本文主要研究内容
作者李景凤(2019)在《BmNPV芽生病毒囊膜蛋白组成分析》一文中研究指出:家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是一种严重危害养蚕业的病毒病原体,其基因组与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)基因组相似性很高,但是只能感染家蚕。目前的研究针对AcMNPV入侵和出芽释放方面已经取得较大进展,但是BmNPV BV粒子进入宿主以及其出芽方式的机制的研究较少。研究表明,病毒入侵宿主细胞和出芽释放过程是相对可逆的过程,囊膜病毒的入侵与病毒表面的囊膜蛋白紧密相关,GP64是组I杆状病毒的膜融合蛋白,定位于细胞膜上,病毒粒子在细胞膜处出芽获得囊膜结构以及分布于其上的病毒编码的GP64等蛋白,GP64在病毒入侵过程中介导芽生病毒进入细胞初始感染。我们前期发现GP64定位在细胞膜上或细胞质内部都能产生有感染性的BV,其机理尚不清楚。本文主要对两种不同GP64蛋白BV囊膜组分进行研究,探索BV形成机制,为杆状病毒出芽机制提供基础,主要研究结果如下:首先主要对本实验室前期构建与获得的vGP64与vSPⅡGP64 BV囊膜蛋白进行分离与质谱鉴定。其中两种病毒中共同检测到病毒蛋白30种,其中具有显著性差异的有6种,共同检测到的宿主蛋白有75种;在vGP64病毒中单独检测到4种病毒特异性蛋白,11种宿主特异性蛋白;在vSPⅡGP64病毒中单独检测到1种病毒特异性蛋白,5种宿主特异性蛋白质,然后对对质谱鉴定的差异病毒蛋白进行western-blot验证分析。其次,构建eGFP不同定位的细胞系,通过两种病毒感染形成的BV囊膜中eGFP的分布初步推测BV囊膜来源于内膜系统。两种病毒BV基因组绝对定量分析。研究发现,相同质量的DNA产生的病毒滴度不同,突变体滴度低,说明部分BV可能没有感染性。最后,通过两种病毒感染的细胞的电镜切片分析,初步确定BmNPV感染BmN细胞后存在两种出芽方式。通过上述研究,我们初步揭示了两种病毒囊膜蛋白组成的差异,并且初步验证了两种病毒出芽方式存在差异,为进一步研究BmNPV出芽方式提供参考。
Abstract
jia can he xing duo jiao ti bing du (Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)shi yi chong yan chong wei hai yang can ye de bing du bing yuan ti ,ji ji yin zu yu mu xu yin wen ye e he xing duo jiao ti bing du (Autographa californica nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)ji yin zu xiang shi xing hen gao ,dan shi zhi neng gan ran jia can 。mu qian de yan jiu zhen dui AcMNPVru qin he chu ya shi fang fang mian yi jing qu de jiao da jin zhan ,dan shi BmNPV BVli zi jin ru su zhu yi ji ji chu ya fang shi de ji zhi de yan jiu jiao shao 。yan jiu biao ming ,bing du ru qin su zhu xi bao he chu ya shi fang guo cheng shi xiang dui ke ni de guo cheng ,nang mo bing du de ru qin yu bing du biao mian de nang mo dan bai jin mi xiang guan ,GP64shi zu Igan zhuang bing du de mo rong ge dan bai ,ding wei yu xi bao mo shang ,bing du li zi zai xi bao mo chu chu ya huo de nang mo jie gou yi ji fen bu yu ji shang de bing du bian ma de GP64deng dan bai ,GP64zai bing du ru qin guo cheng zhong jie dao ya sheng bing du jin ru xi bao chu shi gan ran 。wo men qian ji fa xian GP64ding wei zai xi bao mo shang huo xi bao zhi nei bu dou neng chan sheng you gan ran xing de BV,ji ji li shang bu qing chu 。ben wen zhu yao dui liang chong bu tong GP64dan bai BVnang mo zu fen jin hang yan jiu ,tan suo BVxing cheng ji zhi ,wei gan zhuang bing du chu ya ji zhi di gong ji chu ,zhu yao yan jiu jie guo ru xia :shou xian zhu yao dui ben shi yan shi qian ji gou jian yu huo de de vGP64yu vSPⅡGP64 BVnang mo dan bai jin hang fen li yu zhi pu jian ding 。ji zhong liang chong bing du zhong gong tong jian ce dao bing du dan bai 30chong ,ji zhong ju you xian zhe xing cha yi de you 6chong ,gong tong jian ce dao de su zhu dan bai you 75chong ;zai vGP64bing du zhong chan du jian ce dao 4chong bing du te yi xing dan bai ,11chong su zhu te yi xing dan bai ;zai vSPⅡGP64bing du zhong chan du jian ce dao 1chong bing du te yi xing dan bai ,5chong su zhu te yi xing dan bai zhi ,ran hou dui dui zhi pu jian ding de cha yi bing du dan bai jin hang western-blotyan zheng fen xi 。ji ci ,gou jian eGFPbu tong ding wei de xi bao ji ,tong guo liang chong bing du gan ran xing cheng de BVnang mo zhong eGFPde fen bu chu bu tui ce BVnang mo lai yuan yu nei mo ji tong 。liang chong bing du BVji yin zu jue dui ding liang fen xi 。yan jiu fa xian ,xiang tong zhi liang de DNAchan sheng de bing du di du bu tong ,tu bian ti di du di ,shui ming bu fen BVke neng mei you gan ran xing 。zui hou ,tong guo liang chong bing du gan ran de xi bao de dian jing qie pian fen xi ,chu bu que ding BmNPVgan ran BmNxi bao hou cun zai liang chong chu ya fang shi 。tong guo shang shu yan jiu ,wo men chu bu jie shi le liang chong bing du nang mo dan bai zu cheng de cha yi ,bing ju chu bu yan zheng le liang chong bing du chu ya fang shi cun zai cha yi ,wei jin yi bu yan jiu BmNPVchu ya fang shi di gong can kao 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自江苏科技大学的李景凤,发表于刊物江苏科技大学2019-07-10论文,是一篇关于杆状病毒论文,出芽论文,囊膜蛋白论文,江苏科技大学2019-07-10论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自江苏科技大学2019-07-10论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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