心理应激致大鼠咬肌疼痛敏感及其机制的研究

论文摘要

疼痛是由一定的刺激（伤害性刺激）作用于外周感受器（伤害性感受器）换能后转变成神经冲动（伤害性信息）,循相应的感觉传人通路（伤害性传人通路）进人中枢神经系统,经脊髓、脑干、间脑中继后直到大脑边缘系统和大脑皮质,通过各级中枢整合后产生疼痛感觉和疼痛反应,它并不是一个简单的过程,它包括转导（transduction）、传导（transmission）、调控（modulation）和知觉（perception）四个不同的阶段。研究证实外周组织损伤通过外周敏感化（peripheral sensitization）和中枢敏感化（central sensitization）机制来调节神经系统的反应性,外周敏感化和中枢敏感化促使了组织损伤后痛觉过敏状态的形成。头面部疼痛是最常见的疼痛疾病,严重影响到人类的日常生活和健康,头面部疼痛的种类很多,包括颞下颌关节紊乱病、三叉神经痛、偏头痛等,心理因素在其发生、反复发作和治疗中的作用不容忽视。但目前关于心理因素在头面部疼痛中作用的研究仅限于临床流行病学调查,以及肌电,血流量等微观方面改变的研究,虽然取得了可喜的成绩,充分证实了心理应激与头面部疼痛之间的相关性,但是关于机制方面的研究较少,更无实验涉及心理应激对口颌面部局部及中枢疼痛因子代谢影响的研究,以及应激去除后恢复状况的研究。基于上述原因,本研究在前期研究的基础上,选取咬肌和三叉神经节作为主要的研究对象,采用已有交流箱心理应激模型（该模型可以很好地模拟应激作用下人类的抑郁和焦虑状态,同时我们设立应激指标的平行检测来保证研究结论的可靠性）,从应激后行为学改变和疼痛相关神经肽类物质变化等几个方面,初步探讨应激引起口颌面部肌肉疼痛敏感度变化的机制,进一步明确应激导致咀嚼肌功能紊乱以及头面部肌肉疼痛的病理生理学基础。本研究在第一部分采用交流箱心理应激模型,将100只SD大鼠,随机分为5组:空白对照组、心理应激（Psychological Stress, PS）组、心理应激+地西泮注射（Psychological Stress plus Diazepam Injection, PS+DI）组,心理应激+盐水注射（Psychological Stress plus Saline Injection, PS+SI）组和足部电击（Footshock, FS）组,实验时各组大鼠均同处在交流箱内,同条件饲养。参照Ren方法,根据von Frey纤维粗细和动物痛觉反应次数,确定咬肌疼痛分值。从应激前第7天起开始记录大鼠咬肌的机械性疼痛阈值,然后采用下面公式进行计算:第n天的疼痛分值差=第n天疼痛分值-实验前适应第7天的疼痛分值,以疼痛分值差作为指标,比较应激前后疼痛敏感程度。结果表明,应激2-3天后PS组、PS+DI组和PS+SI组大鼠咬肌疼痛阈值出现变化,在6-8天的时候出现最高峰,12-14天的时候达到稳定状态,但疼痛阈值仍低于空白对照组。PS+DI组疼痛阈值随时间的变化趋势与心理应激组相同,但疼痛阈值的具体数值要明显高于后者。这提示我们,心理应激可以导致咬肌痛觉敏感,抗抑郁药物可以降低应激导致的疼痛敏感度。通过第一部分研究,发现心理应激可以导致咬肌疼痛敏感度出现变化,因此第二部分中我们继续运用该模型,分别在应激后的第1天、第3天、第7天、第14天、去除应激的第7天和第14天,取大鼠咬肌组织,通过反转录-聚合酶链作用（RT-PCR）方法,检测咬肌P物质（substance P, SP）mRNA和降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide, CGRP）mRNA水平的变化,结果发现,应激第1天起,咬肌SP mRNA和CGRP mRNA的表达开始升高,在第7天时达到最高峰,然后逐渐降低,但在第14天时仍高于正常对照组,去除应激后表达逐渐降低,在恢复14天后基本达到正常水平。为进一步了解应激后低级疼痛中枢中SP mRNA和CGRP mRNA水平的变化,探讨应激致咬肌疼痛敏感的机制,我们分别在相同的时间点取三叉神经节组织,使用RT-PCR技术,检测三叉神经节中SP mRNA和CGRP mRNA水平的变化,研究发现,三叉神经节中SP mRNA和CGRP mRNA的表达在应激第1天无显著性差异,随后逐渐升高,在第7天时达到最高峰,又逐渐降低,但在第14天时仍高于对照水平,去除应激后其表达逐渐降低,在恢复14天后基本达到正常水平。实验结论:1.心理应激可以导致咬肌痛觉敏感,抗抑郁药物对抗降低应激导致的疼痛敏感度的升高。2.心理应激可以引起咬肌和三叉神经节中SP mRNA和CGRP mRNA表达发生变化,这可能是心理应激导致咀嚼肌痛觉敏感的致病因素之一。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 实验一 情绪应激对大鼠咀嚼肌疼痛敏感度的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 心理应激状态下大鼠咬肌和三叉神经节中SP 和CGRP 表达变化的研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢