体外内层血视网膜屏障模型中紧密连接与细胞旁通透性变化研究

论文摘要

研究背景 血视网膜屏障（blood retinal barrier，BRB）是血眼屏障的重要结构之一，包括内层和外层视网膜屏障两部分组成，其中内层血视网膜屏障（inner BRB，iBRB）主要由视网膜微血管内皮细胞（retinal microvascular endothelial cell，RMEC）及细胞间紧密连接（tight junction，TJ）形成。正常iBRB依赖于血管的稳态，是正常视觉功能的基础之一。iBRB的破坏可以导致多种眼病，如糖尿病性黄斑水肿，该病主要表现为视网膜微血管通透性升高，血液中物质渗漏并聚集在黄斑部视网膜内，导致视功能的损害。 正常iBRB保护视网膜组织免受外界因子的影响，但同时也封闭了药物治疗血运途径，例如青光眼的神经保护治疗。青光眼是由眼压造成的视网膜神经节细胞的损害，是常见的不可逆性致盲性眼病之一。而在青光眼治疗方面，目前青光眼治疗方法仍局限在手术和药物降低眼压，虽然在上世纪50年代起发现多种神经生长因子对神经细胞轴突再生方面有促进作用，但是，迄今为止尚无确切的神经保护治疗方法运用于临床，其主要原因是iBRB对药物通透性的限制。要解决该问题的方法包括对药物分子结构的改造和对iBRB的通透性调节。很多人已经在第一种方法上做了大量的工作，仍未取得突破性进展，所以有人开始将目光投向对于微血管通透性调节的研究。通过建立iBRB模型可以初步研究通透性变化在视网膜血管性疾病方面的意义，还可以检测某些因素对iBRB通透性的影响。 iBRB的功能状态依赖于TJ的程度，后者取决于多种TJ蛋白的组建和相互关系。ZO-1是最早发现的TJ蛋白，对于TJ的形成有重要作用，在多种器官血液屏

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 文献回顾
• 1 内层血视网膜屏障的概念
• 2 内层血视网膜屏障的研究方法
• 3 视网膜胶质细胞对内层血视网膜屏障的作用
• 4 内皮细胞间连接在内层血视网膜屏障中的作用
• 5 细胞旁通透性的研究方法
• 实验研究
• 第一部分 大鼠视网膜微血管内皮细胞的培养
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 视网膜Müller胶质细胞培养及其对视网膜微血管内皮细胞迁移和增生的影响
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三部分 体外血视网膜内屏障的建立及视网膜Müller胶质细胞对紧密连接蛋白的影响
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第四部分 跨内皮电阻变化与物质通透系数的关系
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结和创新点
• 参考文献
• 致谢
• 博士学习期间主要成果