高静水压处理对葡糖醋杆菌的影响及发酵培养基优化

高静水压处理对葡糖醋杆菌的影响及发酵培养基优化

论文摘要

细菌纤维素(Bacterial cellulose, BC)是一类由微生物产生的细胞外纤维素,与植物纤维和动物纤维相比,它具有高持水性、高结晶度、超细超纯的网状结构等特性(Naoto K et al.2007; Wu R Q et al.2010),在食品工业、造纸工业、化学工业、医药工业等领域具有很高的利用价值和十分广泛的商业化应用前景(Vandamme E J et al.1998; Jonas R et al.1998)。但是,由于它的产量较低,生产成本较高,其应用受到了较大的限制。提高细菌纤维素产量,降低生产成本是细菌纤维素研究的重点。因此,本研究采用高压诱变技术,获得高产菌株,探讨高静水压处理对J2菌株性质的影响,为高压诱变提供理论依据;并对高产菌株进行培养基优化,为细菌纤维素的工业化生产奠定基础。主要研究结果如下:①利用高静水压对细菌纤维素生产菌J2进行处理,发现高静水压对菌株J2有明显的致死效应,而且菌株J2的致死率随着处理时间的延长而增加,随着处理压力的升高而升高。②高静水压处理后存活菌株的形态发生了一定程度的变化,长杆菌有所变短,这说明高静水压处理使菌株J2的体积变小。菌株J2经高静水压处理后,虽然在特征上没有发生很明显的变化,但是高静水压处理前后菌株对碳源和氮源的利用不同,高静水压处理后菌株产细菌纤维素的能力明显提高。经过筛选,得到了1株细菌纤维素产量较高的菌株J2After (简称J2A),其细菌纤维素产量是菌株J2Before(简称J2B)的1.485倍,并且其生长速率也明显变快。③高静水压处理后菌株J2A在发酵过程中的发酵参数也有发生了一定的变化,发酵过程中菌体的密度明显高于高静水压处理前的,高静水压处理后菌株J2A发酵过程中的酸度低于高静水压处理前的,且在发酵过程中高静水压处理后的菌株对碳源的氮源的利用率高于处理前的。④确定了发酵生产的优化培养条件,即:将震荡培养了20-22h的种子培养液以9%的接种量接入发酵培养基中,静置培养8d,细菌纤维素产量最高。⑤优化得到了高产的发酵培养基:碳源3%(葡萄糖:蔗糖=2:1),酵母膏0.5%,K2HPO40.08%, MgSO41.62%, FeSO40.36%, ZnSO40.03%,柠檬酸0.05%,无水乙醇0.7%,在该条件下发酵生产得到的细菌纤维素的是原基础发酵培养基的2.85倍。⑥利用高速匀浆器、超声波、微波、碱4种方法处理废酵母,发现废酵母:水=18:100时,细菌纤维素产量达到了最高值,其中,超声波破壁效果是最好的,废酵母发酵生产得到的细菌纤维素的产量较高,达到了26.081g/100mL培养基。⑦在超声波处理过的废酵母中添加无机盐MgSO4、ZnSO4、FeSO4、K2HPO4时,发现无机盐MgSO4细菌纤维素的生产有一定的抑制作用,而添加ZnSO4、FeSO4、K2HPO4时对细菌纤维素的生产有一定的促进作用,尤其是FeSO4对纤维素生产的促进作用较明显,并且在FeSO4浓度为0.1%时,细菌纤维素的产量道道了最高值34.084g。⑧利用废酵母发酵生产得到的细菌纤维素膜的基本性质指标没有发生多大的变化,都是高含水量,具有一定复水率的纤维素膜。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 纤维素的概况
  • 1.2 细菌纤维素的概况
  • 1.2.1 细菌纤维素的发现
  • 1.2.2 细菌纤维素产生菌
  • 1.2.3 细菌纤维素的生物合成
  • 1.2.4 细菌纤维素生物合成的相关酶类
  • 1.2.5 细菌纤维素生物合成的调节系统
  • 1.3 细菌纤维素的结构与性质
  • 1.3.1 细菌纤维素的结构
  • 1.3.2 细菌纤维素的性质
  • 1.4 细菌纤维素的应用
  • 1.4.1 在食品工业中的应用
  • 1.4.2 在生物医学方面的应用
  • 1.4.3 在造纸工业中的应用
  • 1.4.4 在声学器材方面的应用
  • 1.4.5 其他方面
  • 1.5 提高细菌纤维素产量的途径
  • 1.5.1 通过诱变手段
  • 1.5.2 碳源的优化
  • 1.5.3 添加无机盐
  • 1.5.4 添加有机酸
  • 1.5.5 添加咖啡因和生物素
  • 1.5.6 其它发酵培养条件的优化
  • 1.6 超高压诱变的研究进展
  • 1.7 响应面优化法
  • 1.7.1 Plackett-Burman设计
  • 1.7.2 Box-Behnken设计
  • 1.8 啤酒厂废弃物综合利用的现状
  • 第二章 高静水压处理前后菌株性质的比较
  • 2.1 前言
  • 2.2 材料与方法
  • 2.2.1 试验材料
  • 2.2.2 主要仪器设备
  • 2.2.3 培养基
  • 2.2.4 试验方法
  • 2.3 结果与分析
  • 2.3.1 高静水压处理对菌株致死率的影响
  • 2.3.2 高压处理前后菌株形态变化
  • 2.3.3 生理生化特征分析
  • 2.3.4 高压处理后菌株纤维素产量分布分析
  • 2.3.5 高压处理对菌体生长速度的效应
  • 2.3.6 高静水压对发酵过程中发酵参数的影响
  • 2.3.7 高静水压对纤维素膜性质的影响
  • 2.4 小结与讨论
  • 第三章 发酵培养基优化
  • 3.1 前言
  • 3.2 材料与方法
  • 3.2.1 试验材料
  • 3.2.2 主要仪器设备
  • 3.2.3 培养基
  • 3.2.4 试验方法
  • 3.3 结果与分析
  • 3.3.1 培养条件的优化
  • 3.3.2 单因素试验结果
  • 3.3.3 Plackett-Burman设计筛选细菌纤维素发酵培养基的主要因素
  • 3.3.4 主要因素与产量关系的二次方程建立及方差分析
  • 3.3.5 细菌纤维素发酵培养基响应面交互作用分析与优化
  • 3.3.6 模型的验证
  • 3.4 小结与讨论
  • 第四章 利用啤酒废酵母发酵生产细菌纤维素
  • 4.1 前言
  • 4.2 材料与方法
  • 4.2.1 材料
  • 4.3 试验方法
  • 4.3.1 高速匀浆器对啤酒酵母进行处理
  • 4.3.2 碱对啤酒酵母进行处理
  • 4.3.3 超声波啤酒酵母进行处理
  • 4.3.4 微波对啤酒废酵母进行处理
  • 4.3.5 未处理的废酵母
  • 4.3.6 添加不同无机盐
  • 4.4 细菌纤维素性质的测定
  • 4.4.1 含水量的测定
  • 4.4.2 复水率的测定
  • 4.4.3 纤维素含量的测定
  • 4.5 结果与分析
  • 4.5.1 不同处理方式的啤酒废酵母对细菌纤维素产量的影响
  • 4.5.2 添加不同无机盐对纤维素产量的影响
  • 4.5.3 细菌纤维素的性质测定
  • 4.6 小结与讨论
  • 第五章 结论与讨论
  • 5.1 结论
  • 5.1.1 高静水压对菌株性质的影响
  • 5.1.2 培养条件及发酵培养基优化
  • 5.2 讨论
  • 5.2.1 高静水压处理
  • 5.2.2 培养基改进探讨
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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