酪蛋白的酶水解改性研究

论文摘要

针对酪蛋白的过敏性,该课题对酪蛋白的酶水解改性进行了系统的研究。采用酶法对酪蛋白进行改性,水解掉一部分的酪蛋白,所产生的小肽易于消化吸收,从而在一定程度上降低了酪蛋白的致敏性。以酪蛋白为底物,选用胰蛋白酶和碱性蛋白酶对酪蛋白进行水解。以分子量分布为指标,先通过单因素试验确定胰蛋白酶和碱性蛋白酶水解酪蛋白的水解时间、pH值、水解温度以及酶与底物浓度比的大致范围。再通过四因素三水平正交试验确定胰蛋白酶和碱性蛋白酶水解酪蛋白的最优工艺。结果表明,胰蛋白酶的最优工艺条件为:时间2.5h、pH值8、温度50℃、E/S为14000U/100ml;碱性蛋白酶的最优工艺条件为:时间4.5h、pH值9、温度55℃、E/S为15000U/100ml。经比较试验研究发现,碱性蛋白酶水解酪蛋白所得水解产物的水解度、分子量1000～180的肽含量均高于胰蛋白酶。碱性蛋白酶最优条件下酪蛋白水解液的水解度为16.99%,分子量1000～180的肽含量为77.38%。胰蛋白酶最优条件下酪蛋白水解液的水解度为7.64%,分子量1000～180的肽含量为59.09%。为了达到更好的水解效果,降低成本,提高经济实用性,本课题采用了碱性蛋白酶和胰蛋白酶进行复配,共同作用于酪蛋白,得出复合酶水解酪蛋白的最优工艺为:时间4.5h,pH9.00,温度55℃,碱性蛋白酶添加量为9100U/100ml,胰蛋白酶添加量为3900U/100ml。经比较试验研究发现,复合酶水解的效果明显优于单酶,复合酶最优条件下酪蛋白水解液的水解度为18.81%,分子量1000～180的肽含量为82.67%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1. 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 婴儿配方粉的国内外研究进展
• 1.3 婴儿不易消化牛乳的原因
• 1.3.1 牛乳与人乳蛋白质的差异
• 1.3.2 其他组成成分的差异
• 1.4 蛋白质的消化与吸收机制
• 1.4.1 蛋白质的消化过程
• 1.4.2 小肽的吸收机制
• 1.5 酪蛋白的水解及应用
• 1.5.1 酪蛋白的水解方法
• 1.5.2 酪蛋白水解物的功能
• 1.6 研究的目的和意义
• 1.7 研究的主要内容
• 2. 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 原料与主要试剂
• 2.1.2 仪器设备
• 2.2 试验设计
• 2.2.1 蛋白酶水解酪蛋白工艺流程设计
• 2.2.2 蛋白酶水解酪蛋白的单因素试验设计
• 2.2.3 蛋白酶水解酪蛋白条件的优化
• 2.2.4 复合酶水解酪蛋白工艺条件
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 蛋白质的测定
• 2.3.2 脂肪的测定
• 2.3.3 水分的测定
• 2.3.4 灰分的测定
• 2.3.5 乳糖的测定
• 2.3.6 蛋白酶活力的测定
• 2.3.7 水解度的测定
• 2.3.8 分子量分布的测定
• 3. 结果与讨论
• 3.1 酪蛋白成分分析
• 3.2 蛋白酶活力测定结果
• 3.2.1 酪氨酸标准曲线的绘制
• 3.2.2 蛋白酶活力的测定
• 3.3 时间对酪蛋白酶解产物的影响
• 3.3.1 时间对胰蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.3.2 时间对碱性蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.4 pH 值对酪蛋白酶解产物的影响
• 3.4.1 pH 值对胰蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.4.2 pH 值对碱性蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.5 温度对酪蛋白酶解产物的影响
• 3.5.1 温度对胰蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.5.2 温度对碱性蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.6 酶和底物浓度比对酪蛋白酶解产物的影响
• 3.6.1 酶和底物浓度比对胰蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.6.2 酶和底物浓度比对碱性蛋白酶水解酪蛋白酶解产物的影响
• 3.7 胰蛋白酶水解酪蛋白工艺条件的优化
• 3.8 碱性蛋白酶水解酪蛋白工艺条件的优化
• 3.9 复合酶水解酪蛋白工艺的探讨
• 4. 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介