论文摘要
目的:探索神经干细胞原代培养的新方法及同种异体神经干细胞(NSCs)移植治疗缺血性脑梗死的可行性。方法:分别以DMEM/F12、2%B27、20ng/ml的bFGF、20ng/ml的EGF无血清培养液和血清培养液预先培养2-3天后,换为无血清培养液。应用免疫细胞化学法对其进行观察和比较。制作大鼠脑缺血再灌注模型,3天后移植BrdU标记的NSCs于梗死灶同侧侧脑室。结果:三、四组用含5%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养2-3天,NSCs的聚球速度较一、二组明显加快,可提前3~4天观察到神经干细胞球,细胞染色证实细胞系巢蛋白阳性,经血清培养液诱导分化后部分呈NSE阳性,部分呈GFAP阳性,NSCs移植后可在体内存活并被抗BrdU抗体检测到。结论:含血清培养液预先培养可以加快细胞培养速度,为获得神经干细胞的经济有效的方法。NSCs移植后可在体内存活并穿透室管膜迁移至脑缺血病灶周边区。
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