棉花类固醇5a-还原酶基因（GhDET2）的遗传转化及其功能分析

论文摘要

棉花是最重要的天然纤维作物,也是重要的纺织工业原料。我国是棉纺织品消费和出口大国,因此,棉花生产在我国国民经济中占有重要地位。过去几十年的传统育种改良了棉花的性状,但是,种间杂交亲和性问题使棉花可用的基因资源受到限制。而利用现代分子生物学技术,向棉花基因组中导入外源基因,培育抗病、抗虫以及高品质的转基因棉花新品种,为棉花的遗传改良工作提供了一条有效的途径。 油菜素内酯是继生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯五大类激素之后的第六大类植物激素。油菜素内酯具有多种生理功能,如促进细胞分裂和伸长、提高植物抗逆性、促进细胞的再分化等。在棉花上应用可以促进棉花植株茎的伸长,增加叶片面积,增加结铃数,提高铃重,增加皮棉产量。 类固醇5α-还原酶基因是油菜素内酯生物合成途径中的一个关键酶基因,它的突变将导致植株表现出去黄化、矮化和丧失光调节机能等。这说明类固醇5α-还原酶基因在油菜素内酯的生物合成以及植物的正常生长发育中具有重要作用。我们将来源于棉花纤维的GhDET2基因对棉花进行遗传转化,通过超量表达和反义抑制GhDET2基因,调节棉花植株内源油菜素内酯水平,以期改善棉花纤维品质。主要结果如下: 1.研究了影响棉花胚性愈伤遗传转化的若干因素 通过研究不同菌株、转化后脱菌方式和筛选方式对棉花胚性愈伤转化频率的影响,优化了棉花胚性愈伤遗传转化体系。研究结果表明:在3种农杆菌菌株中,EHA105和EHA101菌株的GUS阳性愈伤率均比LBA4404菌株的GUS阳性愈伤率高,但利用EHA105和EHA101两种农杆菌进行转化后获得的独立转化子比LBA4404的少,而且EHA105和EHA101两种农杆菌的生长速度较快,容易出现返菌现象。脱菌方式中液体脱菌24h后,

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 一 文献综述
• 1.1 棉花的遗传转化方法
• 1.2 棉花基因工程研究进展
• 1.3 油菜素内酯的生理活性及应用现状
• 1.4 类固醇5α-还原酶基因的研究进展
• 二 引言
• 三 材料与方法
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 四 结果与分析
• 4.1 影响棉花胚性愈伤转化效率的因素
• 4.2 目的基因的转化
• 4.3 转基因植株的组织化学鉴定和表型观察
• 4.4 棉花胚珠培养
• 五 讨论
• 5.1 外源基因瞬时表达频率与稳定的转化效率之间的关系
• 5.2 棉花体细胞变异对转基因研究的影响
• 5.3 BR在棉花纤维发育中的作用
• 5.4 GhDET2基因对棉花生长的影响
• 六 小结
• 参考文献
• 缩略词表
• 致谢