中药透皮制剂在奶牛血和乳中的药动学特征研究

论文摘要

由东北农业大学药理教研室自行研制,具有抗菌消炎,活血化淤作用的中药复方透皮制剂,主要用于治疗奶牛临床型乳腺炎。为了研究透皮制剂在奶牛体内的吸收、代谢过程,特进行了本课题的研究。本试验以反相高效液相色谱法为定量手段,建立了中药复方透皮制剂中的两种有效成分黄芩苷和连翘苷在奶牛乳液和血浆中的检测方法,色谱条件为Kromasil C18色谱柱（4.6×200mm,10μm）;流动相:甲醇-0.002%磷酸水溶液（45﹕55）;检测波长:280nm。结果表明牛乳中黄芩苷和连翘苷在0.01～5.0μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,相关系数r分别为0.9977和0.9958,平均回收率分别为90.39%和88.02%,黄芩苷的平均日内变异系数为1.81%;平均日间变异系数为1.82%;连翘苷的平均日内变异系数为2.69%;平均日间变异系数为3.87%。血浆中黄芩苷和连翘苷在0.01～4.0μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,相关系数r分别为0.9955和0.9973,平均回收率分别为89.73%和92.79%,黄芩苷的平均日内变异系数为1.82%;平均日间变异系数为3.28%;连翘苷的平均日内变异系数为2.97%;平均日间变异系数为3.05%。所建立方法的评价指标均在合理范围内,重现性好,精密度高,方便经济,可作为药动学生物样品的检测方法。以4头患临床型乳腺炎的奶牛为试验动物,在患病乳区局部涂擦中药复方透皮制剂后,分别采集不同时间点的血浆和牛乳样品,采用反相高效液相色谱法测得不同时间点血浆与牛乳中的药物浓度,以MCPKP自动化药动学程序分析数据。试验结果表明,经患病乳区局部涂擦中药复方透皮制剂后,血浆中未能检测到两种有效成分。黄芩苷和连翘苷在牛乳中的药-时数据分析结果表明,两种有效成分在牛乳中的代谢过程属于一级吸收一室开放模型,黄芩苷的理论方程为C=6.2024(e0.2271t-e0.3841t),其主要药动学参数为:Tmax=4.9392h、Cmax=2.8399μg·mL-1、t1/2ka=1.803h、AUC=27.32mg·L-1·h-1、lagtime=0.7467h、t1/2k=3.0520h、K=0.2271·h-1、TCP=28.319h;连翘苷的理论方程为C=1.3942(e0.3399t-e0.3275t),其主要药动学参数为:Tmax=3.6799h、Cmax=0.4922μg·mL-1、t1/2ka=2.1158h、AUC=4.1015mg·L-1·h-1、lagtime=0.683h、t1/2k=2.0386h、K=0.3399·h-1、TCP=14.525h。在患病乳区局部涂擦中药复方透皮制剂后,两种有效成分在乳房局部有缓释作用,吸收速率缓慢,吸收程度高,消除较慢,可以充分发挥在乳房局部的治疗作用。选择检测的两种有效成分黄芩苷和连翘苷属于低极性物质,可经扩散作用进入牛乳。中药毒副作用相对较低,目前两种有效成分没有确证的毒理作用,考虑到药物残留问题时,建议以联合应用的抗生素类药物的停药期为准,若没有联合应用抗生素类药物,患乳腺炎奶牛牛乳一旦没有物理、化学性状的改变时,即可饮用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 中药药代动力学研究综述
• 1.1.1 国内外发展概况
• 1.1.2 研究内容与方法
• 1.1.3 研究难点及方向
• 1.2 高效液相色谱分析方法的研究综述
• 1.2.1 HPLC 法的分类与原理
• 1.2.2 HPLC 法的建立过程
• 1.3 HPLC 法检测黄芩苷与连翘苷的研究进展
• 1.3.1 HPLC 法检测黄芩苷的研究进展
• 1.3.2 HPLC 法检测连翘苷的研究进展
• 1.3.3 HPLC 法同时检测黄芩苷和连翘苷的研究进展
• 1.4 本研究的立题依据与目的意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 药品与试剂
• 2.1.2 溶液的配制
• 2.1.3 试验动物
• 2.1.4 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 试验动物的选择
• 2.2.2 试验动物的给药与样品采集
• 2.2.3 样品的前处理
• 2.2.4 色谱条件
• 2.2.5 标准曲线与线性范围的测定
• 2.2.6 方法准确度和精密度的测定
• 2.2.7 最低检测限的测定
• 2.2.8 血浆及牛乳中两种成分的测定
• 2.2.9 数据处理
• 3 试验结果
• 3.1 HLPC 检测方法的线性范围
• 3.1.1 血浆样品
• 3.1.2 牛乳样品
• 3.2 HPLC 检测方法的回收率
• 3.2.1 血浆样品
• 3.2.2 牛乳样品
• 3.3 HPLC 检测方法的精密度
• 3.3.1 血浆样品
• 3.3.2 牛乳样品
• 3.4 HPLC 检测方法的最低检测限
• 3.5 牛乳中黄芩苷和连翘苷的动力学研究结果
• 3.6 血浆中黄芩苷和连翘苷的检测结果
• 4 讨论
• 4.1 动力学试验设计及样品处理方法
• 4.1.1 动力学试验设计
• 4.1.2 牛乳样品的处理方法
• 4.1.3 血浆样品的处理方法
• 4.2 中药复方中检测成分的选择
• 4.3 高效液相色谱法及其条件的选择
• 4.3.1 波长的选择
• 4.3.2 流动相的选择
• 4.4 HPLC 测定方法的评价
• 4.4.1 特异性
• 4.4.2 回收率
• 4.4.3 线性范围
• 4.4.4 精密度
• 4.5 黄芩苷和连翘苷在奶牛体内的药动学特征
• 4.5.1 血浆样品检测结果的分析
• 4.5.2 牛乳中代谢规律的探讨
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文