论文摘要
背景和目的活化B细胞进入生发中心（germinal center, GC）的明区接受抗原特异性滤泡辅助T细胞（follicular T helper cell Tfh）和滤泡树突细胞（follicular dendritic cell, fDC）的筛选,是自身反应性B细胞清除的重要机制之一。而在生发中心,B细胞从暗区迁移到明区需要下调CXCR4。IL21是生发中心Tfh分泌的重要的B细胞活化调节因子,IL-21参与小鼠脾B细胞CXCR4的表达调控,且对没有接受特异性BCR信号及T细胞辅助的B细胞,IL-21抑制其增殖和/或启动凋亡,可能是清除自身反应性B细胞的重要机制。为了明确IL-21是否参与人B细胞上CXCR4和CXCR5的表达调控以及系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）患者B细胞CXCR4及CXCR5表达异常是否与IL21相关,导致从GC的暗区迁移进入明区以及自身反应性B细胞清除异常,我们对IL21,CD40L以及anti-IgM不同刺激条件SLE外周血B细胞表面CXCR4/5的变化进行分析,并与健康对照（HC）进行比较。为了研究SLE的B细胞是否存在Akt过度活化、以及IL21调控Akt信号通路异常,而导致IL21对CXCR4调控障碍,及对分化、存活调控作用异常,我们分析了IL21对SLE外周血B细胞pAkt、pStat3的作用、及对B细胞分化、存活的影响,并与HC比较,并应用P13K阻断剂LY294002阻断病人B细胞异常活化的Akt,观察在SLE中IL21对B细胞的异常调控是否通过Akt过度磷酸化进行。为了进一步研究IL21对SLE的B细胞凋亡异常调控的可能机制,我们在刺激后对两种受Akt通路调控的抗凋亡蛋白mcl1、flip的表达进行了检测。方法SLE和HC外周血B细胞在control、IL21、anti-IgM+CD40L、anti-IgM+CD40L+IL21四个条件下培养,3天后用流式细胞术测定CXCR4、CXCR5表达；20分钟后测定胞内pAkt、pStat3;6天后测定不同B细胞亚群的比例变化；2天后检测凋亡率的差别。SLE的B细胞用LY294002阻断后再刺激6天,检测B细胞亚群的比例变化。结果1.anti-IgM+CD40L或IL21刺激明显下调HC的B细胞表面CXCR4（p<0.0001及p=0.0096）,但在SLE患者中不能明显下调（p=0.2575及p=0.2361）2.IL21单用或联合anti-IgM+CD40L均可使HC及SLE外周血B细胞表面CXCR5及pStat3明显上调（CXCR5:IL21单用,HC p=0.0263, SLE p=0.0605; anti-IgM+CD40L+IL21, HC p=0.0264, SLE p=0.0214。pStat3:IL21单用,HC p=0.0153, SLE p=0.0634; anti-IgM+CD40L+IL21, HC p=0.0142, SLE p=0.0375）。LY294002阻断后IL21仍可上调CXCR5;而AG490阻断后IL21不能上调CXCR5。3.单独IL21刺激20min可上调SLE外周血B细胞pAkt,对HC无明显作用；anti-IgM+CD40L刺激可明显上调HC外周血B细胞pAkt,加IL21可明显抑制pAkt。而SLE pAkt上调幅度小,加IL21对pAkt无抑制作用。4. anti-IgM+CD40L刺激3天后,HC与SLE外周血B细胞（?）mcl1、flip表达显著增高,SLE显著高于HC （mcll:,增加倍数HC1.97±1.91, SLE4.71±2.63, p=0.0060）。anti-IgM+CD40L联合IL21,刺激3d胞内mcl-1平均荧光强度,HC增加（p=0.0242）。SLE无统计学差异。5.IL21刺激外周血B细胞6天,IgD+CD38hi细胞群、CD27+CD38hi浆细胞、CD38+CD138+PC在HC中比例无明显变化或减少,但在SLE中比例增加。SLE外周血B细胞预先予LY294002处理,则IL21不能上调上述三群细胞比例。6.IL21刺激2d,促进HC B细胞凋亡,抑制SLE B细胞凋亡。结论SLE的B细胞Akt过度活化,IL21对Akt通路调控异常,可能造成IL21或活化刺激不能有效下调SLE患者B细胞表面的CXCR4;单独IL21刺激可促进SLE的外周血B细胞向浆细胞分化,抑制凋亡。用LY294002抑制SLEB细胞的Akt过度活化后,IL21对分化、凋亡的异常调控可消除。SLE的B细胞CXCR4下调障碍可能导致其从暗区进入明区障碍,逃离选择进入外周；单独IL21刺激对分化、凋亡的异常作用可能导致其不接受T细胞辅助即可分化为浆细胞、逃离凋亡。总之,IL21对SLE的B细胞调控异常可能提示SLE自身反应性B细胞的产生机制。
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相关论文文献
- [1].IL21:癌症联合治疗策略[J]. 国际药学研究杂志 2008(05)
- [2].IL21基因多态性与云南汉族人群非小细胞肺癌的相关性[J]. 贵州医科大学学报 2018(10)
- [3].IL21纳米微球抗原诱导小鼠巨噬细胞免疫应答效果的研究[J]. 山东医学高等专科学校学报 2019(06)
- [4].IL-21 DNA微球疫苗的制备及其对CTL细胞抗肿瘤作用的影响[J]. 山东医学高等专科学校学报 2016(03)
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