RNAi抑制HIF-1α的表达对MCF-7细胞MTX药物敏感性和裸鼠体内成瘤性的影响及对hADAS细胞体外向内皮细胞分化影响的初步研究

论文摘要

研究目的以MCF-7细胞为模型探讨缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor，HIF-1）在乳腺肿瘤生长中的作用；探讨以HIF-1α为分子靶点，治疗乳腺肿瘤的可能性。 研究方法1．应用商品化的shRNA表达载体pSilencer 2．1-U6 hygro，在MCF-7细胞中抑制HIF-1α的表达；2．应用Real time RT-PCR技术，研究缺氧（1％O2分压）条件下，抑制HIF-1α的表达对其靶基因如血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor，VEGF）、磷酸甘油酸激酶（phosphoglycerate kinase，PGK）、葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter-1，Glut-1）和P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-pg）表达的影响；3．应用流式细胞术研究抑制HIF-1α的表达对细胞周期分布的影响：4．应用MTT比色法研究抑制HIF-1α的表达对化疗药物甲氨喋呤（Methotrexate，MTX）敏感性的影响；5．将细胞接种于裸鼠皮下和乳腺脂肪垫处，通过动物模型来探讨抑制HIF-1α的表达对异种移植瘤生长的影响。 研究结果 与对照组相比，干扰HIF-1α的表达，明显下调缺氧条件下VEGF、PGK、Glut-1、P-gp等靶基因的表达，减弱缺氧对细胞周期的抑制，增加细胞对化疗药物MTX的敏感性。裸鼠皮下和同位移植瘤实验均表明，抑制HIF-1α的表达，能够明显抑制肿瘤的生长，其机制可能是通过抑制肿瘤的血管新生和糖代谢过程来发挥作用。 结论 1．HIF-1α是乳腺肿瘤治疗潜在的分子靶点，抗HIF-1策略与传统的化疗相结合可能会得到更好的效果；2．RNA干扰是一种研究基因功能，发现及确定肿瘤治疗分子靶的有力工具。

论文目录

• 第一部分
• 1、中文摘要
• 2、英文摘要
• 3、前言
• 4、第一章
• 5、第二章
• 6、第三章
• 7、讨论
• 8、参考文献
• 第二部分
• 1、中文摘要
• 2、英文摘要
• 3、前言
• 4、第一章
• 5、第二章
• 6、第三章
• 7、讨论
• 8、参考文献
• 综述
• 缩略语表
• 附录
• 致谢