Wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用及重症急性胰腺炎大鼠血清蛋白谱的变化

论文摘要

重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）占急性胰腺炎病例的10%～25%,病死率高达20%～30%。死亡病例中60%死于发病的第一周,死亡的主要原因是肺部并发症,如急性呼吸窘迫综合征。关于SAP的发病机制,目前比较公认的学术观点有“胰酶自身消化学说”、“钙超载学说”、“胰腺微循环障碍学说”、“炎症及细胞因子损伤学说”、“细菌及内毒素移位”等,近年来PI3K信号通路与胰腺疾病的关系受到越来越多的重视,胰腺炎时PI3K信号通路被激活,其产物可引起下游因子的进一步激活,活化并募集中性粒细胞产生多种炎症因子,引起级联放大效应,形成所谓的“炎症因子风暴”对全身多器官造成损害,并可通过抑制钙泵而增加细胞内钙离子浓度等途径激活胰蛋白酶原,促进胰腺炎的发生发展。本试验拟用PI3K信号通路抑制剂wortmannin干预SAP大鼠,观察其对SAP大鼠的保护作用;同时在实验中采取SAP大鼠的血清,采用双向电泳的方法观察其血清蛋白谱的变化,为进一步研究SAP时血清中炎症因子的变化及其之间的联系建立平台。目的:观察磷脂酰肌醇—3激酶（PI3K）抑制剂wortmannin对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠的保护作用并探讨其机制;利用双向电泳技术观察SAP大鼠血清蛋白谱的变化。方法:健康成年SD大鼠54只,随机分为对照组、SAP组、SAP+wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型。检测建模后大鼠血清TNF-α水平、血清淀粉酶水平、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量、胰腺组织髓过氧化物酶（MPO）水平;观察肺组织及胰腺组织的病理变化;对比建模前后血清蛋白谱的变化。结果:SAP组较对照组血清TNF-α水平、血清淀粉酶水平、BALF蛋白含量及胰腺组织MPO水平均显著升高（P＜0.01）,SAP组胰腺、肺组织病理损伤随病情进展而逐渐加重;SAP+wortmannin组较对照组各项指标均升高,但较SAP组均明显降低（P＜0.01）,胰腺、肺组织病理损伤较SAP组减轻;建模前后血清双向电泳图显示有多个蛋白差异点。结论:wortmannin对SAP大鼠有一定的保护作用,其机制可能包括抑制了胰腺腺泡细胞内PI3K的活性,从而一定程度上减轻了钙超载及早期胰蛋白酶原的激活;抑制了中性粒细胞（PMN）内PI3K信号转导通路的活化,使多种炎症细胞的活化和TNF-α等炎症因子的释放受到抑制。血清蛋白谱显示多个差异点,提示多种细胞因子参与重症急性胰腺炎的发生发展,其具体机制有待进一步研究。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 文献回顾一 胰腺炎病因及发病机制
• 文献回顾二 磷脂酰肌醇3激酶的生物学效应及其与胰腺炎的关系
• 文献回顾三 双向电泳及质谱分析在蛋白组学研究中的应用
• 正文
• 实验 WORTMANNIN对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用及重症急性胰腺炎大鼠血清蛋白谱的变化
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢