何越强:越南水稻黄矮病毒多克隆血清抗体的制备(英文)论文

何越强:越南水稻黄矮病毒多克隆血清抗体的制备(英文)论文

本文主要研究内容

作者何越强,陈氏懦花,陈阮河,杜新勇,阮德辉,韦善富,覃武,吕荣华(2019)在《越南水稻黄矮病毒多克隆血清抗体的制备(英文)》一文中研究指出:【目的】制备用于检测水稻黄矮病毒(RYSV)的多克隆抗体,为水稻和黑尾叶蝉上的病毒诊断提供技术支持。【方法】利用两种不同来源的RYSV抗原免疫家兔,一种是从受感染的水稻病叶组织纯化获得RYSV病毒粒子;另一种是从越南RYSV分离株克隆出完整N蛋白编码基因,然后将其连接至pET-28a载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中进行诱导表达获得N蛋白抗原。其中,N蛋白抗原又以两种形式(洗脱纯化N蛋白和N蛋白条带聚丙烯酰胺切片匀浆)对家兔进行免疫。最后,采用PTA-ELISA分析评估家兔抗体血清(多克隆抗体)对水稻叶片和黑尾叶蝉RYSV的特异性和敏感性。【结果】分离自越南RYSV分离株的N基因由1542个核苷酸组成,与来自我国和日本RYS分离株N基因序列进行比对,其核苷酸序列同源性分别为98.1%和97.9%,对应的推导氨基酸序列同源性为83.4%和99.4%。以RYSV病毒粒子、洗脱纯化N蛋白和N蛋白条带聚丙烯酰胺切片匀浆3种抗原免疫家兔获得的多克隆抗体均能有效检测出水稻植株中的RYSV,其中,感病植株的OD405分别为1.449、2.337和1.649,健康植株的OD405分别为0.375、0.294和0.283。PTA-ELISA检测结果表明,获得的多克隆抗体能从单个带病毒黑尾叶蝉中检测出RYSV,且该结论在RT-PCR检测中得到进一步验证。【结论】制备获得的多克隆抗体对RYSV具有较高特异性和敏感性,可用于水稻和黑尾叶蝉上的病毒诊断,同时表明以含有病毒植物蛋白的聚丙烯酰胺切片直接注射免疫模型动物制备多克隆抗体具有可行性。

Abstract

【mu de 】zhi bei yong yu jian ce shui dao huang ai bing du (RYSV)de duo ke long kang ti ,wei shui dao he hei wei xie chan shang de bing du zhen duan di gong ji shu zhi chi 。【fang fa 】li yong liang chong bu tong lai yuan de RYSVkang yuan mian yi jia tu ,yi chong shi cong shou gan ran de shui dao bing xie zu zhi chun hua huo de RYSVbing du li zi ;ling yi chong shi cong yue na RYSVfen li zhu ke long chu wan zheng Ndan bai bian ma ji yin ,ran hou jiang ji lian jie zhi pET-28azai ti shang ,zai da chang gan jun Rosetta(DE3)jun zhu zhong jin hang you dao biao da huo de Ndan bai kang yuan 。ji zhong ,Ndan bai kang yuan you yi liang chong xing shi (xi tuo chun hua Ndan bai he Ndan bai tiao dai ju bing xi xian an qie pian yun jiang )dui jia tu jin hang mian yi 。zui hou ,cai yong PTA-ELISAfen xi ping gu jia tu kang ti xie qing (duo ke long kang ti )dui shui dao xie pian he hei wei xie chan RYSVde te yi xing he min gan xing 。【jie guo 】fen li zi yue na RYSVfen li zhu de Nji yin you 1542ge he gan suan zu cheng ,yu lai zi wo guo he ri ben RYSfen li zhu Nji yin xu lie jin hang bi dui ,ji he gan suan xu lie tong yuan xing fen bie wei 98.1%he 97.9%,dui ying de tui dao an ji suan xu lie tong yuan xing wei 83.4%he 99.4%。yi RYSVbing du li zi 、xi tuo chun hua Ndan bai he Ndan bai tiao dai ju bing xi xian an qie pian yun jiang 3chong kang yuan mian yi jia tu huo de de duo ke long kang ti jun neng you xiao jian ce chu shui dao zhi zhu zhong de RYSV,ji zhong ,gan bing zhi zhu de OD405fen bie wei 1.449、2.337he 1.649,jian kang zhi zhu de OD405fen bie wei 0.375、0.294he 0.283。PTA-ELISAjian ce jie guo biao ming ,huo de de duo ke long kang ti neng cong chan ge dai bing du hei wei xie chan zhong jian ce chu RYSV,ju gai jie lun zai RT-PCRjian ce zhong de dao jin yi bu yan zheng 。【jie lun 】zhi bei huo de de duo ke long kang ti dui RYSVju you jiao gao te yi xing he min gan xing ,ke yong yu shui dao he hei wei xie chan shang de bing du zhen duan ,tong shi biao ming yi han you bing du zhi wu dan bai de ju bing xi xian an qie pian zhi jie zhu she mian yi mo xing dong wu zhi bei duo ke long kang ti ju you ke hang xing 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自南方农业学报的何越强,陈氏懦花,陈阮河,杜新勇,阮德辉,韦善富,覃武,吕荣华,发表于刊物南方农业学报2019年07期论文,是一篇关于水稻黄矮病毒论文,多克隆抗体论文,酶联免疫吸附测定论文,蛋白论文,表达论文,病毒纯化论文,南方农业学报2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自南方农业学报2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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