蜂蜜中几种质量指标的快速检测技术及其应用研究

论文摘要

蜂蜜不仅是天然的保健食品,而且具有独特的生理和药理功能。随着人们生活水平的提高,对蜂蜜的的需求量与质量要求越来越高。近年来市场上经常出现劣质及掺假的蜂蜜,这不仅极大地损害了消费者的利益,而且也降低了我国蜂蜜的国际市场竞争力。利用大型仪器如质谱、色谱等来分析蜂蜜质量指标虽然准确、可靠,但存在费时、成本高、操作繁琐等缺点,因此,探索出蜂蜜质量指标的快速、现场检测技术是当前所急需的。本研究旨在建立一种基于试剂盒-比色卡法的快速检测技术,用于检测蜂蜜中淀粉酶值、羟甲基糠醛和脯氨酸含量。所获结果分述如下：1、研究出了测定蜂蜜中淀粉酶值最佳的显色体系：淀粉溶液浓度为0.04%；终止液用量为6.6mL；碘应用液用量为2.5mL；酶解温度为25或40℃。在此基础上,研制出试剂盒和比色卡。该色卡法的检测结果与国标法基本一致。试剂盒重复测定的精密度（RSD）在1%-4%之间,可以保存5个月以上。比色卡的检测范围为0-24 mL/（g-h）,整个检测过程不超过20分钟。本法简单、快速、准确,且能在常温下检测,适合于蜂蜜中淀粉酶值的半定量快速检测。2、研究出了测定蜂蜜中羟甲基糠醛最佳的显色体系：最大吸收波长为550nm；对甲苯胺的最佳浓度为0.15g/mL,巴比妥酸的最佳浓度为5mg/mL,以体积比为5：1混合后制成应用液；显色温度选为25℃,显色时间选为5min。该试剂盒-比色卡法的检测结果与国标法的分光光度计法检测的结果基本一致,精密度也较好。比色卡的检测范围为0-60 mg/kg,整个检测过程不超过10分钟。该试剂盒可以保存约15天,所用试剂量总体积为4mL。以上结果表明,利用该法测定蜂蜜中的HMF含量准确度较高、精密度好,且快速、成本低,适合于蜂蜜中羟甲基糠醛的半定量快速检测。3、研究出了测定脯氨酸含量的最佳的显色体系：最大吸收波长为510nm；酸性茚三酮的浓度为2%,其中茚三酮溶液与甲酸的最佳比例为1：1；以丙酮溶液替代异丙醇,可以大大改善显色体系的稳定性；沸水浴加热时间选为15min。在此基础上研制出试剂盒和含有多颜色的脯氨酸比色卡。利用该试剂盒-比色卡法测定蜂蜜中的脯氨酸具有较高的准确度和精密度,且比色卡的检测范围为0-50mg/100g,整个检测过程不超过20分钟。该试剂盒可以保存一个月以上。实验结果表明,该法不但简单、快速,而且显色稳定,适合蜂蜜中脯氨酸的半定量快速检测。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 蜂蜜概况
• 1.1.1 蜂蜜中的化学成分
• 1.1.2 蜂蜜的质量现状
• 1.2 检测蜂蜜质量技术的研究进展
• 1.2.1 仪器检测技术
• 1.2.1.1 GC
• 1.2.1.2 高效液相色谱法
• 1.2.1.3 旋光法
• 1.2.2 现场快速检测技术
• 1.2.2.1 快速检测仪法
• 1.2.2.2 试纸法
• 1.2.2.3 酶联免疫试剂盒法
• 1.3 蜂蜜中几种质量指标检测技术的研究进展
• 1.3.1 淀粉酶值检测技术研究进展
• 1.3.1.1 试管比色法
• 1.3.1.2 分光光度法
• 1.3.1.3 标准参考比色法
• 1.3.1.4 同工酶电泳技术
• 1.3.2 羟甲基糠醛检测技术研究进展
• 1.3.2.1 紫外分光光度法
• 1.3.2.2 Winkler法
• 1.3.2.3 近红外光谱分析法
• 1.3.2.4 高效液相色谱法
• 1.3.3 脯氨酸检测技术研究进展
• 1.4 本试验的研究意义与内容
• 1.4.1 研究意义
• 1.4.2 研究内容
• 1.4.3 研究的创新点
• 第二章 蜂蜜中淀粉酶值的快速检测技术的研究
• 2.1 材料
• 2.1.1 样品来源
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.4 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 原理
• 2.2.2 快速检测方法
• 2.2.2.1 淀粉溶液的标定
• 2.2.2.2 样品的制备
• 2.2.2.3 样品测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 试验中影响因素的选择
• 2.3.1.1 淀粉浓度的选择
• 2.3.1.2 淀粉溶液的标定
• 2.3.1.3 温度对淀粉溶液标定的影响
• 2.3.1.4 显色体系的稳定性试验
• 2.3.1.5 酶解时间对显色反应的影响
• 2.3.1.6 酶解温度对显色反应的影响
• 2.3.1.7 在同一酶解时间下,不同酶值样品的吸光度变化规律
• 2.3.1.8 计算
• 2.3.2 比色卡的制作
• 2.3.3 评价试验
• 2.3.3.1 准确度试验
• 2.3.3.2 方法的精密度试验
• 2.3.3.3 试剂盒法的稳定性试验
• 2.4 小结
• 第三章 蜂蜜中羟甲基糖酸的快速检测技术的研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 样品来源
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 主要试剂的配制
• 3.1.4 主要仪器
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 原理
• 3.2.2 快速检测方法
• 3.2.2.1 HMF标准工作溶液的配置
• 3.2.2.2 标准曲线绘制
• 3.2.2.3 样品制备
• 3.2.2.4 样品测定
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 测定条件的优化
• 3.3.1.1 最大吸光波长的选择
• 3.3.1.2 显色时间及显色络合物的稳定性试验
• 3.3.1.3 不同对甲苯胺溶液浓度对吸光度的影响
• 3.3.1.4 不同巴比土酸浓度对吸光度的影响
• 3.3.1.5 不同的对甲苯胺和巴比妥酸加入方式对吸光度的影响
• 3.3.1.6 标准曲线的绘制
• 3.3.1.7 样品加澄清剂对测定结果的影响
• 3.3.1.8 公式
• 3.3.2 比色卡的制作
• 3.3.3 评价试验
• 3.3.3.1 准确度试验
• 3.3.3.2 方法的精密度试验
• 3.3.3.3 试剂盒的保存期
• 3.4 小结
• 第四章 蜂蜜中的脯氨酸的快速检测技术的研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 样品来源
• 4.1.2 主要试剂
• 4.1.3 主要试剂的配制
• 4.1.4 主要仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 原理
• 4.2.2 快速测定方法
• 4.2.2.1 25μg脯氨酸标准工作溶液的配置
• 4.2.2.2 标准曲线绘制
• 4.2.2.3 样品制备
• 4.2.2.4 样品测定
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 测定条件的优化
• 4.3.1.1 不同有机溶剂对络合物稳定性的影响
• 4.3.1.2 吸收光谱曲线图
• 4.3.1.3 不同比例的甲酸与茚三酮-乙二醇甲醚混合对显色络合物的影响
• 4.3.1.4 不同浓度的茚三酮溶液对显色溶液的影响
• 4.3.1.5 煮沸时间对吸光度的影响
• 4.3.1.6 显色络合物的稳定性
• 4.3.1.7 标准曲线绘制
• 4.3.1.8 结果计算
• 4.3.2 比色卡的制作
• 4.3.3 评价试验
• 4.3.3.1 准确度试验
• 4.3.3.2 方法的精密度实验
• 4.3.3.3 试剂盒的保存期
• 4.4 小结
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.1.1 蜂蜜中淀粉酶值快速检测技术的研究
• 5.1.2 蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测技术的研究
• 5.1.3 蜂蜜中脯氨酸快速检测技术的研究
• 5.2 展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢