纳米钙补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠BMP-4、Smad6 mRNA及蛋白表达影响的实验研究

论文摘要

目的:通过观察纳米钙补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠下丘脑组织的BMP-4、Smad 6mRNA及蛋白表达的影响,探索骨质疏松的发病过程中补肾中药防治的分子生物学基础,研究纳米钙补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠防治作用的机理,从而为临床防治肾虚骨质疏松症合理用药提供科学的实验依据。方法:实验部分采用去双侧卵巢的方法,建立肾虚骨质疏松症模型。纳米钙补肾中药复方（大、中、小）剂量对实验大鼠治疗12周（应用反证的治法）,以骨疏康颗粒剂、牡蛎钙组作为阳性对照组,并设正常对照组和模型空白组。使用XR-36型双能X线骨密度仪（美国NORLAND）,测定大鼠左侧股骨骨密度;用生化方法对血清中抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和碱性磷酸酶（ALP）的指标进行检测;用RT-PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠下丘脑组织中BMP-4、Smad6 mRNA和蛋白表达。结果;（1）实验动物子宫指数比较:与正常组比较,模型空白组等各组均明显降低。与模型空白组比较,纳米钙补肾中药复方各剂量组、骨疏康颗粒组及牡蛎钙组虽有所升高,但均无显著性差异。（2）实验动物左侧股骨骨密度BMD结果:通过12周用药后,各用药组（纳米钙补肾中药复方各剂量组、骨疏康颗粒组、牡蛎钙组）均可明显增加去卵巢实验大鼠股骨的骨密度值,其中纳米钙补肾中药复方中剂量组效果最优。纳米钙补肾中药复方小、中剂量组能达到正常大鼠的骨密度值;纳米钙补肾中药复方高剂量组与牡蛎钙组和骨疏康颗粒组效果相似。（3）血清骨代谢生化指标血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）结果:与模型空白组比较,纳米钙补肾中药复方小、中剂量组有显著性差异,但未达到正常组水平。与正常组比较各组有非常显著性差异,各治疗组间无显著性差异。（4）血清碱性磷酸酶含量结果:与模型空白组比较,纳米钙补肾中药复方小、中剂量组有显著性差异,能达到正常组水平。但纳米钙补肾中药复方高剂量组和骨疏抗颗粒组无显著性差异。（5）RT-PCR及Western方法检测,大鼠下丘脑组织中BMP-4mRNA及蛋白表达结果:模型空白组与正常组比较,大鼠下丘脑组织中的BMP-4 mRNA和蛋白表达水平明显的增强。（6）RT-PCR及Western方法检测,大鼠下丘脑组织中Smad6 mRNA及蛋白表达结果:模型空白组与正常组比较大鼠下丘脑组织中的mRNA和蛋白表达水平明显的降低。结论:纳米钙补肾中药能明显提高骨质疏松症大鼠的骨密度和骨形成及抑制骨吸收,但大鼠下丘脑组织中的BMP-4基因表达和蛋白表达,与正常组比较模型空白组表达增强。大鼠下丘脑组织中的Smad6基因表达和蛋白表达,与正常组比较模型空白组表达降低。

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