论文摘要
研究目的水孔蛋白（Aquaporins,AQPs）是一组对水高度选择性的细胞膜转运蛋白,在维持机体水平衡中起重要作用。迄今已发现14个同源异构体,水孔蛋白-1（Aquaporin-1,AQP1）是最早被发现的该家族成员。研究证实腹透时渗透梯度作用下水的转运主要通过AQP1进行,AQP1被认为是腹膜跨细胞的水转运通道。本实验通过观察AQP1在人腹膜组织的表达,研究其与腹透超滤量及尿量的关系,进一步证实AQP1在腹膜透析的选择及转归中的临床意义。方法1.于尿毒症患者行首次腹膜透析置管术时及维持性腹膜透析患者拔管或再次置管时取腹膜活检标本,另取非尿毒症腹部手术患者的腹膜标本作为正常对照,排除任何可能累及腹膜的疾病。2.采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（Streptavidin-Perosidase,SP）及半定量评分系统检测尿毒症患者及非尿毒症患者腹膜AQP1蛋白的表达。3.采用逆转录聚合酶链反应（Reversed Transcript Polymerase ChainReaction,RT-PCR）方法分析尿毒症患者及非尿毒症患者腹膜AQP1mRNA的表达。4.收集患者临床资料,追踪调查尿毒症患者腹膜透析后的超滤量、尿量情况。5.分析比较非尿毒症者与尿毒症患者AQP1的表达,分析AQP1与透析患者的营养状况、炎症反应、内生肌酐清除率、腹透超滤量及尿量的关系。结果1.免疫组化结果显示:毛细血管和小静脉内皮细胞染色阳性,而小动脉内皮细胞无染色,间皮细胞染色也呈阳性。在所有活检标本中内皮细胞AQP1表达较间皮细胞明显增多,两者比较有显著差异（t=7.491,p=0.000）。2.正常对照组与尿毒症组AQP1的表达正常对照组与尿毒症患者组AQP1的表达差别无统计学意义。3.残余肾功能对AQP1表达的影响以尿毒症患者腹膜透析置管术前最后一次化验血肌酐水平计算肌酐清除率（Creatinine clearance rate,Ccr）,Ccr＞10 ml/min者与Ccr≤10 ml/min者AQP1表达差别无统计学意义。4.营养状况对AQP1表达的影响以尿毒症患者腹膜透析置术前最后一次化验血白蛋白水平作为评价营养状况的指标,AQP1的表达与血白蛋白水平无明显相关,每袋超滤量和每日超滤量与血白蛋白水平无明显相关。5.炎症反应对AQP1表达的影响以尿毒症患者血C反应蛋白（CRP）水平作为评价指标,AQP1的表达与血CRP水平无明显相关,每袋超滤量和每日超滤量与血CRP水平无明显相关。6.AQP1的表达和腹膜转运的相关性所有患者每3月进行一次随访,选取患者腹膜透析植管术后3个月第一次随访时的超滤量及尿量进行分析。分析AQP1表达量与每袋超滤量之间的关系（均选取使用1.5%腹透液保留时间4小时透析的患者计算每袋超滤量）,AQP1表达量与每袋超滤量之间无明显相关。AQP1表达量与每日超滤量之间无明显相关。AQP1表达量与每日尿量之间无明显相关。结论1.长期腹膜透析对AQP1的表达量无明显影响,患者出现超滤功能下降可能与AQP1结构和功能发生变化有关。2.AQP1表达量尚不能作为评价腹膜转运的理想指标。3.长期腹透的患者易出现营养不良,患者的超滤状况与血白蛋白量无明显相关,白蛋白的结构和功能是否发生变化有待进一步研究。