灯盏乙素PEG酯的合成、性质及药动学研究

论文摘要

灯盏花素（breviscapine）是菊科植物灯盏细辛（Erigeron breviscapus）的提取物，主要有效成分为灯盏乙素（scutellarin），即4′，5，6-三羟基黄酮-7-葡糖醛酸苷。灯盏乙素具有扩张血管、增加动脉流量、降低血液黏度、降低外周阻力、减少血小板计数和抑制血小板凝集等作用。临床主要用于治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血损伤及脑血栓形成等。灯盏乙素从20世纪70年代初期就已开始研究，但由于水溶性低，口服生物利用度差，使其临床应用受到限制。 目前，新兴的聚乙二醇修饰技术已成为一种用于改进药物体内药动学性质的新方法。PEG化（PEGylation）可在一定程度上改变药物的性质，应用于增加药物稳定性和溶解性、提高生物利用度、提高受体亲和力、延长体内半衰期等。但目前的PEG修饰技术主要集中于静脉给药的多肽和蛋白类药物的研究中，用于口服给药的小分子药物的PEG化尚未见报道。由于PEG修饰技术具有的优势，其在小分子药物，尤其是在难溶性中药有效成分的结构改造中具有极大的应用潜力。 本研究以灯盏乙素为模型药物，用多种分子量PEG（200～1000 Da）对其结构进行修饰，得到一系列不同分子量的衍生物，并对其理化性质、小肠吸收及体内动力学情况进行考察，研究灯盏乙素经PEG修饰后其口服吸收及体内药动学的变化，以期改善灯盏乙素的口服吸收，并探讨小分子药物PEG化方法及PEG化对口服吸收和体内药动学的影响规律。 分别合成了灯盏乙素—PEG200酯、灯盏乙素—PEG400酯和灯盏乙素—PEG1000酯，收率分别为43％、35％和18％。通过与文献所载灯盏乙素光谱数据的比较，对产物1H NMR，IR，UV和MS数据进行归属解析，证实为目标产物。 为考察灯盏乙素PEG化后理化性质的改变对其口服吸收的影响，根据文献方法，使用显微熔点测定仪、经典溶解度测定法、摇瓶法和透析法

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 灯盏乙素PEG酯的合成
• 1.1 合成路线的选择
• 1.2 实验仪器及试剂
• 1.3 实验
• 1.3.1 灯盏乙素PEG200酯的合成
• 1.3.2 灯盏乙素PEG400酯的合成
• 1.3.3 灯盏乙素PEG1000酯的合成
• 1.4 目标化合物的波谱数据
• 1.5 小结与讨论
• 第二章 灯盏乙素PEG酯理化常数测定
• 2.1 实验仪器及试剂
• 2.2 方法与结果
• 2.2.1 性状,熔点
• 2.2.2 分析方法的建立
• 2.2.3 溶解度的测定
• 2.2.4 油／水分配系数的测定
• 2.2.5 pKa值的测定
• 2.3 小结与讨论
• 第三章 灯盏乙素—PEG酯体外稳定性研究
• 3.1 仪器及试药
• 3.2 灯盏乙素—PEG200酯含量测定方法
• 3.2.1 色谱条件
• 3.2.2 标准曲线的制备
• 3.2.3 回收率试验
• 3.2.4 精密度考察
• 3.3 灯盏乙素—PEG酯体外稳定性的考察
• 3.3.1 灯盏乙素—PEG酯在不同pH值缓冲溶液中的稳定性
• 3.3.2 灯盏乙素—PEG酯在不同温度缓冲溶液中的稳定性
• 3.4 灯盏乙素—PEG酯在血浆中的稳定性研究
• 3.4.1 血浆中灯盏乙素HPLC分析方法的建立
• 3.4.2 灯盏乙素—PEG酯在血浆中的稳定性
• 3.5 小结与讨论
• 第四章 灯盏乙素及其PEG酯大鼠小肠吸收特性研究
• 4.1 仪器、试药及动物
• 4.2 大鼠原位灌注模型建立
• 4.2.1 实验原理
• 4.2.2 实验方法
• 4.3 酚红浓度测定
• 4.3.1 样品处理与测定
• 4.3.2 专属性实验
• 4.4 肠灌注液中灯盏乙素和灯盏乙素—PEG酯浓度的测定
• 4.4.1 双波长等吸收消去测定法的建立
• 4.4.2 方法回收率的测定
• 4.4.3 方法精密度的测定
• 4.4.4 结果
• 4.5 灯盏乙素及其不同分子量PEG酯大鼠小肠吸收的比较
• 4.5.1 溶液的配制
• 4.5.2 试药在空白肠循环液中稳定性的考察
• 4.5.3 肠壁对试药物理吸附、代谢和摄取的考察
• 4.5.4 实验方法与结果
• 4.5.5 统计分析
• 4.5.6 小结
• 4.6 不同剂量组小肠吸收研究
• 4.6.1 给药剂量
• 4.6.2 实验方法与结果
• 4.6.3 统计分析
• 4.6.4 小结
• 4.7 小肠最佳吸收部位研究
• 4.7.1 供试液的配制
• 4.7.2 实验方法及结果
• 4.7.3 小结
• 4.8 灯盏乙素及其PEG酯原位胃吸收
• 4.8.1 胃灌注液中灯盏乙素及其PEG酯浓度测定方法的建立
• 4.8.2 浓度测定方法学研究结果
• 4.8.3 胃灌注液的配制
• 4.8.4 药物在胃灌注液中稳定性的考察
• 4.8.5 胃壁对药物物理吸附、代谢和摄取的考察
• 4.8.6 实验方法与结果
• 4.8.7 小结
• 4.9 小结与讨论
• 第五章 灯盏乙素PEG酯大鼠体内动力学研究
• 5.1 材料与仪器
• 5.2 HPLC-UV分析方法的建立
• 5.2.1 色谱条件
• 5.2.2 储备液的配制
• 5.2.3 血浆样品的预处理
• 5.2.4 分析方法的确证
• 5.3 大鼠静脉给药药动力学研究
• 5.3.1 灯盏乙素大鼠尾静脉注射药动学研究
• 5.3.2 灯盏乙素PEG酯大鼠尾静脉注射药动学研究
• 5.4 灯盏乙素和灯盏乙素PEG酯大鼠灌胃给药吸收动力学研究
• 5.4.1 试验方法
• 5.4.2 试验结果
• 5.5 小结与讨论
• 第六章 灯盏乙素PEG酯的急性毒性试验
• 6.1 试药和动物
• 6.2 试验部分
• 6.2.1 急性毒性试验方法和原理
• 6.2.2 给药途径与给药方法
• 6.2.3 预试验
• 6.2.4 最大耐受试验
• 6.3 试验结果
• 6.3.1 预试验结果
• 6.3.2 毒性反应
• 6.3.3 最大耐受量
• 总结与讨论
• 参考文献
• 致谢