C-kit受体在普通型骨肉瘤中的表达及其临床意义

论文摘要

目的：C-kit受体又称CD117蛋白，是由c-kit原癌基因编码的具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受体。C-kit受体活化，可激活酪氨酸激酶信号传导通路，促进细胞生长、增殖和分化。C-kit受体表达异常可刺激肿瘤细胞的持续增殖和抗凋亡信号的失控，有利于肿瘤的恶性增殖。C-kit蛋白在许多肿瘤中表达，它的异常激活已被证实与多种肿瘤（尤其是胃肠道间质瘤）的发生有关，是目前的研究热点，但在骨肉瘤中的研究在国内尚未见报道。针对c-kit高表达的肿瘤，临床上应用酪氨酸激酶抑制剂（甲磺酸伊马替尼）治疗已取得了一定疗效，这提示我们进一步通过对c-kit受体的检测来探讨酪氨酸激酶抑制剂在骨肉瘤治疗方面的应用前景。因此，本研究旨在探讨骨肉瘤中C-KIT蛋白的表达与其肿瘤生物学行为及预后的关系，并进一步检测骨肉瘤中c-kit基因外显子11和外显子17的突变状态，为临床判断预后及靶向治疗骨肉瘤提供参考依据。方法：1)采用免疫组织化学方法检测c-kit蛋白在40例有随访结果的石蜡包埋普通型骨肉瘤和10例骨纤维结构不良组织中的表达，并进行临床病理分析。2)提取石蜡标本DNA，应用特异性引物分别扩增第11，17外显子序列，琼脂糖凝胶电泳检测。3)单链构象多态性分析c-kit基因第11、17外显子在普通型骨肉瘤组织中的突变情况，发现异常泳动条带进行DNA序列分析。结果：1) c-kit受体在普通型骨肉瘤中表达阳性率为62.5％（25／40）；c-kit受体高表达者更易局部复发；c-kit受体高表达组的术后生存时间显著低于c-kit受体低表达组。2)琼脂糖凝胶电泳检测证实在普通型骨肉瘤组织标本中扩增出完整的与预期片段一致的第11、17外显子序列。3)未在38例普通型骨肉瘤标本中检测到SSCP银染异常条带。经测序分析未发现基因突变。结论：C-kit受体在普通性型骨肉瘤中的表达与骨肉瘤的生物学行为有关，对评价患者的预后有一定参考价值。C-kit外显子的突变在骨肉瘤中是低概率事件，c-kit外显子11和17的突变可能不是c-kit受体蛋白过表达的唯一原因，可能还存在除外显子突变外的其它分子机制。部分骨肉瘤中存在c-kit受体的过表达，并且它的表达与预后密切相关，这提示我们在骨肉瘤的治疗中有应用酪氨酸激酶抑制剂的可能性，但酪氨酸激酶抑制剂的应用是否有效将依赖于骨肉瘤中c-kit受体过表达机制和体外试验的进一步研究。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 第一部分 c-kit受体蛋白的表达及其与肿瘤生物学行为、预后的关系
• 引言
• 材料与方法
• 结果与分析
• 讨论
• 第二部分 c-kit基因突变状态的检测及靶向治疗应用前景的探讨
• 引言
• 材料与方法
• 结果与分析
• 讨论
• 结论
• 附图、附表
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录
• 学位论文评阅及答辩情况表