大蒜素对类风湿性关节炎的作用及机制研究

论文摘要

目的:通过两种类风湿性关节炎常用模型—佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）模型与胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）模型,研究大蒜素对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,建立大鼠AA模型。检测各组大鼠致炎后体重变化及足爪肿胀度,并对其关节炎症进行评分,石蜡切片HE染色对关节组织作病理检查,MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应,免疫印迹法检测关节软组织中环加氧酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和诱导性一氧化氮合酶（induced-nitric oxide synthase, iNOS）蛋白的表达,EIA法测定关节软组织中前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）水平,NO试剂盒检测关节软组织中NO的含量。CⅡ胶原200μl溶于100μl 0.05 M醋酸中,并与等体积（100μl）弗氏完全佐剂充分混合后,注射于DBA/1J小鼠尾根部皮下。初次致敏后第21 d,再次小鼠尾根部皮下注射相同体积试剂给予免疫激发,建立小鼠CIA模型。在成功建立CIA模型的基础上,检测各组小鼠足爪炎症的肿胀度,并对其关节炎症进行评分。对小鼠关节组织作病理检查,MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应,免疫印迹法检测关节软组织中COX-2、iNOS蛋白的表达,EIA法测定关节软组织中PGE2水平,NO试剂盒检测关节软组织中NO的含量。ELISA法检测血清中炎性因子TNF-α、IL-6的表达。结果:大蒜素（5、10、15 mg·kg-1）腹腔注射给药能剂量依赖性地减轻AA大鼠的关节炎症,抑制AA大鼠Con A诱导的脾淋巴细胞增殖反应,下调AA大鼠踝关节软组织中COX-2和iNOS蛋白的过高表达,并降低关节软组织中PGE2水平和NO含量。同时病理检查发现大蒜素可抑制AA小鼠滑膜增生,减轻炎性细胞浸润。大蒜素（10、20、30 mg·kg-1）腹腔注射给药剂量依赖性地减轻CIA小鼠的关节炎症,抑制CIA小鼠CⅡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应及踝关节软组织中COX-2、iNOS蛋白过高表达,降低关节软组织中PGE2水平和NO含量,降低血清中TNF-α、IL-6的水平。同时病理检查发现可改善局部关节炎症状况,抑制CIA小鼠关节腔狭窄、滑膜增生以及炎性细胞浸润。结论:大蒜素对大鼠AA和小鼠CIA具有一定的治疗作用,其机制可能与大蒜素调节免疫,以及通过抑制NF-κB调控的下游炎症分子COX-2、iNOS、TNF-α、IL-6的表达发挥抗炎作用有关。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：大蒜素对类风湿性关节炎的作用及机制研究
• 前言
• 第一部分 大蒜素对类风湿性关节炎模型的作用
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 第二部分 大蒜素对类风湿性关节炎模型治疗作用的机制研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 附图
• 文献综述：选择性剪接在 Toll 样受体4 信号转导通路中的作用
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文