相关,敲除小鼠CB1受体基因后,可使其血中胰岛素与瘦素水平降低,并改善胰岛素和瘦素抵抗,表明CB1受体的激动在饮食诱导的肥胖的发展中起重要作用。抑制CB1受体能够有效减少机体对食物的摄取,并增加能量的消耗。本研究目的是:(1)比较唑链霉素诱导的糖尿病大鼠与正常大鼠海马内大麻素1型受体表达密度差异,为进一步研究大麻素受体在糖尿病脑病发病机制中的作用提供实验证据;(2)分析还原型谷胱甘肽治疗后的糖尿病大鼠海马内大麻素1型受体的表达情况以及与其他两组表达的差异,观察还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠的中枢神经系统的保护作用;(3)分析还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠血糖的影响情况。材料与方法·健康雄性Wistar大鼠40只,体重160—210g,平均体重(195.83±18.00)克。随机选出10只作为正常对照组(NC组),另外30只采用链脲佐菌素(STZ)溶液腹腔一次性注射建立糖尿病模型(注射72小时后测定血糖≥16.67mmol/L即造模成功,成模27只),确定成模后随机分为组:糖尿病组(DM组)和还原型谷胱甘肽治疗组(GSH组),DM组14只,GSH组13只。DM组未控制血糖,GSH组按照0.1g/100g体重/天给予还原型谷胱甘肽腹腔注射,每2周测定一次体重,每4周测定一次血糖。饲养3个月后将大鼠断头取脑,取其海马部位制成石蜡切片,用免疫组织化学方法对其海马内大麻素1型受体(cannabinoid CB1 receptor,CB1R)进行染色,利用QWIN V3图像分析软件对结果进行分析,比较各组大鼠海马CA2区平均光密度值(MOD)。所有实验结果数据均用SPSS10.0统计软件进行分析。结果1.一般情况实验期间DM组大鼠多饮多尿症状明显,皮毛污秽无光泽,生长较慢,精神萎靡,懒于活动,血糖波动在较高水平(17.8～31.1mmol/L),其中4只死亡,GSH组大鼠上述表现减轻,平均血糖稍有降低,但仍明显高于正常对照组大鼠,实验期间死亡3只(试验期间死亡大鼠均未纳入最后统计)。正常对照组大鼠无糖尿病症状,生长及营养状况良好。2.体重及血糖DM组大鼠平均体重为(342.7±16.28)g,平均每2周体重增长(25.72±4.45)g,GSH组大鼠平均体重为(353.1±11.95)g,平均每2周体重增长(28.35±4.97)g,NC组大鼠平均体重为(410.3±6.20)g,平均每2周体重增长为(36.77±4.31)g;DM组大鼠各期血糖平均值分别为(24.31±3.86)(24.8±4.17)(23.69±7.49)(22.57±6.32)mol/L,GSH组大鼠各期血糖平均值为(23.59±4.03)(22.91±7.65)(21.15±7.41)(17.76±8.31)mol/L,NC组大鼠各期血糖平均值(5.73±0.62)(5.92±0.81)(5.84±0.82)(5.55±0.59)mol/L:DM组和GSH组大鼠明显低于正常对照组大鼠同期体重(P＜0.01),而血糖则显著高于正常对照组大鼠(P＜0.01),DM组的平均体重较GSH低,平均血糖较GSH组高,但差别无统计学意义(P＞0.05);DM组有1只大鼠血糖降至正常范围,而GSH组有3只大鼠降至正常范围。3.海马CA2区染色免疫组化染色显示各组大鼠大脑海马CA2区神经元细胞内均有丰富CB1R阳性染色颗粒,其突触内亦有阳性染色颗粒,但光密度值远较神经元内低。DM组大鼠海马内CB1受体的平均光密度值(MOD)为(133.56±1.44),GSH组大鼠海马内CB1受体MOD为(129.43±1.65),NC组大鼠海马内CB1受体MOD为(131.25±1.39)。DM组MOD较GSH组及NC组高,差别有统计学意义(P＜0.05),但GSH组与NC组相比,差别无统计学意义(P＞0.05)。结论(1)糖尿病大鼠海马CA2区CB1受体表达较正常大鼠增多,表明CB1受体在糖尿病脑病的发病机制中起到一定作用。(2)还原型谷胱甘肽可下调糖尿病大鼠海马内CB1受体的表达。(3)还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠血糖无直接作用,但可能通过某种机制间接影响血糖。

论文目录

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