论文摘要
目的研究结缔组织生长因子反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞(HLECs)合成CTGF与а-SMA表达的影响。方法(1)测定CTGF反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞的转染率;(2)应用CTGF反义寡核苷酸直接转染第三代人晶状体上皮细胞进行细胞生长曲线的测定;(3)采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测细胞CTGF和α-SMA mRNA水平。(4)采用免疫细胞化学染色法检测细胞CTGF和α-SMA的表达水平。结果(1)直接导入法反义寡核苷酸进入较慢,但72h未出现细胞毒性。48h转染率可高达63%。(2)CTGF-ASON直接导入法培养细胞72h后可见对细胞增殖抑制作用(。3)直接导入法处理48h后,TGF-β1刺激能显著增加CTGF和α-SMA mRNA以及蛋白质的表达,但却可被直接转染法CTGF-ASON所抑制。而错义寡核苷酸却没有这种作用。结论CTGF反义寡核苷酸直接转染人晶状体上皮细胞能抑制TGF-β1诱导的CTGF与α-SMA表达上调,提示CTGF反义寡核苷酸抑制晶状体上皮细胞增殖可能为防治后发障提供新思路。
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