一、热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义（论文文献综述）
彭卓隽[1]（2020）在《艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用》文中提出目的:探索艾灸的抗肿瘤效应与诱导胃癌组织HSP70-PCs的相关性;观察将艾灸干预后胃癌组织HSP70-PCs提取物回输至荷瘤大鼠体内对肿瘤增殖及免疫功能的影响;观察艾灸后胃癌组织HSP70-PCs提取物对树突状细胞、T细胞、Walker-256肿瘤细胞的影响。探讨艾灸抗癌作用及可能机制,对艾灸-HSP70疫苗的研发提供初步的实验依据。方法:（1）16只SD大鼠以Walker-256细胞来源的腹水造皮下瘤模型,成模后随机分为模型组和艾灸组,艾灸组干预14天后,无菌环境下剖开荷瘤部位将各组大鼠剥取肿瘤,称重,用抗体柱亲和纯化方法从艾灸组、模型组来源的胃肿瘤大鼠肿瘤中提取HSP70-PCs。（2）从成年大鼠骨髓及脾脏获取树突状细胞与T细胞,各分组为盐水组、模型组与艾灸组,每组6孔加入培养板,相应干预72h后测量OD值;孔板加入Walker-256细胞,按照效靶比1:20,1:40接种T细胞,并加入不同组别提取的HSP70-PCs,2.5 ug/ml,每组6孔,72h后测OD值;孔板加入Walker-256细胞,按效靶比1:20接种T细胞和DC,并加入不同组提取的HSP70-PCs,每组6孔,72h后测OD值。（3）将体重160～180g大鼠18只,分别于右后肢腹股沟处注射Walker256细胞5×106个/ml,0.2ml/部位。7日后,成模大鼠随机分为盐水组、模型组、艾灸组,模型组和艾灸组分别于两侧后肢腹股沟皮下注射模型和艾灸来源的HSP70-PCs蛋白溶液共10ug（20ug/ml,0.5ml/只）,盐水组每周注射一次等量的生理盐水作对照,每7日注射1次,共注射3次。于第28日禁食不禁水12小时后眶内采血,采血后处死动物,无菌条件下切开荷瘤部位皮肤,称取瘤体重量。流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T细胞比例,HE法观察walker-256细胞瘤组织形态,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:（1）模型组HSP70-PCs含量为14.2ug/克组织,总量102.24ug;艾灸组为72ug/克组织,总量972ug。0.01),艾灸组细胞数明显多于模型组（P<0.01）;培养2日后两组细胞数仍明显多于对照组（P<0.01）,但艾灸组与模型组之间无明显差异（P>0.05）;培养3日后,各组细胞数无差异（P>0.05）。T细胞培养3日后,与对照组比较,艾灸组T细胞光密度稍增加（P<0.05）,但与模型组无差异（P>0.05）。T细胞与Walker-256癌细胞混养效靶比1:20时,模型组、艾灸组光密度相比对照组明显降低（P<0.05）;效靶比1:40时,艾灸组光密度明显降低,与对照组仍有差异（P<0.05）,但与模型组无差异（P>0.05）。T细胞、DC与Walker-256癌细胞混养时,与对照组比较,艾灸组样本的光密度下降,差异显着（P<0.01）,但与模型组无差异（P>0.01）。组大鼠去脏器体质量相比模型组明显增加（P<0.01）、胸腺质量与脾脏指数增加（P<0.05）;与对照组比较,模型组血中CD4+T细胞数量及CD4+/CD8+比值上升（P<0.01）,艾灸组CD8+T细胞数显着上升（P<0.01）,CD4+/CD8+比值稍下降（P<0.05）;艾灸组CD4+T细胞数较模型组明显减少,CD8+T细胞数增加,CD4+/CD8+比值下降（均P<0.01）;结论:1.HSP70-PCs提取物回输对荷瘤大鼠肿瘤增长具有抑制作用,而艾灸组提取物干预后抑制作用更明显。2.艾灸干预后肿瘤组织的HSP70-PCs提取物能加速免疫细胞的增殖,并促进淋巴细胞反应对Walker-256癌细胞的杀伤作用。3.艾灸干预后肿瘤组织的HSP70-PCs提取物回输后,能调节荷瘤大鼠的免疫功能。
方杰[2]（2015）在《HSP47抑制剂IPA1010改善高脂诱导沙鼠非酒精性脂肪肝炎（NASH）作用机制》文中进行了进一步梳理目的建立稳定可复制的非酒精性脂肪肝炎（NASH）长爪沙鼠模型,观察热休克蛋白47（HSP47）抑制剂（IPA1010）对NASH长爪沙鼠肝组织病理状态、Hedgehog信号通路相关蛋白表达的影响。方法取50-60g健康雄性长爪沙鼠适应饲养1周后,分为6组:正常对照组,NASH模型对照组,阳性对照组（辛伐他汀）,IPA1010低、中、高剂量干预组,每组10只。除正常对照组给予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料连续喂养12周,造成NASH模型。阳性对照组和IPA1010低、中、高剂量组于第8周末同时灌胃给予相应的药物,模型对照组和正常对照组给予相同剂量的生理盐水灌服。动物于12周末麻醉后腹主动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清胰岛素（INS）、透明质酸（HA）、羟脯氨酸（Hyp）、Ⅲ型前胶原（PC Ⅲ）、Ⅳ型前胶原（PC Ⅳ）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和白介素-1β（IL-1β）含量;化学比色法检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）的含量。免疫组织化学法检测肝组织CD4+T、CD8+T和NK细胞数量,蛋白印迹法检测沙鼠肝组织HSP47、TGF-β1、NF-κB p65、SHH和GLI3蛋白表达的影响。结果高脂饲料连续喂养12周成功建立NASH模型。与模型对照组相比,IPA1010可显着改善NASH长爪沙鼠肝组织的病理状态;显着降低血清ALT、AST、TC和TG,改善肝功能,调节血脂水平;显着降低血清PCⅢ、PC Ⅳ、TGF-β1和IL-1β含量,改善肝纤维化水平。模型对照组沙鼠肝组织内CD4+T淋巴细胞和NK自然杀伤细胞浸润明显增加,给予IPA1010干预后,沙鼠肝组织内CD4+T淋巴细胞和NK自然杀伤细胞的浸润显着减少。HSP47、TGF-β1、NF-κB p65、SHH蛋白在IPA1010 干预下显着下调,GLI3蛋白显着上调。结论HSP47抑制剂IPA1010可有效改善高脂饮食引起肝功能损伤,减轻肝纤维化进程,改善肝脏的免疫微环境,其机制可能是通过抑制HSP47蛋白从而抑制Hedghog信号通路,降低下游炎症因子等相关蛋白起到缓解NASH的发展。
田磊[3]（2012）在《大鼠脑缺血再灌注后HSP20和Bcl-2的表达及丹红注射液干预的影响》文中进行了进一步梳理目的：检测SD大鼠脑缺血再灌注中小热休克蛋白20（heat shock protein HSP20）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2）在脑组织中的动态变化,分析二者之间可能的关系,探讨其在脑缺血再灌注中的作用。研究丹红注射液对SD大鼠脑缺血再灌注中HSP20、Bcl-2的影响,阐明丹红注射液可能的机制。方法：将250g-320g雄性健康SD大鼠60只,随机划分成四组：正常对照组（normal group）（n=10）,假手术组（sham-operated group）（n=10）（?）口脑缺血再灌注组（I/R group）（n=20）,丹红注射液药物干预组（n=20）。应用Longa法建立SD大鼠大脑中动脉缺血两小时再灌注模型,其中IR组和药物干预组又分为四个亚组,每个亚组5只动物,分别是：6小时组、1天组、3天组、7天组。按Bedersonl的5级评分法来评价手术后SD大鼠的神经功能缺损。应用HE染色法观察大鼠脑组织病理学变化情况；应用免疫组织化学法来检测Bcl-2、HSP20的阳性细胞表达水平的动态变化；应用实时荧光定量PCR方法对标本中HSP20mRNA的表达及扩增倍数进行测定。结果：1.HE染色：假手术组和正常对照组可见SD大鼠脑组织中神经元结构及形态正常、无间质水肿、没有明显的梗塞灶。脑缺血再灌注组可见神经元细胞坏死产生,随着时间的推移病灶侧神经元坏死变性现象加重并伴有胶质细胞增生。而在药物干预组和IR组各个相同时间点的亚组相比较,可以看出药物干预组大鼠脑组织损伤程度明显轻于缺血再灌注组。2.免疫组织化学结果：（1）HSP20在假手术组和正常组的个时间点偶见阳性细胞,两组比较无统计学意义（P>0.05）。在脑缺血再灌注6h组中HSP20的表达有所升高,3d时到达高峰,之后呈逐渐下降趋势,7d组阳性细胞数较3d组也有明显减少,但仍高于假手术组和正常组。表达主要位于海马区的神经元、神经胶质细胞胞浆中及血管内皮细胞。IR组与假手术组及正常对照组比较HSP20的表达有差异,其差异有统计学意义（P<0.01）；（2）Bcl-2在假手术组和正常组中偶可见阳性细胞,两组比较无统计学意义（P>0.05）；Bcl-2在脑缺血再灌注6h组中表达开始升高,并迅速升高在1d时达到高峰,之后随着时间的推移逐渐下降,7d组阳性细胞数较3d组也有明显减少,但依然比假手术组及正常组高；Bcl-2阳性细胞数在IR组与假手术组的比较中有差异,且其差异有统计学意义（P<0.01）；（3）丹红药物干预组中,HSP20的表达趋势与IR组基本相同,但阳性细胞数明显高于IR组,且其差异有统计学意义（P<0.05）。丹红药物干预组与脑缺血再灌注组中Bcl-2的表达趋势基本相同,但阳性细胞数却明显高于IR组,并且差异有统计学意义（P<0.05）。3.RT-PCR检测结果：在脑缺血再灌注组中HSP20mRNA在6h时开始升高,3d时达到最高,之后逐渐降低但7d组仍高于正常对照组及假手术组,与正常组和假手术组比较有统计学意义（P<0.05）。在丹红药物干预组中HSP20mRNA的表达趋势与IR组基本相同,同样在6h时开始升高,3d时达到最高后开始缓慢下降,但HSP20mRNA表达量却明显高于IR组,且其差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.脑缺血再灌注后HSP20、Bcl-2表达均升高2.丹红注射液可以上调HSP20和Bcl-2的表达,并且可能有神经保护作用
申定珠[4]（2007）在《胃溃疡复发大鼠胃组织的蛋白质组学研究与健胃愈疡颗粒干预》文中认为背景:消化性溃疡（Peptic Ulcer,PU）是临床常见病、多发病,随着溃疡病治疗药物的进展,PU的近期愈合已不成问题,但其复发问题一直是溃疡病研究的热点和难点。胃溃疡（Gastric Ulcer,GU）作为消化性溃疡的常见类型,其复发是一涉及多因素改变的复杂过程,虽然从基因和转录水平已对其进行了许多成功的研究,但其病理机制仍不十分明确,尚缺乏有效的用于早期诊断及预后检测的特异性分子标志物,若能直接从蛋白质组学入手来研究,将能更全面、真实地揭示其病理机制,为GU复发的发病学、预防诊治以及新药开发提供新的线索。蛋白质组学的出现及其研究技术的发展和完善使得从蛋白质整体水平上研究GU复发及其溃疡相关性疾病的分子机制成为可能。目的:1.研究白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）所致GU复发大鼠胃组织的蛋白质表达,探讨GU复发的相关发病机制;2.分析健胃愈疡颗粒（JianWeiYuYang granule,JWYY）干预IL-1β所致GU复发大鼠胃组织的蛋白质表达变化,探讨JWYY抗GU复发的作用机理。方法:1.GU复发大鼠模型的制备及JWYY干预:①将80只大鼠随机分为4组,即正常对照组（10只）、假手术对照组（10只）、GU模型组（40只）、JWYY组（20只）,采用改良的Okabe乙酸涂抹法复制实验性GU模型,正常对照组不造模,假手术对照组以生理盐水代替乙酸,造模后24h,JWYY组灌服JWYY药液,剂量为0.081g/1ml/100g体重,其余各组灌服蒸馏水,剂量均为1ml/100g体重,每天1次。造模后第90d,再将GU模型组大鼠随机分为GU模型组和GU模型复发组各半,采用IL-1β复制GU复发模型,正常对照组、假手术对照组、GU模型复发组、JWYY组大鼠分别腹腔注射IL-1β（1μg/kg体重）,GU模型组以生理盐水代替IL-1β腹腔注射;②分别于造模后第8d、92d（即复发溃疡诱导后48h）均分2批处死各组大鼠,剖腹取胃,在对胃大体情况、胃溃疡指数（Gastric ulcer index,GUI）进行检测后,剪取胃窦部含溃疡处（无溃疡者则于相应部位取材）胃组织行HE染色（hematoxylin andeosin stain,HE stain）、双向凝胶电泳（Two dimensional electrophoresis,2-DE）、免疫组织化学（Immunohistochemistry,IH）、逆转录-聚合酶链式反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）。2.GU复发大鼠胃组织蛋白质组学研究及JWYY干预:应用固相pH梯度（Immobilized pH gradient,IPG）2-DE技术分别分离正常组、GU模型组、GU模型复发组及JWYY组大鼠不同时间点胃组织总蛋白质后,经考染显色、PDquest图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（matrix-assisted laserdesorption/ionization time of flight mass,MALDI-TOF-MS）分析得到肽质量指纹图谱（peptide mass fingerprint,PMF）,再经Mascot软件搜索SWISS-PROT和NCBI蛋白质数据库鉴定蛋白质,并利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能进行分析。3.差异蛋白质HSP27（Heat Shock Protein 27）、GRP78（Glucose-RegulatedProtein 78）结果验证:为了验证蛋白质组学鉴定结果的可靠性,采用免疫组化、RT-PCR及Western blot方法对2个可能与GU复发及JWYY作用相关的差异蛋白质HSP27、GRP78于蛋白及mRNA水平的表达情况进行验证分析。结果:1.GU复发大鼠模型的制备及JWYY干预:造模后第8d,经乙酸造模的各组大鼠胃黏膜肉眼观察和组织学检查均可见到溃疡病灶,但溃疡程度不一,GU模型组GUI最高,JWYY组GUI显着低于模型组（P＜0.05）。至第92d,GU模型复发组、JWYY组溃疡复发率分别为90%,20%,后者与前者比较有显着性差异（P＜0.01）;2.GU复发大鼠胃组织的蛋白质组学研究及JWYY干预:①GU复发大鼠胃组织双向凝胶电泳图谱的建立及图像分析:建立了正常组、GU模型组、GU模型复发组及JWYY组大鼠胃组织的2-DE图谱。在相同的设定值时检测到的蛋白质点数分别为:正常组935±29个,GU模型组8d、92d分别为1012±23、1068±32个,GU模型复发组为1109±24个,JWYY组8d、92d分别为1002±43、1023±36个。经背景消减后,分别将其中的一块胶定为参考胶进行3块胶间的蛋白质点的匹配,结果得到正常组的平均匹配点数为867±31个,GU模型组8d、92d分别为957±28、989±42个,GU模型复发组为1007±35,JWYY组8d、92d分别为886±31、936±48个,其平均匹配百分率分别为92.7%、94.6%、92.6%、90.8%、88.4%、91.5%。不同胶蛋白质点在IEF方向的偏差为0.901±0.125 mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为1.108±0.102 mm;②各组大鼠胃组织2-DE图谱差异点分析:比较分析各组大鼠胃组织的2-DE图谱,GU模型组8d与正常组之间有282个差异点,65个在GU模型组表达上调,217个表达下调;JWYY组8d与GU模型组之间有216个差异点,157个在JWYY组表达上调,59个表达下调;GU模型复发组与正常组之间有189个差异点,73个在GU模型复发组表达上调,116个表达下调;JWYY组92d与GU模型复发组之间有168个差异点,115个在JWYY组表达上调,53个表达下调;③通过比较正常组、GU模型复发组及JWYY组双向凝胶电泳图谱的差异,发现并鉴定了15个可能与GU复发及JWYY干预相关的蛋白质,这些蛋白质的功能涉及分子伴侣、细胞骨架蛋白、物质代谢与转运、能量产生、抗氧化应激、信号转导及血液蛋白等。3.差异蛋白质HSP27、GRP78结果验证:免疫组化、RT-PCR及Western blot检测结果显示,HSP27、GRP78在正常胃组织中有少量表达,8d时GU模型组中表达明显增加（P＜0.01）,8d、92d时JWYY组中表达均明显增强（P＜0.01）,证实了正常组、GU模型复发组及JWYY组中HSP27、GRP78于蛋白、mRNA表达水平与2-DE结果相一致。结论:1.JWYY能促进乙酸诱导的GU大鼠溃疡愈合,降低其GUI,改善溃疡愈合质量（QOUH）,降低IL-1β诱导的GU复发大鼠的溃疡复发率;2.成功建立了正常组、GU模型复发组及JWYY组的双向凝胶电泳（2-DE）图谱,鉴定了15个差异表达的蛋白质,提示GU复发是一多种蛋白质参与的复杂过程,大鼠胃组织的比较蛋白质组学分析是筛选GU复发病变相关蛋白质的可靠方法之一;JWYY可调节GU复发大鼠胃组织的多种蛋白质表达,提示该复方具有多靶点的作用特点;3.HSP27、GRP78的免疫组化、RT-PCR及Western blot验证结果与蛋白质组学分析结果一致,从一定程度上证明了蛋白质组学实验方法的稳定性及其结果的准确性;同时也说明HSP27、GRP78于蛋白和基因转录水平表达基本保持一致;JWYY可能通过上调GU复发大鼠胃组织HSP27、GRP78蛋白和mRNA的上增性表达,从而实现抗溃疡复发,这可能是其抗GU复发的作用机制之一。
李山[5]（2006）在《人肝癌发生的蛋白质组学研究及ANXA4等蛋白质的表达与功能验证》文中提出人类肝癌是诊治困难、预后极差的一种恶性肿瘤，其发生发展是多因素参与的多环节的病理过程，传统的单基因研究模式限制了肝癌相关因素的研究发展。近年来迅速发展的蛋白质组学研究，能动态、整体、定量地考察疾病发生发展过程中全部蛋白质种类和数量的变化，对于探讨疾病发病机理、寻找疾病诊断的特异性标志物和药物治疗的靶标来说，是一种有效的高通量的研究模式，可获得一些传统手段无法得到的新蛋白标志物、新关键分子，极大地丰富了诊断标志物的选择组合及复杂致病机理的全面阐明。本研究运用蛋白质组学研究方法及手段，通过对人类正常肝组织、乙型肝炎组织、肝硬化肝组织、肝细胞性肝癌组织的全蛋白质组表达谱差异分析，筛选出了一些有潜在应用价值的差异蛋白质，对其中的差异分子annexins A4（ANXA4）、PeroxiredoxinⅡ（PrxⅡ）、PeroxiredoxinⅢ（PrxⅢ）在肝癌组织中进行表达验证，并采用RNA干扰技术以及癌发生相关生物学特性的鉴定方法对ANXA4进行了功能分析。 第一部分 人肝细胞性肝癌发生相关的蛋白质组学研究 本部分应用双向凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）结合基质辅助的激光解析离子化-飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption／ionization-time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）等蛋白质组学技术，对正常肝组织、乙型肝炎组织、肝硬化肝组织、肝细胞性肝癌组织的全蛋白质差异表达谱进行分析，筛查在肝癌发生过程中发挥重要作用的差异蛋白分子。 选择正常人肝组织（A组）5例，以及临床病理确定为乙型肝炎的肝组
秦雪[6]（2006）在《树鼩肝癌发生过程中的差异蛋白质组学研究及Prx家族的表达验证》文中认为肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是诊治困难、预后极差的一种恶性肿瘤,全球三大肿瘤死因之一,1990年全世界共有54.1万新发的肝癌病例,50.1万人死于肝癌,其中31.8万（58.5%）新发病例和29.3万（58.8%）肝癌死亡发生在中国。HCC的病因目前认为主要与乙型肝炎病毒（HBV）感染及食品中黄曲霉毒素B1（AFB1）污染有关。和其它多数肿瘤一样,HCC的形成是一个多步骤、多阶段、多因素参与的过程,传统的单基因研究模式限制了HCC相关因素的研究发展。近年来迅速发展的蛋白质组学研究,能动态、整体、定量地考察疾病发生发展过程中全部蛋白质种类和数量的变化,对于探讨疾病机理、寻找疾病诊断的特异性标志物和药物治疗的靶标来说,是一种有效的高通量的研究模式,可获得一些传统手段无法得到的新蛋白标志物、新关键分子,极大地丰富了诊断标志物的选择组合及复杂致病机理的阐明。运用该研究策略,建立并优化了适合本实验的双向凝胶电泳（2-DE）技术平台,并利用树鼩可以在实验诱癌过程中经受多次剖腹肝活检手术而长期存活的特点,本研究对HCC形成过程中不同时期肝组织的蛋白质组改变进行动态观察。对AFB1和AFB1+人HBV诱发树鼩肝癌发生不同阶段的差异表达蛋白进行筛选,找出在HCC形成过程中一些有潜在作用的差异蛋白质,并对其中的差异蛋白Prx家族在肝癌组织和癌旁组织进行验证,为探讨人HCC发生机理提供重要科学依据。第一部分人工繁育树鼩的生理指标与正常人的对比本部分的研究目的是通过对人工繁育的成年树鼩进行实验室指标的检测,以之与正常人参考值进行比较,分析二者间的关系,探讨树鼩用于研究人疾病动物模型的可行性及优越性。选择人工繁育饲养的成年树鼩22只,同一天内抽取树鼩的抗凝全血和分离血清,随即进行相关实验室指标的检测。结果为,血常规检测,红细胞总数8.19×1012/L,高于正常人参考值,白细胞总数2.2×109/L,低于正常人参考值;每份全血标本涂片和染色后镜检观察,树鼩各种血细胞及血小板形态都与正常人相似;白细胞分类计数,树鼩各种细胞百分比与正常人相近;血清标本生化十项指标检测,仅树鼩肌酐一项结果为16.63μmol/L,低于正常人参考值下限44μmol/L,树鼩的血清谷丙转氨酶77.92U/L、谷草转氨酶179.9 U/L分别高于正常人参考值上限40 U/L和45 U/L,其余七项结果符合正常人参考值范围,包括尿素、球蛋白、血清总蛋白、血清白蛋白、血清γ-谷氨酰基转移酶、C-反应蛋白及类风湿因子;检测HBsAg为0.022 ng /ml±0.005,均为阴性。以上各实验室指标检测结果提示,树鼩作为接近人的低等灵长类动物,适合应用于研究人类疾病的动物模型,为进一步利用树鼩模型研究HCC发生机理提供了实验依据。第二部分树鼩肝癌蛋白质组学双向凝胶电泳技术的建立及优化本部分研究的目的是通过建立并优化树鼩肝癌蛋白质组学的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率和重复性,并利用该平台进行AFB1和AFB1+人HBV诱发树鼩肝癌形成过程中差异表达蛋白质组学的研究。实验以AFB1和AFB1+HBV诱发树鼩肝癌形成过程中各时期的肝组织标本,通过对传统的双向凝胶电泳技术的程序及有关环节进行反复改进,尤其对其中的关键因素环节,如样品的处理（单纯的液氮下研磨、液氮下研磨再剧烈振荡）、蛋白定量方法（Lowery法和改良Bradford法）、上样方式（杯上样、泡胀上样）、等电聚焦程序和凝胶染色方法（考马斯亮蓝R-250染色、传统银染、质谱兼容银染）等,进行了一系列的优化。实验结果通过优化获得了较为理想的电泳图谱:图谱蛋白点数明显增多（1228个vs 856个）;图谱分辨率提高,水平条带及纵向拖尾现象明显减少。同时,2-DE的重复性也有大幅度提高:对同组样品在三次不同实验中所得蛋白质斑点数目分别为1241、1192和1216个,IEF方向平均偏差1.73±0.99 mm,SDS-PAGE方向平均偏差1.11±0.75mm。本技术平台的建立为后续工作奠定了基础。第三部分树鼩肝癌发生过程中差异表达蛋白质组学的研究本部分的研究目的是应用2-DE和MALDI-TOF-MS等蛋白质组学技术,比较分析AFB1与AFB1+人HBV诱发树鼩肝癌发生过程中肝组织蛋白质表达谱的差异,寻找在树鼩肝癌发生过程中起重要作用的关键蛋白质分子,为探讨人HCC发生机理提供重要科学依据。本研究利用树鼩可以在实验诱癌过程中经受多次剖腹肝活检手术而长期存活的特点,对HCC形成过程中不同时期肝组织、癌前各时期的肝活检组织、肝癌和癌旁组织,以及各同期对照组织蛋白质组改变进行动态观察。由于细胞或组织蛋白质组的复杂性,应用2-DE分离总蛋白时,为保证结果的准确性及精确度,本研究共12个实验组:①AFB1实验组（A组）,A组45周肝活检组织（A45w）、A组75周肝活检组织（A75w）、A组肝癌组织（ACa）、A组癌旁组织（ACp）;②AFB1+HBV实验组（C组）,C组45周肝活检组织（C45w）、C组肝癌组织（CCa）、C组癌旁组织（CCp）;③HBV实验组（D组）,D组45周肝活检组织（D45w）、D组105周肝活检组织（D105w）;④正常对照组（E组）,E组45周肝活检组织（E45w）、E组75周肝活检组织（E75w）、E组105周肝活检组织（E105w）,每组6例组织样本的混合总蛋白分别进行3次2-DE以保证试验的重复性。蛋白质均用13cm pH 3-10非线性IPG胶条,采用泡胀上样方式进行等电聚焦电泳,共获得36块2D胶图谱。各组蛋白表达谱中蛋白多集中分布于pI 4-8间的区域,用ImageMaster 2D Platinum 5.0软件将凝胶分类别进行点的匹配分析。每组3块胶,各组平均检测到的蛋白点数如下: A45w组1255±43个,A75w组1197±46个,ACa组1198±50个,ACp组1205±89个;C45w组1233±30个,CCa组1257±35个,CCp组1244±39个;D45w组1100±79个,D105w组1115±61个;E45w组1249±51个,E75w组1179±62个,E105w组1208±36个。筛选出差异2倍及其以上并且在半数胶以上中均存在的蛋白点共206个。从相应的考马斯亮蓝染色的制备胶中挖取差异倍数较大且蛋白斑点较清晰的差异蛋白点160个,进行MALDI-TOF-MS/MS分析。为保证取点的准确性,每个点均从三块胶中挖取后分别进行酶解鉴定,取质谱鉴定结果一致者。鉴定出的差异蛋白点共142个,95种蛋白,包括peroxiredoxin家族（PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ、PrxⅥ）、细胞色素C氧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶Ⅰ、硫氧还蛋白、细胞色素B5、酮己糖激酶、不均一核糖核蛋白、磷酸丙糖异构酶、尼克酰胺N-甲基转移酶、转移抑制基因NM23-H1、翻译控制肿瘤蛋白等。第四部分差异蛋白Prx家族在树鼩及人HCC组织中的表达验证由于第三部分筛选鉴定的结果显示, peroxiredoxin家族（PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ）在AFB1诱发树鼩HCC形成过程中,多个成员蛋白均出现明显差异表达:PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ在癌组织中表达均较癌前组织明显上调,PrxⅣ则在癌组织中较癌旁组织明显上调,并且由于Prx的生物学功能广泛并与多种肿瘤相关,因此选择该组蛋白作为进一步研究目标。本部分的研究目的是对差异蛋白Prx家族在树鼩HCC发生不同阶段的蛋白水平和mRNA水平的表达差异,以及在人肝癌组织和癌旁组织间的表达差异进行再验证,进一步解析该蛋白的生物学功能,探讨Prx家族蛋白在肝癌发生发展中的作用以及其作用机制。应用Western Blot技术,本部分结果证实PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ蛋白表达水平在AFB1诱发树鼩HCC组织（ACa）明显高于癌前组织（A45w）,略高于正常对照组织（E45w）,PrxⅣ蛋白表达水平亦发生上调,但差异未达2倍。人HCC组织验证结果,PrxⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的表达量都略高于癌旁组织,但升高倍数均未达到2倍。运用RT-PCR技术检测,PrxⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ在树鼩和人的mRNA表达水平升高趋势与蛋白表达水平相同。Prx家族蛋白有望成为一类有应用价值的肝癌标志物蛋白,有可能应用于HCC的诊断、治疗和预后评价。结论1、树鼩作为低等灵长类动物,各项实验室指标检测结果接近正常人,为其用于建立研究人类疾病的动物模型进一步提供了支持依据。2、通过对2-DE相关技术的摸索,建立和优化了适合于本实验的树鼩肝癌蛋白质组学双向凝胶电泳技术平台,为后续研究奠定了基础。3、与对照组各时期的正常肝组织相比,树鼩HCC发生过程中各时期肝组织表现出有一定差异性的蛋白表达谱,表明HCC的发生发展是一个综合的多因素参与的过程。鉴定出的142个,95种差异表达蛋白质,可能参与肝癌的发生发展。4、Prx家族蛋白有望成为一类有应用价值的肝癌标志物蛋白,有可能应用于HCC的诊断、治疗和预后评价。潜在应用价值1、树鼩作为低等灵长类动物,适合应用于研究人类疾病的动物模型。2、建立了树鼩肝癌蛋白质组学双向凝胶电泳技术平台。3、筛检出的差异蛋白有可能成为肝癌发生的诊断标志物及预后判断指标,丰富了肝癌诊疗指标的选择与组合。4、Prx可以作为一种有应用价值的测定肝癌发生发展的标志物。创新点1.建立并优化了树鼩肝癌蛋白质组学双向凝胶电泳技术平台。2.利用树鼩可以在实验诱癌过程中经受多次剖腹肝活检手术而长期存活的特点,对HCC形成过程中不同时期肝组织的蛋白质组改变进行动态分析,筛选出一批与肝癌发生不同阶段相关的差异蛋白。3.分析了与特定病因因素:AFB1、AFB1 +人HBV诱发HCC相关的差异表达蛋白。4.分析了肝组织感染HBV不同时期的差异表达蛋白。5.首次证实差异蛋白PrxⅠ、PrxⅡ、PrxⅢ、PrxⅣ在AFB1诱发的树鼩肝癌发生过程中出现上调。
吴顺华,成军,郑玉建[7]（2005）在《热休克蛋白家族与肝癌的关系》文中研究指明热休克蛋白HSP是一种广泛存在于微生物和动植物体内的一种应激蛋白.HSP在HCC的生物治疗中将发挥越来越重要的作用.HSP在生物体内起着参与加速降解和清除细胞代谢产物,维护细胞的功能和生存,协同免疫应答,调节信号传导通路,调控细胞周期,抑制凋亡以及促进微管的形成与修复等作用.大量研究显示一些HSP在肿瘤免疫中发挥作用,并有望制成基因疫苗应用于肿瘤的防治.本文综述了HSP70,HSP90,HSP47,HSP27等在肝癌的发生、发展和治疗中的进展及其在肝癌防治中的意义.
郭津生,王吉耀,纪元,谭云山[8]（2000）在《热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义》文中提出目的 研究热休克蛋白 47（HSP47）在人肝癌癌周组织以及大鼠胃溃疡组织中的表达和分布 ,并讨论其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测了 6例肝癌手术切除标本及乙酸诱导后不同时间大鼠胃溃疡组织标本内HSP47的表达和定位。结果 人肝癌包膜、癌旁肝纤维化纤维间隔内的纤维细胞以及在纤维间隔附近肝细胞周围的星状细胞表达HSP47蛋白。大鼠胃组织内成纤维细胞、血管内皮细胞以及平滑肌细胞均有HSP47蛋白的表达。溃疡基底肉芽组织内大量增生的成纤维细胞、小血管内皮细胞表现HSP47蛋白强阳性染色。结论 HSP47作为一种胶原特异的分子伴随 ,不仅参与纤维化 /硬化疾病的形成 ,而且还在损伤修复和组织重建中起到重要作用
江学良,潘伯荣,马景云,冀振华,马连生[9]（2000）在《世纪之交的消化学——回顾与展望》文中提出 由世界消化学网（http://www.wd.org.cn）、《World Journalof Gastroenterology》和《世界华人消化杂志》共同举办的第二届.世界消化学大会于2000-09-08～11在北京国际会议中心隆重举行,参加大会的来自美国,英国,德国,荷兰,加拿大,比利时,瑞典,希腊,拉托维亚,印度等境外代表43人,国内代表810人,其中,中科院院士2人,工程院院士3人,教授,主任医师182人,副教授,副主任医师293人,院长,研究员38人,副院长,副研究员28人,主治医师191人,医师139人,科室主任192人,科室副主任87人,参展公司21个.本次大会主题为:回顾20世纪消化学巨大成就,展望21世纪消化学更大发展.本次大会共收到论文1500篇,其中大会全会报告50篇（含国外报告23篇）,分组报告100篇,壁报展示90篇,《世界
李丽[10]（2021）在《基于“TLRs信号通路”观察不同配穴对预防应激性胃溃疡“调衡防控”的分子机制研究》文中认为目的:本文通过对预针刺不同配穴（合募配穴和俞募配穴）,研究其对应激性胃溃疡（SGU）大鼠胃黏膜形态的影响和对血清及胃组织中氧化-抗氧化与炎症相关因子的影响,以及对胃组织TLRs信号通路及大肠组织TLRs信号通路相关m RNA的影响,从多角度分析不同配穴对应激性胃溃疡大鼠黏膜组织的保护作用。探讨预针刺不同配穴对保护黏膜组织作用上的效应差异,以期对腧穴配伍理论提供实验依据。方法:1.将36只雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组,模型组,合募配穴组和俞募配穴组,每组9只,合募配穴组予以电针“中脘”—“足三里”,10 min/次,隔日1次,俞募配穴组予以电针“中脘”—“胃俞”,10 min/次,隔日1次,两组均干预10天。随后采用水浸束缚应激法建立SGU大鼠模型。采用肉眼及苏木精-伊红染色观察各组大鼠的胃黏膜形态、计算溃疡指数（UI）和病变积分。以观察不同配穴对胃黏膜组织的保护作用。2.采用TBA法测定血清中SOD、MDA水平,比色法测定血清及胃组织MPO、血清GSH-Px水平,硝酸还原酶法测定血清及胃组织NO水平,采用ELISA法测定血清中ET-1、IL-1β、IL-6、TNF-α含量。以检测血清及胃组织中氧化-抗氧化及炎症因子的水平。3.采用免疫组化染色法观察胃组织TLR4、MyD88、TRIF蛋白表达情况。采用Western blot法检测胃组织中TLR4、MyD88、IκB-α蛋白的表达。以观察不同配穴对TLR4信号通路的调节作用。4.采用Fast QC测序数据,对原始数据质量评估;采用Trim galore测序数据并进行质量控制;采用HISAT2参考基因组比对;采用Rseqc对转录组整体质量评估;采用String Tie进行基因表达定量;采用deseq2进行差异基因鉴定;采用WGCNA进行WGCNA分析;采用Cluster Profiler进行富集分析（GO富集分析、KEGG富集分析）,以检测大鼠大肠组织TLRs信号通路相关m RNA表达情况。结果:1.通过观察胃组织肉眼及胃溃疡组织形态学的变化,同时结合UI及病变积分,发现预针刺合募配穴与俞募配穴均具有保护SGU大鼠胃黏膜的作用,与模型组相比UI及病变积分,具有显着性差异（P<0.0001）,合募配穴组与俞募配穴比较UI上无显着性差异（P>0.05）,从病变积分上来看,合募配穴组的效果优于俞募配穴组（P<0.05）。说明从病理组织切片中观察合募配穴对胃黏膜的保护作用优于俞募配穴组。2.预针刺合募配穴组与俞募配穴组能有效预防当SGU发生时氧化-抗氧化因子紊乱状态,胃组织中,模型组与空白组比较MPO（P<0.001）,NO（P<0.05）水平显着上升,俞募配穴组与模型组比较MPO显着下降（P<0.001）,合募配穴组与模型组比较下降不显着（P>0.05）,说明俞募配穴具有降低MPO水平的作用。合募配穴组与模型组比较NO显着下降（P<0.05）,俞募配穴组与模型组比较,NO上升但不显着（P>0.05）。说明胃组织中合募配穴可显着降低NO的水平。3.模型组与空白组比较,血清中SOD（P<0.0001）,NO（P<0.001）,GSH-Px（P<0.001）水平显着下降,MPO（P<0.0001）、MDA（P<0.0001）、ET-1（P<0.001）水平显着上升,俞募配穴组、合募配穴组与模型组比较,血清中MPO（P<0.05）,MDA（P<0.001）,ET-1（P<0.001）水平显着下降,说明合募配穴组与俞募配穴组在调节血清MPO、MDA、ET-1水平上具有共同点。合募配穴组与模型组比较SOD（P<0.0001）,NO（P<0.001）,GSH-Px（P<0.0001）水平显着上升。俞募配穴组与模型组比较SOD（P<0.05）,NO（P<0.001）水平显着上升。合募配穴与俞募配穴组比较SOD（P<0.05）,GSH-Px（P<0.001）水平显着上升。说明合募配穴组与俞募配穴组比较不同点在于SOD、GSH-Px水平上。4.模型组与空白组相比,IL-6（P<0.0001）,TNF-α（P<0.0001）,IL-1β（P<0.001）含量显着升高,合募配穴组与模型组比较,预针刺处理大鼠后IL-6和TNF-α含量显着减少（P<0.0001）,但IL-1β含量之间并没有显着性差异（P>0.05）,俞募配穴组与模型组比较,预针刺处理大鼠后IL-6和TNF-α含量显着减少（P<0.0001）,IL-1β（P<0.001）含量亦显着下降,说明俞募配穴组与合募配穴组比较不同点在于调节IL-1β含量上。5.与空白组相比,模型组显着提高了TLR4和MyD88,TRIF的表达（P<0.05）,降低IκB-α的表达（P<0.05）,合募配穴组与俞募配穴组预处理显着降低了TLR4、MyD88和TRIF的表达（P<0.05）,提高了IκB-α的表达（P<0.05）,这表明预针刺合募配穴与俞募配穴可抑制TLR4/MyD88/TRIF/IκB信号通路的激活而发挥保护胃黏膜组织的作用。其不同点在于MyD88蛋白表达量上。6.在KEGG富集中,富集到的TLR信号通路是Toll-like receptor signaling pathway。空白组与模型组比较应激性胃溃疡发生时改变的关键相关基因有Casp8,Nfkbia,Tlr4,Ctsk,Cxcl10,Spp1,Cxcl11,Irf7,Traf6;在GO富集中,合募配穴组与俞募配穴组保护黏膜组织的基因共同的有1个,为Cd36,俞募配穴与合募配穴预防黏膜组织的不同的关键基因有Tlr1,S100a9,Reg3g,Lbp,Tnf,Tlr5,Nod2。结论:1预针刺对SGU大鼠的氧化应激及炎症因子水平有调整作用,这可能是“调衡防控”的重要起始步骤之一。其中,不同配穴效应差异的关键因子可能是SOD、GSH-Px、MPO、IL-1β。2预针刺对SGU大鼠黏膜组织的保护作用可能是通过TLRs信号通路转导实现的。这可能是“调衡防控”的中心环节之一。合募配穴可能通过抑制TLR1/TLR4/MyD88/TRIF/IκB-α通路而发挥作用,俞募配穴可能通过抑制TLR4/TLR5/MyD88/TRIF/IκB-α通路而发挥作用,其不同点可能在于TLR1、TLR5、MyD88蛋白上。
二、热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义（论文提纲范文）
（1）艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 :HSP70的提纯 |
| 1 实验材料 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 :艾灸后胃癌组织HSP70-PCs提取物对免疫细胞的影响及对肿瘤细胞的抑制效应 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 T细胞与肿瘤免疫 |
| 4.2 DC与肿瘤免疫 |
| 4.3 HSP70 体外对DC、T淋巴细胞的增殖作用 |
| 5 研究小结 |
| 第三部分 :艾灸后的胃癌组织HSP70-PCs提取物回输后对荷瘤大鼠的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 热休克蛋白70在治疗肿瘤中的应用 |
| 4.2 HSP70对胸腺、脾腺的影响 |
| 4.3 HSP70 对外周血中CD4+、CD8+T 细胞的影响 |
| 4.4 艾灸的热刺激效应能诱导HSP70高表达 |
| 5 小结 |
| 第四部分 讨论 |
| 1 中西医对于胃癌的认知 |
| 2 艾灸治疗癌症的依据和思路 |
| 3 从艾灸诱导HSP70产生思考艾灸抗肿瘤的机制 |
| 4 存在的问题与展望 |
| 第五部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 艾灸对患癌机体免疫细胞调节作用探讨 |
| 参考文献 |
（2）HSP47抑制剂IPA1010改善高脂诱导沙鼠非酒精性脂肪肝炎（NASH）作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 实验一 HSP47抑制剂对NASH长爪沙鼠脂质代谢及肝功能的影响 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 主要试剂及药物 |
| 3. 主要仪器和设备 |
| 4. 高脂饲料配方 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 实验动物分组及模型的建立 |
| 2. 实验指标的测定 |
| 2.1 肝脏组织病理学检查 |
| 2.2 血液生化指标的检测 |
| 2.3 血液生化指标的灰色关联度分析 |
| 2.4 NASH沙鼠免疫细胞CD4~+T、CD8~+T和NK细胞的表达分析(免疫组化染色) |
| 3. 数据统计学处理 |
| (三) 实验结果 |
| 1. IPA1010对NASH长爪沙鼠肝脏病理变化的影响 |
| 1.1 肉眼观察 |
| 1.2 HE染色光镜观察 |
| 1.3 Masson染色光镜观察 |
| 1.4 油红O染色光镜观察 |
| 1.5 NAFLD长爪沙鼠肝组织病理评级 |
| 2. IPA1010对NASH长爪沙鼠血清生化指标的影响 |
| 3. 灰色关联度分析结果 |
| 4. IPA1010对NASH沙鼠肝组织CD4~+T、CD8~+T和NK细胞的表达分析 |
| (四) 分析与讨论 |
| 1. 国内外常见的肝纤维化动物模型 |
| 2. 高脂饲料诱导的长爪沙鼠NASH模型的优点及基础 |
| 3. IPA1010对NASH沙鼠肝脏免疫微环境的影响 |
| 4. NASH长爪沙鼠血清指标的特征分析 |
| (五) 结论 |
| 实验二 IPA1010对NASH沙鼠肝组织Hedgehog通路及炎症相关蛋白表达的影响 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 主要仪器和设备 |
| 3. 主要试剂及药物 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 试剂配制 |
| 2. 实验动物分组及模型的建立 |
| 3. 蛋白免疫印迹检测 |
| 4. 数据统计学处理 |
| (三) 实验结果 |
| 1. IPA1010对NASH沙鼠肝组织Hedgehog信号通路及炎症相关蛋白表达的影响 |
| (四) 分析与讨论 |
| 1. IPA1010对NASH沙鼠肝组织Hedgehog信号通路及炎症相关蛋白表达的影响 |
| (五) 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
（3）大鼠脑缺血再灌注后HSP20和Bcl-2的表达及丹红注射液干预的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要药品和试剂 |
| 2.3 主要实验仪器 |
| 2.4 动物分组 |
| 2.5 MCAO动物模型的制作 |
| 2.6 病理学检查 |
| 2.7 免疫组化检查 |
| 2.8 图像处理及组织病理学测量 |
| 2.9 RT-PCR检测HSP20 mRNA |
| 2.10 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 模型制备结果 |
| 3.2 病理结果观察 |
| 3.3 大鼠脑缺血再灌注后脑组织中蛋白表达的动态变化 |
| 3.4 RT-PCR结果 |
| 3.5 附图 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 脑缺血再灌注模型的制作及评价 |
| 4.2 Bcl-2在脑缺血再灌注中的表达及意义 |
| 4.3 HSP20在脑缺血再灌注中的表达及意义 |
| 4.4 脑缺血再灌注中HSP20与Bcl-2关系的探讨 |
| 4.5 丹红注射液对脑缺血再灌注后HSP20和Bcl-2表达的影响及可能的机理 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 主要缩写词表 |
| 你在读期间发表的主要学术论文及参与课题 |
| 致谢 |
（4）胃溃疡复发大鼠胃组织的蛋白质组学研究与健胃愈疡颗粒干预（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩写词简表 |
| 技术路线 |
| 论文正文 |
| 前言 |
| 第一部分 胃溃疡复发大鼠模型的制备及健胃愈疡颗粒干预 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.小结 |
| 第二部分 胃溃疡复发大鼠蛋白质组学研究及健胃愈疡颗粒干预 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.小结 |
| 第三部分 差异蛋白质HSP27、GRP78结果验证 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.小结 |
| 讨论 |
| 1 胃溃疡复发大鼠模型的制备及健胃愈疡颗粒干预 |
| 2 GU复发大鼠蛋白质组学研究及JWYY干预 |
| 3 JWYY对GU复发过程中差异蛋白质HSP72、GRP78表达的影响 |
| 4 JWYY抗PU复发的中医理论基础 |
| 结论 |
| 附表 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 |
（5）人肝癌发生的蛋白质组学研究及ANXA4等蛋白质的表达与功能验证（论文提纲范文）
| 主要英文缩写 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 人肝细胞性肝癌发生发展相关的蛋白质组学研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1、各组总蛋白2-DE图谱分析 |
| 2、差异蛋白质质谱鉴定结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 差异蛋白ANXA4、PrxⅡ、PrxⅢ的表达验证 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1、ANXA4蛋白及mRNA在人正常肝、肝硬化、小肝癌组织中的差异表达验证 |
| 2、PrxⅡ、Ⅲ蛋白及mRNA在人正常肝、小肝癌组织中的差异表达验证 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 差异蛋白ANXA4的功能验证 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1、RNA干扰片段的设计 |
| 2、载体的构建 |
| 3、annexins A4在干扰后表达下降 |
| 4、annexins A4表达下降后,对细胞内Ca~(2+)调节的影响 |
| 5、annexins A4表达下降后,对细胞凋亡的影响 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 蛋白质组学在肝病研究中的应用进展 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 一、在读期间发表的论文 |
| 二、在读期间主持立项的科研课题 |
| 致谢 |
（6）树鼩肝癌发生过程中的差异蛋白质组学研究及Prx家族的表达验证（论文提纲范文）
| 主要英文缩写 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 人工繁育树鼩的生理指标与正常人的对比 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1、血常规检测结果分析 |
| 2、树鼩血涂片镜检结果 |
| 3、白细胞分类计数 |
| 4、生化检测结果分析 |
| 5、 HBsAg 检测结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 树鼩肝癌蛋白质组学双向凝胶电泳技术的建立及优化 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1、蛋白提取方法的优化 |
| 2、蛋白定量方法的优化 |
| 3、不同上样量的比较 |
| 4、不同上样方式对同一肝组织标本的2-DE 检测结果 |
| 5、细胞裂解液、泡胀液及IEF程序的优化 |
| 6、三种染色方法的比较 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 树鼩肝癌发生过程中差异表达蛋白质组学的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1. 各组肝癌发生情况 |
| 2. 肝癌发生不同阶段肝组织的病理组织学改变 |
| 3. 各组总蛋白 2-DE 图谱匹配率及重复性的分析 |
| 4. 各组总蛋白图谱中差异点的比较分析及差异蛋白质质谱鉴定结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 差异蛋白 Prx 家族在树鼩及人 HCC 组织中的表达验证 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 结果 |
| 1.P rxⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ蛋白及mRNA 在 AF81 诱发的树鼩 HCC 组织中的差异表达验证 |
| 2.P rxⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ蛋白及mRNA 水平在人HCC 组织中的差异表达验证 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述一 树鼩应用于疾病动物模型的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 蛋白质组学在肝肿瘤研究中的应用 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 一、在读期间发表的论文 |
| 二、在读期间主持立项的科研课题 |
| 致谢 |
（7）热休克蛋白家族与肝癌的关系（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 HSP家族的结构功能及分类 |
| 1.1 HSP的概念 |
| 1.2 HSP的分类 |
| 1.3 HSP的功能特征 |
| 2 HSP与肝癌之间的关系 |
| 2.1 HSP70与肝癌 |
| 2.2 HSP90与肝癌 |
| 2.3 HSP47与肝癌 |
| 2.4 HSP27与肝癌 |
（8）热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义（论文提纲范文）
| 材料和方法 |
| 一、标本采集 |
| 二、组织化学和免疫组织化学 |
| 结 果 |
| 一、HSP47在人肝癌和癌周组织中的表达和定位 |
| 二、HSP47在大鼠胃及胃溃疡组织中的表达和定位 |
| 讨 论 |
（9）世纪之交的消化学——回顾与展望（论文提纲范文）
| 1 消化系肿瘤研究成果显着 |
| 1.1 肝癌 |
| 1.2 胃癌 |
| 1.3 食管癌 |
| 1.4 胆系肿瘤 |
| 1.5 大肠肿瘤 |
| 1.6 胰腺肿瘤 |
| 2 消化系疾病研究不断深入 |
| 2.1 胃十二指肠疾病 |
| 2.2 炎症性肠病 |
| 2.3 肝病 |
| 2.4 胰胆疾病 |
| 3 消化内镜技术发展迅速 |
| 4 幽门螺杆菌和胃肠动力疾病仍是研究热点 |
| 4.1. 幽门螺杆菌(H.pylori) |
| 4.2 胃肠动力疾病 |
| 5 中医中药得到继承和发扬 |
| 6 消化外科学研究具有中国特色 |
| 7 我国消化学期刊跻身世界先进行列——《World Journal of Gastroenterology》和《世界华人消化杂志》被国际着名的检索系统收录 |
（10）基于“TLRs信号通路”观察不同配穴对预防应激性胃溃疡“调衡防控”的分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 综述一 不同配穴针刺治疗胃溃疡的机制研究进展 |
| 综述二TLRs信号通路对“氧化-抗氧化”平衡的影响 |
| 实验研究 |
| 实验一 预针刺不同配穴对SGU大鼠胃黏膜的形态学影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 预针刺不同配穴对SGU大鼠血清及胃组织氧化与炎症因子的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 预针刺不同配穴对SGU大鼠胃组织TLRs信号通路的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 实验四 预针刺不同配穴对SGU大鼠大肠组织TLRs信号通路m RNA的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 分析方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 讨论 |
| 1 胃溃疡的中医认识 |
| 2 胃和大肠的关系 |
| 3 TLRs信号通路对黏膜组织的影响 |
| 4 炎症、氧化应激与Toll受体的关系 |
| 5 炎症细胞因子对黏膜组织的影响 |
| 6 氧化-抗氧化因子系统对黏膜组织的影响 |
| 7 水浸束缚应激性胃溃疡动物模型的发展变化 |
| 8 针刺对TLRs信号通路的影响 |
| 9 预针刺对保护黏膜组织的“调衡防控”分子机制 |
| 10 不同配穴组方与功效的探讨 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
四、热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义（论文参考文献）
- [1]艾灸干预胃荷瘤大鼠提取HSP70-PCs并回输大鼠体内对肿瘤细胞的抑制作用[D]. 彭卓隽. 湖南中医药大学, 2020
- [2]HSP47抑制剂IPA1010改善高脂诱导沙鼠非酒精性脂肪肝炎（NASH）作用机制[D]. 方杰. 浙江中医药大学, 2015(01)
- [3]大鼠脑缺血再灌注后HSP20和Bcl-2的表达及丹红注射液干预的影响[D]. 田磊. 湖南师范大学, 2012(12)
- [4]胃溃疡复发大鼠胃组织的蛋白质组学研究与健胃愈疡颗粒干预[D]. 申定珠. 中南大学, 2007(12)
- [5]人肝癌发生的蛋白质组学研究及ANXA4等蛋白质的表达与功能验证[D]. 李山. 广西医科大学, 2006(02)
- [6]树鼩肝癌发生过程中的差异蛋白质组学研究及Prx家族的表达验证[D]. 秦雪. 广西医科大学, 2006(07)
- [7]热休克蛋白家族与肝癌的关系[J]. 吴顺华,成军,郑玉建. 世界华人消化杂志, 2005(14)
- [8]热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义[J]. 郭津生,王吉耀,纪元,谭云山. 胃肠病学和肝病学杂志, 2000(04)
- [9]世纪之交的消化学——回顾与展望[J]. 江学良,潘伯荣,马景云,冀振华,马连生. 世界华人消化杂志, 2000(10)
- [10]基于“TLRs信号通路”观察不同配穴对预防应激性胃溃疡“调衡防控”的分子机制研究[D]. 李丽. 长春中医药大学, 2021(01)