刺参粘多糖对Hela中Caspase表达的影响

论文摘要

目的探讨刺参粘多糖（Sjamp）对人宫颈癌细胞株Hela的体外生长、凋亡的影响及可能机制。方法（1）培养Hela细胞,获取刺参粘多糖。（2）MTT法测细胞生长活性:分别以0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml的刺参粘多糖作用于细胞,再培养72小时后加MTT液,加入DMSO,测OD值,计算抑制率。抑制率（%）=（A对照-A实验）/A对照×100%。（3）透射电镜观察细胞形态:选择对数生长期的人Hela细胞,分别给予0.8mg/ml,1.2mg/ml及1.6mg/ml的刺参粘多糖作用,对照组予等量的培养液,给药后24h,72h和120h各组分别取样,倒置显微镜及电镜观察Hela细胞的形态改变。（4）RT-PCR法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9 mRNA的表达。以对照组（不加药Hela细胞）及三种药物浓度（0.8mg/ml,1.2mg/ml,1.6mg/ml）处理后的24h,72h及120h的Hela细胞为样本,分别提取RNA,行反转录,以反转录所得的cDNA用作PCR反应的模板,行PCR。PCR扩增产物经凝胶电泳后,将目的PCR产物的光密度与内参照PCR产物光密度的比值,即为半定量RT-PCR结果。结果（1） MTT不同药物浓度组与对照组（不加药物）比较,OD值均降低,随着药物浓度的增高,OD值降低的愈明显。即刺参粘多糖对Hela细胞的生长具有抑制作用。（2）电镜下可观察到凋亡小体等细胞凋亡的形态学改变。（3）随着药物浓度及作用时间的增加,caspase-3及casepase-9 mRNA的表达增加。结论刺参粘多糖可抑制Hela细胞生长,诱导Hela细胞的凋亡。诱导Caspase-3及caspase-9 mRNA表达增多可能是其诱导Hela细胞凋亡的机制之一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要试剂
• 1.1.2 主要仪器及设备
• 1.2 方法
• 1.2.1 细胞培养
• 1.2.2 MTT法检测SJAMP作用对Hela细胞增殖的影响
• 1.2.3 细胞形态学观察
• 1.2.4 RT-PCR法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9的表达
• 第二章 结果
• 2.1 形态学改变
• 2.2 SJAMP对Hela增殖的影响
• 2.3 caspase-3及caspase-9的表达
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢