苦豆子提取物对肠癌细胞株受体酪氨酸激酶EphA1的影响

论文摘要

目的：探讨苦豆子提取物对人肠癌细胞株HCT-116的抗增殖及诱导凋亡的效果，及其对受体酪氨酸激酶家族成员EphA1基因表达的影响，为中医药进一步提高治疗肠癌疗效提供实验依据。方法：使用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法，加入终浓度分别为：0.6mg/mL，0.9mg/mL，1.2mg/mL，1.5mg/mL，1.8mg/mL，2.1mg/mL的苦豆子提取物，计算细胞生长抑制率，测定IC50值；分别用1.2mg/mL，1.5mg/mL苦豆子提取物及空白培养基处理48小时后，使用流式细胞法（FCM）检测苦豆子提取物对人肠癌HCT116细胞生长抑制和诱导凋亡作用；Western Blot检测EphA1基因蛋白的表达，处理组给予苦豆子提取物IC50浓度，即1.2mg/ml，分别于48及72小时收集细胞，提取细胞总蛋白，抗体孵育后，于成像系统上检测蛋白条带，用Quantity one软件进行蛋白条带灰度分析。并进行相关统计学分析。结果：实验显示，1.不同浓度苦豆子提取物作用于人肠癌细胞株HCT116后，与对照组比较细胞生长明显受到抑制（P<0.05），其IC50为1.2mg/ml，并有良好的量效关系；2.流式细胞法显示，细胞凋亡百分率随着药物作用浓度的增加而增加；3.Western blot实验显示苦豆子提取物分别作用于HCT116细胞48h，72h EphA1的蛋白表达随着苦豆子提取物作用时间的延长，出现了先增高，后降低的表达趋势。不同时相间的表达比较均有显著性差异。结论：中药苦豆子提取物能抑制人肠癌HCT-116细胞增殖，并能诱导其凋亡，对EphA1蛋白表达有一定程度的影响。

论文目录

• 中英文缩略词对照表
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 研究方法与内容
• 1 材料
• 1.1 细胞株
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂及来源
• 1.4 主要试剂配制
• 2 实验内容
• 3 实验方法
• 3.1 四甲基偶氮唑盐（MTT）实验
• 3.2 AnnexinV/PI 双标测细胞的早期凋亡
• 3.3 Western Blot 检测 EphA1 蛋白的表达
• 3.5 统计方法
• 3.6 技术路线
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表