氯化锰对PC12细胞的毒性及其部分机理研究

论文摘要

目的以多巴胺能神经元PC12细胞作为靶细胞,观察其染氯化锰后的生长增殖及凋亡情况、原癌基因MDM2蛋白与促凋亡基因P53蛋白的表达情况,以及黄芪对其拮抗作用,探讨氯化锰致PC12细胞凋亡作用及其分子机理,为阐述氯化锰的神经毒性部分机制研究及防治工作提供理论依据。方法体外培养多巴胺能神经细胞PC12细胞,通过MTT比色试验观察染氯化锰后PC12细胞的增殖情况,确定毒作用剂量;运用流式细胞术（FCM）及原位缺口末端标记法（TUNEL）观察PC12细胞的凋亡情况及黄芪的拮抗作用;采用免疫细胞化学法检测PC12细胞P53、MDM2蛋白表达情况。结果氯化锰对PC12细胞的生长有明显的抑制作用,并呈时间-剂量效应关系;流式细胞术（FCM）及原位缺口末端标记法（TUNEL）检测结果一致显示氯化锰能诱导PC12细胞凋亡,并呈浓度依赖性,各染毒组与对照组比较差异有显著性（P<0.01）;而加入黄芪后,各组凋亡率明显降低,差异有显著性（P<0.05）;P53蛋白的表达随氯化锰浓度的增高而增高,呈浓度依赖性,与凋亡率呈正相关关系（R=0.9296,P<0.05）,MDM2蛋白的表达随氯化锰浓度的增高而降低,亦呈浓度依赖性,与凋亡率呈负相关关系（R=-0.8965,P<0.05）。结论（1）在一定条件下氯化锰能明显抑制PC12细胞生长与增殖;（2）氯化锰可以通过促进PC12细胞的P53蛋白的表达、抑制MDM2蛋白表达诱导其发生凋亡,并呈浓度依赖性;（3）黄芪对一定剂量范围内的氯化锰诱导PC12细胞凋亡有一定的拮抗作用;

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 PC12 细胞的培养及染毒
• 1.2 PC12 细胞凋亡率的检测
• 1.3 PC12 细胞P53 蛋白和MDM2 蛋白检测
• 1.4 统计分析：SAS 软件作两样本T-检验，直线相关性分析
• 2 结果
• 2 对PC12 细胞生长的抑制作用'>2.1 MNCL₂ 对PC12 细胞生长的抑制作用
• 2 对PC12 细胞凋亡的影响及黄芪的干预作用'>2.2 MNCL₂ 对PC12 细胞凋亡的影响及黄芪的干预作用
• 2.3 PC12 细胞P53 蛋白表达情况
• 2.4 PC12 细胞MDM2 蛋白表达情况
• 3 讨论
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 详细摘要