论文摘要
本实验从冠心病的易患因素高脂血症着手,依据冠心病的发病机制,以高脂饲料配方喂养,形成高脂血症,在此基础上,皮下注射异丙肾上腺素,形成心肌缺血的复合模型,使之更符合冠心病的发病特点。并采用血清学方法、放射免疫法、免疫组织化学法等研究方法来观察活血通脉灵（HXTML）对心肌缺血损伤大鼠心肌酶、血脂、炎症因子、黏附分子及心肌细胞结构学等的改变,多层次、多角度探讨HXTML防治冠心病的作用机制,为该药的临床应用提供可靠的实验依据,为冠心病患者中医中药的临床复方用药治疗和预防提供新的思路和方法。目的:探讨活血通脉灵对实验性心肌缺血大鼠心肌损伤的保护作用机制。方法:将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,药物对照组及活血通脉灵大剂量治疗组（HXTMLmax）和活血通脉灵小剂量治疗组（HXTMLmin）,每组10只,实验前记录肢体Ⅱ导联心电图,检测正常者可入选。空白组普通饲料喂养,其余各组动物高脂饲料喂养,28天后禁食12小时大鼠内眦静脉取血,抽查各组大鼠有显著差异后,各治疗组分别开始灌胃用药。空白组和模型组每次给予10ml/kg生理盐水,药物对照组给予消心痛2.5mg/kg,用生理盐水配成等体积混悬液,HXTMLmax组和HXTMLmin组分别给予含生药47g/kg,23.5g/kg汤剂,以上液体按10ml/kg灌胃,每日一次,连续12天,正常饮食。随后连续3天除空白组外,其余4组大鼠均皮下注射ISO 5mg/kg,复制心肌缺血模型,空白组皮下注射等量生理盐水,每日一次。各组均在末次皮下注射后45分钟用20%乌拉坦5ml/kg腹腔注射麻醉,内眦静脉取血1-1.5ml,按试剂盒说明,分别运用CHOD-PAP酶法、GPO-PAP酶法、CAT法测定血清总胆固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白的含量,并用心电图机标记Ⅱ导联。然后断头取血,用全自动生化分析仪检测血清心肌酶,即肌酸激酶（CK）,其同工酶（CK-MB）,乳酸脱氢酶（LDH）。通过放射免疫法检测肿瘤坏死因子（TNF）,白介素6（IL-6）。取心尖部心肌组织,进行苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察病理形态学改变。并采用ABC染色检测P选择素（P-Selectin）和L选择素（L-Selectin）的表达量。结果:1各组大鼠血脂的变化与空白组比较,模型组大鼠血脂总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）明显升高,高密度脂蛋白（HDL-C）下降,差异显著（P<0.01）,与模型组比较,各治疗组血脂的各项指标都有变化,其中大剂量组差异最大,药物对照组和小剂量组差异较小,但均有统计学意义（P<0.01）。药物对照组和小剂量组组间差异无统计学意义（P>0.01）。2心电图改变与实验前所做心电图相比,空白组心电图ST段接近等电位线,T波无明显降低。与空白组比较,模型组ST段压低及T波降低明显（P<0.01）,表明本次复制心肌缺血模型成功。与模型组比较,药物对照组和中药治疗组ST段及T波压低较小（P<0.01）,其中中药治疗组较药物对照组ST段及T波压低改善更为显著,有统计学意义（P<0.01）。但中药治疗组组间差异无统计学意义（P>0.05）。2血清心肌酶三项指标中,模型组较空白组均显著升高,有统计学意义（P<0.01）,与模型组比较,药物对照组和中药治疗组三项指标均降低,差异有统计学意义（P<0.01）,但药物对照组和HXTML大小剂量组三组间差异无统计学意义（P>0.05）。3血清TNF、IL-6模型组与空白组相比,TNF和IL-6水平均升高（P<0.01）。与模型组比较,药物对照组及两个中药治疗组较模型组水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,但药物对照组及中药治疗组组间差异均无统计学意义（P>0.05）。4组织病理损伤空白对照组未见明显的组织学改变;模型组以心肌大范围灶性病变,肌纤维肿胀和断裂,空泡变性,间质水肿,炎细胞浸润为主;药物对照组和HXTMLmin组较模型组改变轻微,以肌纤维肿胀,局灶性断裂,少量空泡变性和炎细胞浸润为主;HXTMLmax组的病理改变最轻,多为炎细胞浸润。5 P-Selectin、L-Selectin表达与空白组比较,模型组大鼠P-Selectin和L-Selectin表达均明显升高,差异显著（P<0.05或P<0.01）,与模型组比较,各治疗组都有不同程度的降低,其中大剂量组差异最大,药物对照组和小剂量组差异较小,但均有统计学意义（P<0.01）。药物对照组和小剂量组组间差异无统计学意义（P>0.01）。结论:活血通脉灵对大鼠心肌缺血而引起的心肌损伤具有保护作用,并能改善心肌供血,降低缺血心肌P-Selectin、L-Selectin的表达,有一定抗炎症作用。