论文摘要
本试验对羊传染性脓疱病毒吉林省分离株Orf-ys株进行传代培养,待出现典型的细胞病变后收毒并进行DNA的提取,根据已发表的羊传染性脓疱病毒B2L基因序列,设计引物,进行VEGF基因的特异性扩增,并将其克隆到pMD18-T载体后进行测序。结果表明：Orf-ys株的VEGF基因长为414bp。经核苷酸序列比较、分析结果表明：Orf-ys株与Matsumoto同源性最高,达98%,与IT01最低,为84%,说明Orf-ys株VEGF基因与参考毒株之间差异不大。本试验根据已发表的羊传染性脓疱病毒NZ2株的序列,设计引物,对Orf-ys株、羊痘病毒和新生犊牛睾丸原代细胞的核酸进行PCR扩增,结果表明：只有Orf-ys株扩增出414bp左右的特异性片段,其它均为阴性,说明该PCR扩增体系具有良好的特异性。对Orf-ys株进行敏感性试验,结果表明：该PCR扩增体系可检测出4.5ng模板,说明该PCR扩增体系具有较高的敏感性。
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标签：羊传染性脓疮病毒论文; 克隆论文; 序列分析论文; 诊断论文;