本文主要研究内容
作者陈祎,张伟,赵丹,郭巍（2019）在《甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA2a的外源表达及酶活力测定》一文中研究指出：【目的】为了研究甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA2a的酶学性质,探索其对甜菜夜蛾幼虫发育过程的影响,为甜菜夜蛾的生物防治提供新靶标。【方法】以pMD19-T-Secda2a重组质粒为模板,PCR扩增得到Secda2a基因。构建原核表达载体pET-28a-Secda2a,IPTG诱导蛋白表达。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建重组转座载体pFastBac HT A-Secda2a,脂质体转染昆虫细胞Sf9,Western blot对SeCDA2a重组蛋白进行分析,以对硝基苯胺为底物利用分光光度计测定其酶活力。【结果】Secda2a在大肠杆菌和Sf9中均成功表达61kDa的重组蛋白,与预测分子量大小相符。IPTG终浓度为0.50mmol/L、37℃诱导培养4h时蛋白表达量最高。昆虫细胞Sf9表达的重组蛋白SeCDA2a的酶活力是1.57U/mL。【结论】本研究实现甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因Secda2a的外源表达,测定重组蛋白SeCDA2a的酶活力。
Abstract
【mu de 】wei le yan jiu tian cai ye e ji ding zhi tuo yi xian mei SeCDA2ade mei xue xing zhi ,tan suo ji dui tian cai ye e you chong fa yo guo cheng de ying xiang ,wei tian cai ye e de sheng wu fang zhi di gong xin ba biao 。【fang fa 】yi pMD19-T-Secda2achong zu zhi li wei mo ban ,PCRkuo zeng de dao Secda2aji yin 。gou jian yuan he biao da zai ti pET-28a-Secda2a,IPTGyou dao dan bai biao da 。li yong Bac-to-Bacgan zhuang bing du biao da ji tong ,gou jian chong zu zhuai zuo zai ti pFastBac HT A-Secda2a,zhi zhi ti zhuai ran kun chong xi bao Sf9,Western blotdui SeCDA2achong zu dan bai jin hang fen xi ,yi dui xiao ji ben an wei de wu li yong fen guang guang du ji ce ding ji mei huo li 。【jie guo 】Secda2azai da chang gan jun he Sf9zhong jun cheng gong biao da 61kDade chong zu dan bai ,yu yu ce fen zi liang da xiao xiang fu 。IPTGzhong nong du wei 0.50mmol/L、37℃you dao pei yang 4hshi dan bai biao da liang zui gao 。kun chong xi bao Sf9biao da de chong zu dan bai SeCDA2ade mei huo li shi 1.57U/mL。【jie lun 】ben yan jiu shi xian tian cai ye e ji ding zhi tuo yi xian mei ji yin Secda2ade wai yuan biao da ,ce ding chong zu dan bai SeCDA2ade mei huo li 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自北京农学院学报的陈祎,张伟,赵丹,郭巍，发表于刊物北京农学院学报2019年01期论文，是一篇关于甜菜夜蛾论文,几丁质脱乙酰酶论文,外源表达论文,酶活测定论文,北京农学院学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自北京农学院学报2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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