中药川芎挥发性成分分析及药代动力学研究

论文摘要

药物代谢研究在药物研究与开发中占有举足轻重的地位,中药活性成分代谢的研究近年来越来越多地引起人们的关注。本论文以传统中药川芎为对象,提取其中的挥发油,并分析其化学成分,比较几种提取方法所得挥发油化学组成成分上的差异;从挥发油中分离纯化制备得到主要有效成分藁本内酯单体的对照品;建立了HPLC法测定挥发油以及生物样品中藁本内酯的含量;并应用此方法研究了口服给以川芎挥发油后,藁本内酯在小鼠和大鼠体内的药动学动态变化过程以及生物转化情况;研究了藁本内酯在小鼠体内各组织间的分布特性;同时还建立了LC-ESI-MS法测定肝微粒体孵育液中的藁本内酯,并应用该方法开展了藁本内酯在肝微粒体中的体外代谢研究;研究结果显示藁本内酯在体内和体外存在生物转化,且有一定的差异。本论文通过上述研究,丰富了中药药物代谢和药动学的研究内容,为临床合理用药提供了理论的参考,为中药现代化研究进行了有利的探索。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 详细摘要
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 川芎挥发油的提取、物理参数测定及化学成分分析
• 引言
• 实验部分
• 1.仪器和试药
• 1.1 仪器设备
• 1.2 试剂与材料
• 2.实验方法与结果
• 2.1 水蒸汽蒸馏法提取挥发油
• 2.2 川芎挥发油主要物理参数测定
• 2.2.1 相对密度测定
• 2.2.2 折光率测定
• 2.3 川芎挥发油化学成分分析
• 3.讨论
• 参考文献
• 第二部分 藁本内酯单体的分离纯化及结构鉴别
• 引言
• 实验部分
• 1.仪器和试药
• 1.1 仪器设备
• 1.2 试剂与材料
• 2.实验方法
• 2.1 薄层色谱条件
• 2.2 高效液相色谱条件
• 2.3 藁本内酯的分离纯化
• 3.实验结果
• 3.1 藁本内酯的结构鉴别
• 3.1.1 紫外吸收光谱
• 3.1.2 红外吸收光谱
• 3.1.3 核磁共振光谱
• 3.1.4 质谱
• 3.2 藁本内酯杂质检查
• 3.2.1 薄层色谱法杂质检查
• 3.2.2 HPLC法杂质检查
• 3.3 藁本内酯纯度测定
• 3.4 藁本内酯稳定性考察
• 4.讨论
• 参考文献
• 第三部分 口服川芎挥发油后藁本内酯的代谢动力学研究
• 引言
• 实验部分
• 1.仪器和试药
• 1.1 仪器设备
• 1.2 试剂与材料
• 1.3 实验动物
• 2.实验方法
• 2.1 HPLC测定方法
• 2.1.1 储备液配制
• 2.1.2 色谱条件
• 2.1.3 样品预处理方法
• 2.2 乳剂的制备
• 2.3 动物实验方法
• 3.实验结果
• 3.1 HPLC方法学考察
• 3.1.1 专属性
• 3.1.2 线性与范围
• 3.1.3 精密度
• 3.1.4 准确度
• 3.1.5 提取回收率
• 3.1.6 稳定性
• 3.2 乳剂的考察
• 3.2.1 性状
• 3.2.2 外观形态
• 3.2.3 粒径测定
• 3.2.4 初步稳定性考察
• 3.3 生物样品中药物浓度测定
• 3.4 药代动力学参数
• 3.5 生物转化研究
• 4.讨论
• 参考文献
• 第四部分 口服川芎挥发油后藁本内酯的组织分布特性研究
• 引言
• 实验部分
• 1.仪器和试药
• 1.1 仪器设备
• 1.2 试剂与材料
• 1.3 实验动物
• 2.实验方法
• 2.1 HPLC测定方法
• 2.1.1 储备液配制
• 2.1.2 色谱条件
• 2.1.3 样品预处理方法
• 2.2 动物实验方法
• 3.实验结果
• 3.1 HPLC方法学考察
• 3.1.1 专属性
• 3.1.2 线性与范围
• 3.1.3 精密度
• 3.1.4 准确度
• 3.1.5 提取回收率
• 3.1.6 稳定性
• 3.2 组织分布特性
• 3.3 生物转化研究
• 4.讨论
• 参考文献
• 第五部分 藁本内酯在肝微粒体中体外代谢的初步研究
• 引言
• 实验部分
• 1.仪器和试药
• 1.1 仪器设备
• 1.2 试剂与材料
• 1.3 实验动物
• 2.实验方法
• 2.1 溶液的配制
• 2.2 HPLC-MS检测条件
• 2.2.1 色谱条件
• 2.2.2 质谱检测条件
• 2.3 大鼠肝微粒体的制备
• 2.4 体外代谢温孵条件
• 2.5 样品预处理方法
• 2.6 藁本内酯在肝微粒体中代谢的酶促反应动力学
• 2.6.1 孵育时间对藁本内酯体外代谢的影响
• 2.6.2 肝微粒体蛋白浓度对藁本内酯体外代谢的影响
• 2.6.3 底物浓度对藁本内酯体外代谢的影响
• 2.6.4 酶促反应动力学参数的测定
• 2.6.5 选择性CYP抑制剂对藁本内酯体外代谢的影响
• 3.实验结果
• 3.1 LC-MS测定方法
• 3.1.1 检测条件优化
• 3.1.1.1 定量离子选择
• 3.1.1.2 质谱条件的优化
• 3.1.2 专属性
• 3.1.3 线性和范围
• 3.1.4 精密度
• 3.1.5 准确度
• 3.1.6 提取回收率
• 3.1.7 稳定性
• 3.2 影响因素实验结果
• 3.2.1 孵育时间对藁本内酯体外代谢的影响
• 3.2.2 酶浓度对藁本内酯体外代谢的影响
• 3.2.3 底物浓度对藁本内酯体外代谢的影响
• 3.3 酶促反应动力学参数
• 3.4 选择性CYP抑制剂对藁本内酯体外代谢的影响
• 3.5 藁本内酯体外代谢的生物转化
• 4.讨论
• 参考文献
• 综述:中药药动学研究概况
• 致谢
• 附录:硕士期间发表论文