臂重复蛋白基因论文-刘健鹏

臂重复蛋白基因论文-刘健鹏

导读:本文包含了臂重复蛋白基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:CTHRC1基因,胶质母细胞瘤,RNA干扰,细胞迁移

臂重复蛋白基因论文文献综述

刘健鹏[1](2017)在《胶原叁螺旋重复蛋白1(CTHRC1)基因沉默对胶质母细胞瘤上皮间质转化及细胞迁移的影响》一文中研究指出目的:通过RNA干扰技术抑制胶原叁螺旋重复蛋白1(CTHRC1)基因,研究其对胶质母细胞瘤上皮间质转化及肿瘤细胞迁移的影响,为临床胶质母细胞瘤的靶向治疗及其预后提供理论依据。方法:1、收集46名胶质母细胞瘤患者的病理组织及16名非肿瘤患者的正常皮质组织,用定量逆转录聚合酶链反应技术即qRT-PCR(Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)和蛋白质印迹法(Western blot技术)检测这两种组织中CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平。2、购买人类正常星形胶质细胞株1800及人类胶质瘤细胞株U-118MG、U-87MG、U-373MG,用qRT-PCR和Western blot技术检测以上四种细胞株中CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平。3、将U-87MG细胞株分成叁组,用脂质体2000介导CTHRC1-si RNA质粒、对照质粒处理细胞株,得到CTHRC1-si RNA组、对照组,并单独用脂质体2000处理U-87MG细胞株,进行空白对照。用qRT-PCR和Western blot技术检测叁组细胞株中CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平。4、对转染的叁组U-87MG细胞株进行细胞增殖及迁移实验,检测叁组细胞株细胞的增殖及迁移能力。5、用qRT-PCR和Western blot技术检测转染的叁组U-87MG细胞株细胞中上皮性标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)和间质标记物N钙黏蛋白(N-cadherin)及Snail、Slug基因的m RNA和蛋白质表达水平。6、用Western blot技术测定叁组U-87MG细胞株中β连环素(β-catenin)的表达水平。结果:1、胶质母细胞瘤组织中CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平明显高于正常皮质组织。2、U-373MG、U-118MG、U-87MG细胞株中CTHRC1基因m RNA和蛋白质表达的水平显着高于正常人星形胶质细胞株1800。3、CTHRC1-si RNA组CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平较对照组和空白组明显下调,而后两者CTHRC1基因m RNA和蛋白质的表达水平没有显着差异。4、CTHRC1-si RNA组细胞增殖能力被抑制,呈时间依赖性,较空白组和对照组明显下降;CTHRC1-si RNA组细胞迁移能力下降,较对照组和空白组明显降低。5、qRT-PCR和Western blot检测结果显示,CTHRC1-si RNA组E-cadherin基因m RNA和蛋白质的表达水平上调,而Ncadherin、Snail、Slug基因的m RNA和蛋白质的表达水平下调。在空白组和对照组E-cadherin、N-cadherin、Snail、Slug基因的m RNA和蛋白质表达水平没有明显差异。6、Western blot测定CTHRC1-si RNA组β-catenin的表达明显下调。结论:与正常皮质组织相比,胶质母细胞瘤组织中存在CTHRC1基因过表达的现象。CTHRC1基因的沉默可以抑制胶质母细胞瘤的迁移,这可能是通过抑制胶质母细胞瘤的上皮间质转化来实现的。CTHRC1基因在胶质母细胞瘤中具有潜在的致癌作用,对肿瘤的进展起着至关重要的作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-05-01)

游晓慧,李威,陶启长,孙小芬,唐克轩[2](2011)在《WD40重复蛋白家族基因At1g65030调控拟南芥种子的重量与体积》一文中研究指出植物中WD40-repeat蛋白在细胞周期调控等方面具有重要作用。本研究鉴定了一株拟南芥WD40-repeat蛋白基因突变体at1g65030,与野生型植株相比种子重量增重体积变大,营养生长长势较弱,角果种子结实率较低。以突变体作为母本/父本与野生型父本/母本杂交,前者杂交后代未显示有母本的突变表型,后者部分杂交后代显示出父本的突变表型,统计突变体后代分离比符合1:1。用苯胺兰(DAB)、4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)、2,3,5-氯化叁苯基四氮唑(TTC)、碘-碘化钾花粉染色,发现花粉部分败育且主要为核败育。爱氏苏木精花粉染色结果显示可观察到正常减数分裂各时期形态。采取热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)方法确认突变基因位于第一条染色体65030位置,生物信息学分析表明该基因含有DWD基序。半定量RT-PCR分析发现在拟南芥发育晚期该基因在花器官中大量表达,过表达该基因使种子重量减轻。推测At1g65030影响了拟南芥花粉发育细胞核有丝分裂过程,该研究增加了人们对调控拟南芥花粉发育分子机制的认识。(本文来源于《植物生理学报》期刊2011年07期)

游晓慧[3](2009)在《WD40重复蛋白家族基因Atlg65030调控拟南芥种子质量与体积的研究》一文中研究指出WD40-repeat蛋白在真核生物中通过保守、重复的WD40基元介导蛋白之间的互作。已有报道指出在哺乳动物及高等植物拟南芥中WD40-repeat蛋白起到泛素化过程中DDB1-CUL4-RC1 (Damaged DNA Binding 1-Cullin 4-Regulator of Cullins 1)型E3泛素-蛋白连接酶底物接收蛋白的作用。目前植物中WD40-repeat蛋白功能研究较少,但仍有研究表明其在信号转导、细胞周期调控和RNA加工等方面具有重要作用。雄性不育在农业育种上具有重大应用价值,之前对其研究主要定位于描述性和细胞水平,近年来随着获得的雄性不育基因数量增多,不仅加快了植物花粉发育及雄性不育分子机理的研究,更有力推动了杂种优势更高层次的运用。本研究鉴定了一株拟南芥WD40-repeat蛋白基因突变体,其种子质量与体积和野生型相比均有显着增重、增大。观察其营养生长和野生型相比长势较弱。通过热不对称交错PCR (thermal asymmetric interlaced PCR, TAIL-PCR)确认了该突变基因位于拟南芥第一条染色体65030位置。生物信息学学分析表明该基因含有DWD基序,属于WD40-repeat蛋白家族。洋葱细胞表皮定位表明其定位于细胞核。半定量RT-PCR表明在拟南芥发育晚期该基因在花器官中大量表达。过表达该基因导致种子质量减轻,无法获得抑制该基因表达型阳性转化植株。此外还观察到突变体角果与野生型相比结实率显着较低。为了进行进一步机理探讨,我们分别以突变体作为母本/父本与野生型父本/母本杂交,前者无法获得突变体阳性植株,后者部分获得突变体阳性植株,表明该基因影响到了雄配子发育且作用呈剂量效应。对其后代分离比进行统计显示其不符合经典孟德尔遗传,雄配子部分败育。为了深入研究花粉败育原因,我们分别进行了苯胺兰(DAB)花粉体内萌发、4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)花粉细胞核、2,3,5-氯化叁苯基四氮唑(TTC)/碘-碘化钾花粉细胞质染色,发现花粉败育主要是由于细胞核败育引起。为了了解花粉核败育主要发生在哪个时期,我们进行了爱氏苏木精染色,结果表明突变体花粉发育可观察到正常减数分裂各时期形态,推测该基因主要调控花粉发育过程中减数分裂结束后的有丝分裂周期。综上所述,本研究阐明了植物中WD40-repeat蛋白通过调控细胞分裂周期影响花粉细胞核发育导致花粉部分败育,最终正常发育种子因竞争性营养抑制产生质量较重、体积较大表型,不仅推动了花粉发育机理研究,同时发现的雄性不育突变体及种子质量与体积显着增大表型也具有较大农业应用价值。(本文来源于《复旦大学》期刊2009-05-28)

臂重复蛋白基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

植物中WD40-repeat蛋白在细胞周期调控等方面具有重要作用。本研究鉴定了一株拟南芥WD40-repeat蛋白基因突变体at1g65030,与野生型植株相比种子重量增重体积变大,营养生长长势较弱,角果种子结实率较低。以突变体作为母本/父本与野生型父本/母本杂交,前者杂交后代未显示有母本的突变表型,后者部分杂交后代显示出父本的突变表型,统计突变体后代分离比符合1:1。用苯胺兰(DAB)、4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)、2,3,5-氯化叁苯基四氮唑(TTC)、碘-碘化钾花粉染色,发现花粉部分败育且主要为核败育。爱氏苏木精花粉染色结果显示可观察到正常减数分裂各时期形态。采取热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)方法确认突变基因位于第一条染色体65030位置,生物信息学分析表明该基因含有DWD基序。半定量RT-PCR分析发现在拟南芥发育晚期该基因在花器官中大量表达,过表达该基因使种子重量减轻。推测At1g65030影响了拟南芥花粉发育细胞核有丝分裂过程,该研究增加了人们对调控拟南芥花粉发育分子机制的认识。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

臂重复蛋白基因论文参考文献

[1].刘健鹏.胶原叁螺旋重复蛋白1(CTHRC1)基因沉默对胶质母细胞瘤上皮间质转化及细胞迁移的影响[D].吉林大学.2017

[2].游晓慧,李威,陶启长,孙小芬,唐克轩.WD40重复蛋白家族基因At1g65030调控拟南芥种子的重量与体积[J].植物生理学报.2011

[3].游晓慧.WD40重复蛋白家族基因Atlg65030调控拟南芥种子质量与体积的研究[D].复旦大学.2009

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