论文摘要
为筛选旋毛虫成虫表达的与宿主肠粘膜上皮细胞结合的相关蛋白基因,旋毛虫新生幼虫表达的与宿主肌细胞染色体DNA结合的相关蛋白基因,以及旋毛虫新生幼虫表达的与宿主肌细胞结合的侵入相关蛋白基因,进而为研究旋毛虫包囊形成机制,研究寄生虫与宿主间的信号转导机制,预防和治疗旋毛虫病奠定基础,本研究构建了旋毛虫成虫和新生幼虫T7噬菌体展示cDNA文库。并成功的建立了以DNA为基础利用硝酸纤维素膜筛选噬菌体展示文库的方法;用小鼠肌肉染色体DNA对展示文库进行筛选,获得了旋毛虫新生幼虫DNA结合相关蛋白基因。结果成功构建了旋毛虫成虫和新生幼虫T7噬菌体展示cDNA文库,文库容量为3×105pfu,重组率为98%,扩增后文库滴度为3×1012pfu/mL。用小鼠肌肉染色体DNA对所构建的文库经过4轮筛选,获得了7种有意义的DNA结合相关蛋白基因,序列分析和蛋白质二级结构和翻译后修饰推测,其中的4种蛋白具有参与旋毛虫包囊形成和寄生虫同宿主间信号转导的可能性。本研究为研究旋毛虫包囊形成机制,研究寄生虫与宿主间的信号转导机制,预防和治疗旋毛虫病,乃至寄生虫病奠定了基础。
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标签：旋毛虫新生幼虫论文; 噬菌体展示论文; 文库论文; 结合相关蛋白基因论文; 筛选论文;