论文摘要
适配体是经过SELEX技术筛选合成出来的单链DNA或者RNA短链。山于适配体具有制备方便、稳定性好、亲和力强,且能高效、特异性的结合各种生物目标分子,使其越来越受研究工作者的关注。近年来,DNA适配体已经成为临床、药物、食品、卫生及环境检测等领域的研究热点。量子点具有独特的小尺寸效应和荧光特性以及良好的生物兼容性,已被广泛的应用到各个领域。电致化学发光分析法(ECL)因不需要光源、背景干扰小、较高的灵敏度、较宽的线性范围以及良好的重现性和选择性,使其逐渐成为分析检测中的重要手段。这些技术的有效结合使得高灵敏度、高选择性,甚至在线、实时、活体检测等成为可能。本论文在上述基础上开展了以下研究工作:设计了一种新型、灵敏、简单、仅用一条适配体构建的ATP三明治夹心型电致化学发光生物传感器。首先在ITO电极上原位还原低表面密度的纳米金,然后再组装上适配体的一段断链。利用适配体两条断链天然构型之间的吸引来完成对目标分子的识别。体系的ECL信号随着ATP的浓度增加而增大。依此建立的方法的线性范围为0.2~100 nmol/L。检出限为0.02 nmol/L。方法具有高选择性和高灵敏度,适用于其它生物小分子。基于量子点芯片电致化学发光,构建了一种新型的DNA适配体生物传感器用于检测凝血酶。首先刻蚀芯片电极,然后在ITO电极上原位合成纳米金。然后通过巯基连接上凝血酶适配体,再通过温育固定上凝血酶目标物。而没有结合凝血酶的DNA适配体与5′-生物素标记的互补DNA低聚核苷酸(cDNA)杂交形成双链DNA低聚核苷酸结构,再结合亲和素标记的量子点。此传感器的电化学信号与凝血酶浓度成反比,依此建立了凝血酶的分析方法。方法具有选择性好、稳定性高和灵敏度高等特点。