德州地区鸡源致病性大肠杆菌流行病学调查与耐药性分析

论文摘要

大肠杆菌病给养禽业造成了严重的经济损失，是禽病调查中最常报道的疾病及胴体废弃的主要原因。大肠杆菌病对公共卫生也具有重要的影响，可对人类的健康造成潜在的危害。大肠杆菌极易产生耐药性，临床上的不规范用药进一步加剧了耐药性的发展。很多试验表明，大肠杆菌耐药菌株越来越多，耐药谱越来越广，甚至有的菌株对尚未广泛用于兽医临床的新型抗生素也表现出很强的耐药性。在临床治疗中大剂量、盲目使用抗生素不但给兽医临床治疗带来了困难，助长了耐药菌株的产生，同时加剧了治疗和用药的恶性循环，并且对人类健康构成了潜在威胁。本研究对德州地区鸡大肠杆菌病的流行情况和致病性大肠杆菌的耐药性状况进行了研究，以期探明德州地区鸡源性大肠杆菌病的流行情况和耐药现状，从而为有效控制德州地区鸡大肠杆菌病的发生流行提供可靠的理论依据。本研究主要分三部分进行：试验一2010～2011年自山东省德州地区的12个县市区36个规模化鸡场采集的疑似鸡大肠杆菌病例的内脏病料进行大肠杆菌的分离鉴定，共分离鉴定出33株鸡源大肠杆菌，应用微量平板凝集试验鉴定分离菌株的O抗原血清型，分别属于O78、O35、O1、O2和O88等5个血清型，其中O78（11/33）、O2（11/33）和O35（7/33）为主要流行血清型，占分离菌株总数的87.88%。试验二选取了12种常用药物对33株鸡源大肠杆菌分离株进行药敏试验，结果显示：德州地区大肠杆菌分离株对12种药物均呈现不同程度的耐药，并且其中31株菌为耐受三种药物以上的多重耐药菌株，占总分离菌株的93.9%。分离菌株产生耐药性的药物依次是卡那霉素、四环素、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星和链霉素，这六种药物的耐药性都大于54.5%，耐药性最严重的是卡那霉素，耐药率为84.8%；最敏感的药物为头孢噻肟，其敏感率都达到了72.7%。试验三对33株大肠杆菌的氨基糖甙类药物的ant（3’’）-Ia、aac（6’）-Ib、aph（6’）-IIa、FYUA和IRP2五个耐药基因进行了PCR检测，结果表明24株菌中含有氨基糖苷类药物的耐药基因，检出率高达72.7%，并且存在多重耐药基因。ant（3’’）-Ia基因的检出率最高，占扩增出氨基糖甙类耐药基因菌株的58.3%。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 1 病原学
• 2 流行病学
• 3 发病原因
• 4 致病机理
• 5 临床症状及病理变化
• 6 防治方法
• 7 大肠杆菌的耐药性
• 试验一 德州地区鸡源致病性大肠杆菌的分离与鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 病料
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 主要仪器和设备
• 1.2 方法
• 1.2.1 营养琼脂平板和麦康凯琼脂平板的制备
• 1.2.2 病原菌的分离培养
• 1.2.3 病原菌的纯化
• 1.2.4 生化试验
• 1.2.5 血清型鉴定
• 2 结果与分析
• 2.1 革兰氏染色镜检
• 2.2 病原菌的分离与纯化
• 2.3 生化试验
• 2.4 血清型鉴定
• 3 讨论
• 试验二 鸡源致病性大肠杆菌的耐药性分析
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 33 株鸡源大肠杆菌药敏试验结果
• 2.2 33 株鸡源大肠杆菌的多重耐药情况
• 3 讨论
• 试验三 鸡源致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因的 PCR 检测
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 ant（3’’）-Ia 基因的扩增结果
• 2.2 aac（6’）-Ib 基因的扩增结果
• 2.3 aph（3’）-IIa 基因的扩增结果
• 2.4 FYUA 基因的扩增结果
• 2.5 IRP2 基因的扩增结果
• 2.6 序列分析
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢