论文摘要
阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是一种中老年人常见的中枢神经退行性疾病,主要表现为进行性痴呆、记忆和认知功能减退,其患病率随年龄增长而上升。随着世界人口日趋老龄化,AD已经成为继心血管疾病、肿瘤和脑卒中之后的第4位死亡原因,当前AD已成为老年医学的重要研究课题。在神经退行性疾病中,神经元的变性、坏死是其功能障碍的主要原因,因此采取有效措施来补充和取代已死亡的神经元,并恢复其功能,将是治疗神经退行性疾病的重要途径。已有研究表明,神经干细胞（Neural stem cells,NSCs）具有自我更新能力,能够分化成神经元和胶质细胞。利用NSCs植入受损的神经组织,替代和修复受损的神经元,以恢复大脑的正常功能,是未来治疗AD的一个重要方向。目前,利用NSCs治疗AD的研究尚处于初步阶段。已经证实NSCs不仅存在于发育中的神经系统,也持续存在于成年中枢神经系统多个脑区。近年来对于NSCs在神经系统疾病应用方面作了大量的研究,然而真正有效的策略是直接移植或作为基因治疗的载体细胞。但移植的NSCs成活率低,分化为神经元的比例非常低,因此治疗作用非常有限。目前需要解决体外培养NSCs保持其强大的增殖能力和诱导其定向分化的问题。已有研究表明,noggin基因在体内外均具有明显的诱导作用,能够促进NSCs的定向分化,为了提高移植NSCs的治疗效果,我们用noggin基因转染NSCs后移植入海马内,利用NSCs自身的修复和noggin基因定向诱导的双重作用,给予衰老小鼠的海马补充有一定功能的神经元,以达到更好的治疗效果。在本实验中,我们通过基因重组技术构建了表达noggin基因的重组腺病毒,通过病毒上清感染培养的NSCs,将表达noggin的NSCs移植入衰老模型小鼠的海马内,观察noggin修饰的NSCs是否对衰老小鼠具有一定的治疗作用,并与仅含GFP的对照病毒pAdEasy-1-GFP感染的NSCs移植的疗效进行比较,实验结果如下:1.成功构建表达noggin基因的重组腺病毒载体pAdEasy-1-noggin和对照病毒载体pAdEasy-1-GFP,并鉴定其在靶细胞中表达;2.分离、培养并鉴定新生昆明小鼠NSCs;
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