青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究

论文摘要

青钱柳[Cyclocarya paliurus（Batal.）Iljinskaja]集药用、保健、材用、观赏等多种功效于一体,具有很高的开发价值,但是自然更新困难,开发利用受到严重制约。本课题选择了青钱柳四个种源（其中三个单株）离体胚作为外植体,系统建立了由离体胚培养到生根诱导的整个技术体系,并以子叶作为试料对生根机理进行了探讨。本研究旨在建立快速、高效的青钱柳组培快繁体系,为工厂化育苗提供理论依据。现将本研究主要结论与成果总结如下:（1）比较了不同培养基中离体胚生长情况,结果表明添加蔗糖20g/L的琼脂白培养基显著提高了离体胚的萌发率（82.33%）。此培养条件下种源间离体胚质量差异较大:06庐山1#成苗率最好,为72.66%;06剑河3#和06云南4#其次,成苗率44.00%、39.33%;06鹤峰种源最差,仅17.33%。（2）据离体胚培养的结果和试验基数的要求,选择06庐山1#、06剑河3#、06云南4#做进一步的丛生芽诱导增殖试验。初代与继代培养的结果证实了不同种源长势上的差异。初代培养兼顾丛生芽诱导率与增殖系数,继代培养以增殖系数和苗高作为考察对象。试验结果表明6-BA0.5～1.0mg/L+IBA0.01mg/L是适合初代、继代培养的最佳激素组合。06剑河3#在6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L组合下丛生芽诱导率100.00%,增殖系数6.08,苗高3.87cm;06庐山1#与06云南4#最佳丛生芽诱导率分别为93.33%、63.33%,增殖系数5.22、2.99,苗高3.12cm、3.40cm。（3）选用了稀土硝酸镧和烯效唑进行壮苗培养,以06剑河3#和06庐山1#继代试管苗作为试材,测定了相关生长、生理指标比较壮苗效果。试验结果表明稀土镧5mg/L使苗鲜重增加,促进丛生芽分化,提高叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量,促进高生长,适合作为增殖培养基中壮苗添加物;烯效唑0.5mg/L则能抑制苗高,提高叶绿素含量,提高植株抗性,适合用作增殖后的壮苗培养。（4）继代5次以上的试管苗,首先在1/2WPM+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖20g/L生根诱导培养基暗培养15d,再转入1/2WPM+蔗糖20g/L正常光照培养,06庐山1#不定根发生率23.33%。（5）子叶添加IBA1.5mg/L后,不定根发生率100%。比较研究了子叶不定根发生中四种内源激素的含量变化,结果表明内源IAA对不定根的发生起关键性作用,根原基的启动需要高的内源IAA,而不定根的形成与根的伸长需要较低的内源IAA水平。IAA/ABA,IAA/GA3比值较好反映出生根过程中几种激素的变化趋势,GA3可能不是影响不定根发生的关键因素。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.青钱柳属资源概述
• 2.胡桃科组培研究进展
• 3.生根机理研究
• 4.课题来源、研究的目的及意义
• 5.本课题研究的主要内容
• 第二章 不同种源离体胚培养
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 外植体处理与消毒
• 1.3 培养基与培养条件
• 1.4 观察、统计与数据分析
• 2.结果与分析
• 0、S₁、S₂对06庐山1^#污染率、萌发率和成苗率的影响'>2.1 S₀、S₁、S₂对06庐山1^#污染率、萌发率和成苗率的影响
• 1对不同种源污染率、萌发率和成苗率的影响'>2.2 S₁对不同种源污染率、萌发率和成苗率的影响
• 3.讨论与小结
• 3.1 讨论
• 3.1.1 不同种源离体胚的培养与筛选
• 3.1.2 培养基中影响离体胚萌发与成苗的因素
• 3.2 小结
• 第三章 丛生芽的诱导与增殖培养
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 研究方法
• 1.2.1 基本培养基的筛选
• 1.2.2 继代时间的筛选
• 1.2.3 初代培养基的筛选
• 1.2.4 继代培养基的筛选
• 1.3 观察、统计与数据分析
• 2.结果与分析
• 2.1 基本培养基的筛选
• 2.2 继代时间的筛选
• 2.3 初代培养基的筛选
• #初代培养正交试验结果分析'>2.3.1 06剑河3^#初代培养正交试验结果分析
• #初代培养正交试验结果分析'>2.3.2 06庐山1^#初代培养正交试验结果分析
• #初代培养正交试验结果分析'>2.3.3 06云南4^#初代培养正交试验结果分析
• 2.3.4 三个种源初代培养总体情况分析
• 2.4 继代培养基的筛选
• #继代培养两因素试验结果分析'>2.4.1 06剑河3^#继代培养两因素试验结果分析
• #初代培养两因素试验结果分析'>2.4.2 06庐山1^#初代培养两因素试验结果分析
• #继代培养两因素试验结果分析'>2.4.3 06云南4^#继代培养两因素试验结果分析
• 2.4.4 三个种源继代培养总体情况分析
• 3.讨论与小结
• 3.1 讨论
• 3.1.1 基本培养条件的筛选
• 3.1.2 丛生芽诱导增殖的问题
• 3.2 小结
• 第四章 壮苗培养及相关生理生化基础
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 添加生长调节剂进行壮苗培养
• 1.3 生长指标测定
• 1.4 生理生化指标测定
• 1.5 观察、统计与数据分析
• 2.结果与分析
• 2.1 添加生长调节剂对青钱柳试管苗生长特性的影响
• 2.1.1 稀土（硝酸镧）对青钱柳两个单株试管苗生长特性的影响
• 2.1.2 烯效唑对青钱柳两个种源试管苗生长特征的影响
• 2.2 生长调节剂对青钱柳试管苗生理生化特性的影响
• 2.2.1 叶绿素含量的变化
• 2.2.2 可溶性糖含量的变化
• 2.2.3 蛋白质含量的变化
• 2.2.4 超氧化物歧化酶（SOD）动态变化
• 2.2.5 过氧化物酶（POD）动态变化
• 3.指标间相关性分析
• 4.讨论与小结
• 4.1 讨论
• 4.1.1 稀土镧对青钱柳试管苗生长指标的影响
• 4.1.2 烯效唑对青钱柳试管苗生长指标的影响
• 4.1.3 稀土镧对青钱柳试管苗生理生化指标的影响
• 4.1.4 烯效唑对青钱柳试管苗生理生化指标的影响
• 4.2 小结
• 第五章 生根诱导
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 激素和其他生根诱导物的筛选
• 1.2.2 生根方法
• 1.2.3 其他生根诱导条件的探索
• 2.结果与分析
• 2.1 多种添加物质生根效果比较
• 2.2 两种方法生根效果比较
• 2.3 其他条件对生根效果的影响
• 3.讨论与小结
• 3.1 讨论
• 3.1.1 培养基、诱导方法对试管嫩茎生根的影响
• 3.1.2 试管嫩茎的发育状态与生根的关系
• 3.2 小结
• 第六章 不定根发生机理的初步研究
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 研究方法
• 1.2.1 子叶不定根诱导
• 1.2.2 内源激素含量测定
• 1.3 观察统计与数据分析
• 2.结果与分析
• 2.1 不同培养基对子叶诱导不定根效果的影响
• 2.2 子叶诱导不定根过程中内源激素的变化
• 2.2.1 子叶不定根发生及其内源IAA含量变化
• 2.2.2 子叶不定根发生及其内源ABA含量变化
• 2.2.3 子叶不定根发生及其内源IAA/ABA比值变化
• 3含量变化'>2.2.4 子叶不定根发生及其内源GA₃含量变化
• 3比值变化'>2.2.5 子叶不定根发生及其内源IAA/GA₃比值变化
• 2.2.6 子叶不定根发生及其内源ZR含量变化
• 2.2.7 子叶不定根发生及其内源IAA/ZR比值变化
• 3.讨论与小结
• 3.1 讨论
• 3.1.1 青钱柳子叶不定根的发生
• 3.1.2 内、外源激素对子叶不定根发生作用的研究
• 3.2 小结
• 第七章 结论、创新点与展望
• 1.结论
• 2.本试验的创新之处
• 3.存在的问题与不足之处
• 4.今后研究的方向
• 参考文献
• 详细摘要