PCAF乙酰化HOXA10调控人子宫内膜容受性的初步研究

论文摘要

转录因子homeoboxa 10（HOXA10）是胚胎着床的关键分子,其生物功能活性调控的分子机制仍不清。我们采用酵母双杂交筛选实验发现,乙酰基转移酶P300/CBP相关因子（PCAF）为HoXA10新的相互作用蛋白。提示,PCAF可能通过乙酰化修饰HOXA10介导子宫内膜容受性的建立,影响胚胎着床。本研究通过蛋白质免疫共沉淀和细胞免疫荧光化学实验证实PCAF与HOXA10生理性相互结合并共同定位于人子宫内膜癌腺上皮细胞（Ishikawa）细胞核内,PCAF与HOXA10的DNA结合功能域homebox结构域特异性结合；荧光素酶报告基因实验表明PCAF以浓度依赖的方式抑制Ishikawa细胞中HOXA10对内膜容受性标志分子β3-Integrin（ITGB3）启动子的转录激活（P<0.05）,而显性失活的PCAF-△HAT对HOXA10的转录活性不具有明显作用；腺病毒介导的PCAF在Ishikawa细胞中的过表达通过乙酰化修饰HOXA10抑HOXA10对ITGB3蛋白质表达的调控；腺病毒介导的PCAF过表达以及si-PCAF介导的PCAF基因沉默实验证实,PCAF对子宫内膜细胞中HOXA10存在乙酰化修饰作用；胚胎与子宫内膜细胞粘附实验表明,PCAF通过乙酰化修饰HOXA10抑制子宫内膜细胞中ITGB3表达而减少胚胎与内膜间的粘附（P<0.05）。临床样本调查发现,胚胎种植窗口期,子宫内膜异位症（endometriosis,EMT）患者较正常育龄期妇女子宫内膜组织中PCAF表达水平显著增高（P<0.05）。综上所述：我们首次发现1、Ishikawa细胞中,PCAF通过乙酰化修饰HOXA10调控子宫内膜容受性的建立；2、临床样本EMT患者子宫内膜组织PCAF表达较正常人明显增多。因而,PCAF与HOXA10在子宫内膜细胞中相互作用研究的深入,将为临床理解EMT不孕的病因学提供新的线索。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 第1章 绪论
• 1.1 表观遗传修饰
• 1.2 p300/CBP协同蛋白
• 1.3 PCAF乙酰化修饰对非组蛋白分子功能的影响
• 1.4 PCAF与疾病发生
• 小结
• 第2章 PCAF乙酰化HOXA10调控人子宫内膜容受性的初步研究
• 第1节 PCAF与HOXA10生理性相互结合
• 2.1.1 材料和方法
• 2.1.2 结果与分析
• 2.1.3 讨论
• 第2节 PCAF乙酰化HOXA10抑制胚胎粘附
• 2.2.1 材料和方法
• 2.2.2 结果
• 2.2.3 讨论
• 第3节 PCAF高表达于子宫内膜异位症患者子宫内膜组织
• 2.3.1 材料和方法
• 2.3.2 结果与分析
• 2.3.3 讨论
• 第3章 结论
• 附录
• 参考文献
• 在读期间发表的学术论文及研究成果
• 基金资助来源
• 致谢