论文摘要
目的 原发性皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL),主要表现为蕈样肉芽肿(MF)和Sezary综合征(SS),低度恶性。其早期临床表现可多种多样;病理上早期诊断尤其困难,多需要反复的活组织检查,有时要待病情进一步发展才能确诊。恶性肿瘤的单克隆起源性,在T细胞淋巴瘤表现为T细胞抗原受体(TCR)的克隆性重排。理论上讲,只要能准确地检测这种克隆性重排就可以有效地诊断蕈样肉芽肿。为此,国际上自20世纪80年代以来提出了多种方法,但至今在临床上没有得到广泛应用。我们分析比较了这些方法的优缺点,选择了一种简便快速的方法:采用一步法提取石蜡包埋组织的基因组DNA,利用巢式PCR检测TCR-Vγ基因克隆性重排,用琼脂糖凝胶电泳查看扩增结果。我们的临床病例对照研究结果表明该方法具有很高的特异度和较高的灵敏度,适合于作为临床诊断的辅助手段。利用该方法,我们对本质不甚明了的副银屑病标本进行了TCR基因克隆性重排检测,结果提示副银屑病的一部分可能与蕈样肉芽肿具有内在联系。本实验的目的是探讨TCR基因克隆性重排检测技术在蕈样肉芽肿辅助诊断中的意义。 材料和方法 (一) 实验材料:来自中国医科大学附属第一床医院皮肤科病理室,10%福尔马林固定、石蜡包埋组织标本:蕈样肉芽肿(MF)59例、神经性皮炎20例、慢性湿疹20例、副银屑病40例、临床及病理都符合其疾病的诊断标准;正常皮肤组织标本20例:来自中国医科大学附属第一医院整形外科手术切除的正常人正常皮肤。 (二) 实验方法:1、DNA的提取:石蜡标本切片,常规脱蜡,蛋白酶K(终浓度200μg/ml)消化17小时,95℃加热10分钟灭活蛋白酶K,离心取
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