本文主要研究内容
作者孙雨,李玉英,王司军,于乾龙,岳琦,李朝飞（2019）在《缺失宿主Vta1蛋白的MIT结构域对杆状病毒AcMNPV复制的影响》一文中研究指出：【目的】克隆草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Vta1基因,检测Vta1在苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)复制中的作用。【方法】利用反转录-PCR与PCR方法筛选草地贪夜蛾Vta1基因及缺失Vta1N-端MIT结构域的突变体并构建其瞬时表达质粒,通过转染Sf9细胞检测表达;构建Vta1及其突变体的双分子荧光互补表达质粒,并通过瞬时转染检测其与Vps4及ESCRT-III亚基Vps46与Vps60的相互作用;共转染gp64与Vta1及其突变体瞬时表达质粒,检测瞬时表达Vta1突变体对AcMNPV出芽型病毒产量及病毒基因启动子指导报告基因表达的影响。【结果】获得了草地贪夜蛾Vta1基因。氨基酸序列相似性分析表明,昆虫、酵母与人类Vta1同源蛋白的相似性分别约为20%与50%。Western blotting分析表明GFP标签的Vta1及其突变体均能在瞬时转染的Sf9细胞中表达。双分子荧光互补分析发现,缺失第1个或第2个MIT结构域显著降低Vta1突变体与Vps4、Vps46或Vps60的相互作用。此外,瞬时表达Vta1突变体显著降低了AcMNPV感染性出芽型病毒的产量,但并未影响AcMNPVie1基因早期启动子和p6.9基因晚期启动子指导的LacZ和GUS报告基因的表达。【结论】Vta1可能参与杆状病毒AcMNPV子代病毒粒子的组装和/或出芽释放过程。
Abstract
【mu de 】ke long cao de tan ye e (Spodoptera frugiperda)Vta1ji yin ,jian ce Vta1zai mu xu yin wen ye e he duo jiao ti bing du (Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)fu zhi zhong de zuo yong 。【fang fa 】li yong fan zhuai lu -PCRyu PCRfang fa shai shua cao de tan ye e Vta1ji yin ji que shi Vta1N-duan MITjie gou yu de tu bian ti bing gou jian ji shun shi biao da zhi li ,tong guo zhuai ran Sf9xi bao jian ce biao da ;gou jian Vta1ji ji tu bian ti de shuang fen zi ying guang hu bu biao da zhi li ,bing tong guo shun shi zhuai ran jian ce ji yu Vps4ji ESCRT-IIIya ji Vps46yu Vps60de xiang hu zuo yong ;gong zhuai ran gp64yu Vta1ji ji tu bian ti shun shi biao da zhi li ,jian ce shun shi biao da Vta1tu bian ti dui AcMNPVchu ya xing bing du chan liang ji bing du ji yin qi dong zi zhi dao bao gao ji yin biao da de ying xiang 。【jie guo 】huo de le cao de tan ye e Vta1ji yin 。an ji suan xu lie xiang shi xing fen xi biao ming ,kun chong 、jiao mu yu ren lei Vta1tong yuan dan bai de xiang shi xing fen bie yao wei 20%yu 50%。Western blottingfen xi biao ming GFPbiao qian de Vta1ji ji tu bian ti jun neng zai shun shi zhuai ran de Sf9xi bao zhong biao da 。shuang fen zi ying guang hu bu fen xi fa xian ,que shi di 1ge huo di 2ge MITjie gou yu xian zhe jiang di Vta1tu bian ti yu Vps4、Vps46huo Vps60de xiang hu zuo yong 。ci wai ,shun shi biao da Vta1tu bian ti xian zhe jiang di le AcMNPVgan ran xing chu ya xing bing du de chan liang ,dan bing wei ying xiang AcMNPVie1ji yin zao ji qi dong zi he p6.9ji yin wan ji qi dong zi zhi dao de LacZhe GUSbao gao ji yin de biao da 。【jie lun 】Vta1ke neng can yu gan zhuang bing du AcMNPVzi dai bing du li zi de zu zhuang he /huo chu ya shi fang guo cheng 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自微生物学报的孙雨,李玉英,王司军,于乾龙,岳琦,李朝飞，发表于刊物微生物学报2019年02期论文，是一篇关于草地贪夜蛾论文,内吞分选转运复合体论文,苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒论文,微生物学报2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自微生物学报2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。