人血浆中扎托布洛芬和硫普罗宁定量分析方法研究

论文摘要

1.人血浆和尿样中扎托布洛芬定量分析方法研究背景扎托布洛芬是一种非甾体抗炎药,由日本Chemiphar公司开发研制,于1993年首次在日本上市。目前,临床上主要用于风湿性关节炎、骨关节炎及其它慢性炎症性疼痛的治疗。目的建立灵敏、专属、易操作的液相色谱-串联质谱法,测定人血浆和尿样中扎托布洛芬,并用于扎托布洛芬片人体药代动力学研究。方法LC-MS/MS法测定人血浆和尿样中扎托布洛芬。血浆样品或尿样品经乙醚液-液萃取后,以甲醇-5mmol·L-1乙酸铵（70：30,v/v）为流动相,Zorbax XDB C18柱（150x4.6mmI.D.,5μm）进行分离,采用电喷雾电离源（ESI）,以选择反应监测（SRM）扫描方式进行负离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z297→m/z219（扎托布洛芬）和m/z480→m/z418（瑞舒伐他汀,内标）。结果测定血浆和尿样中扎托布洛芬的线性范围均为20.0～8000ng·mL-1,定量下限均为20.0ng·mL-1,日内、日间精密度（RSD）均小于9.7%,准确度（RE）在-4.0%～-0.5%之间。单个样品色谱分析时间为6.0min。结论首次采用ESI（-）方法测定人血浆和尿样中扎托布洛芬浓度。与文献方法相比,该方法灵敏度高（定量下限达20.0ng·mL-1）,专属性强,成功应用于扎托布洛芬片人体药代动力学研究。2.人血浆中硫普罗宁定量分析方法研究背景硫普罗宁为一种新型含游离巯基的甘氨酸衍生物,临床上应用于急慢性肝炎、风湿性关节炎、白内障以及膀胱神经无力等的治疗。目的建立快速、灵敏、专属的液相色谱-串联质谱法,测定人血浆中硫普罗宁浓度,并应用于硫普罗宁片的人体生物等效性评价。方法LC-MS/MS法测定人血浆中硫普罗宁。血浆样品经1,4-二硫苏糖醇（DTT）还原后,采用对-α-二溴苯乙酮（p-BPB）进行衍生化,同时以乙腈沉淀蛋白后,以甲醇-10mmol·L-1乙酸铵（65：35,v/v）为流动相,Zorbax XDB C18柱（150x4.6mm I.D.,5μm）进行分离,采用电喷雾电离源（ESI）,以选择反应监测（SRM）扫描方式进行负离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z358→m/z116（硫普罗宁衍生物）和m/z362→m/z120（d3,13C-硫普罗宁衍生物,内标）。结果该方法的线性范围为5.00～5000ng-mL-1,定量下限为5.00ng·mL-1;日内、日间精密度（RSD）均小于5.9%,准确度（RE）在-0.8～0.2%间；每个样品的色谱分析时间为4.5min。结论本文采用稳定同位素内标物d3,13C-硫普罗宁,可以有效地克服基质效应,尽量减少实验误差。与文献方法比较,该方法快速（保留时间仅为4.5min）、灵敏（定量下限达5.00ng·mL-1）、血浆用量少（仅需50μL）,实现了高通量分析生物样品,适用于硫普罗宁片的人体生物等效性研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 第二章 液相色谱-串联质谱法测定人血浆和尿中扎托布洛芬
• 2.1 研究背景和实验目的
• 2.2 分析方法的建立
• 2.3 分析方法确证
• 2.4 分析方法在药代动力学研究中的应用
• 2.5 讨论
• 第三章 液相色谱-串联质谱法测定人血浆中硫普罗宁
• 3.1 研究背景和实验目的
• 3.2 分析方法的建立
• 3.3 分析方法确证
• 3.4 分析方法在生物等效性中的应用
• 3.5 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附录：受试者色谱图
• 致谢
• 个人简历