论文摘要
胰岛素样生长因子（IGFs）在鸡的胚胎及胚后发育、分化和生长过程中起着关键性作用。目前对禽类IGF-2基因的研究都主要集中在出生后,对胚胎期的研究较少,同时对禽类胚胎期IGFs水平变化规律的研究结果存在争议。本研究以新扬州鸡为材料,采用ELISA法,测定了新扬州鸡胚胎发育过程中外周IGFs水平变化的规律;同时运用PCR-SSCP法检测了IGF-2基因不同基因片段的多态性,对单核苷酸多态性进行了群体遗传学分析,初步探索了此基因变异对鸡胚生长的影响。结果显示:1、新扬州鸡种蛋从孵化第9.5日龄开始,胚重、心脏重、肝脏重、肌胃重、腺胃重、肠重、胫骨长都随着孵化日龄的增大而呈线性增长。2、对鸡胚胎发育过程中外周IGFs水平变化规律研究显示:IGF-1的浓度在孵化第11.5天时最低,之后逐渐上升至第15.5天时达到最高,其后呈现下降直至出壳;IGF-2的浓度在第10.5天时达到最高峰,随后逐渐下降,至第19.5天时降到最低。从整体趋势看,IGF-1浓度在胚胎发育的后期（15.5天～19.5天）极显著的高于中期的（9.5天～14.5天）（P<0.01）;IGF-2的浓度则是胚胎发育的中期高于后期的浓度。3、新扬州鸡IGF-2基因检测到了三个多态位点,分别位于第2外显子（P1、P2）和第3外显子（P3）。测序结果显示:存在插入突变C（P3）、颠换突变C→G（P1）、T→A、G→T（P2）和转换突变T→C（P3）。4、对多态位点进行基因型频率和基因频率以及基因型分布分析,发现P2、P3突变位点的基因型频率和基因频率差异较大,P1引物标记位点的基因型频率和基因频率相对而言,比较均匀。P1、P3突变位点群体基因型分布之间差异极显著（P<0.01）,处于非Hardy-Weinberg平衡状态; P2引物位点群体基因频率和基因型频率分布之间差异不显著（P>0.05）,处于Hardy-Weinberg平衡状态,同时对其进行遗传多态性分析,在本实验中没有一个达到高度多态。5、本实验中所检测到的IGF-2基因多态性对鸡胚生长的影响各不一致。结合生长测定指标进行LSD比较分析,结果表明:P1、P2、P3突变位点对生长性状的影响分别表现为AB型>AA型>BB型、BB型>AB型>AA型、BB型>AA型>AB型,其中P1、P2突变位点表现为突变型个体生长快于野生型个体,P3突变位点则是野生型个体生长快于突变型个体,由此推测,P1、P2突变位点对鸡胚生长有一定的促进作用,IGF2基因可能是影响鸡胚生长的主效基因或与控制该性状的主效基因相连锁。