论文摘要
喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤,其病理类型多为喉鳞状细胞癌（LSCC,后文以喉癌代称）。近年来喉癌在我国的发病率有上升趋势,东北地区发病率最高。侵袭性生长及转移是影响喉癌患者预后的主要因素。目前临床上最常用来反映喉癌侵袭、转移特性的是TNM分期,又以淋巴结分期最为重要,然而喉癌特别是声门上型喉癌隐匿性淋巴结转移率非常高。而是否存在隐匿性淋巴结转移术前无法得知,导致TNM分期对喉癌预后的评估受限。因此有必要再寻找能够更确切地反映肿瘤侵袭、转移特性的指标,与TNM分期一起为喉癌的治疗、预后提供更准确的信息。另一方面,喉癌术后局部组织形态发生改变,影像学资料不能及时地反映肿瘤复发,这也需要一种便于术后随访监测,能及时地提示肿瘤复发的指标。恶性肿瘤侵袭、转移是一个复杂的多步骤的过程。细胞外基质的降解是肿瘤表现其恶性行为的关键一步。基质金属蛋白酶（MMPs）是一组几乎能对细胞外所有基质都有降解作用的蛋白酶,因而被认为是肿瘤在表现其恶性行为时的重要工具。明胶酶包括明胶酶A即基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和明胶酶B即基质金属蛋白酶-9（MMP-9）。明胶酶作为基质金属蛋白酶家族中的重要成员,除了能降解阻止肿瘤侵袭、转移的天然屏障-基底膜外,还参与肿瘤中新生血管的形成,特别是明胶酶B在新生血管中的作用更明显。既往有很多研究都得出MMP-9在喉癌组织中的表达高于正常组织,且与喉癌的侵袭、转移相关,能对其预后进行预测。近来也有研究表明在固体肿瘤中血浆MMP-9浓度明显升高,与肿瘤的恶性进展相关。然而目前有关循环中MMP-9与喉癌关系的研究很少,循环中MMP-9浓度能否反眏喉癌生物学特性及预后尚不知。目的:本研究除了对喉癌组织中MMP-9表达与其临床病理特征进行分析外,更着重于对血浆MMP-9在喉癌侵袭、转移、复发中的作用进行分析研究。同时对组织中MMP-9表达与血浆MMP-9浓度是否存在相关性进行分析。材料与方法:标本来源①血浆标本:收集南昌大学第一附属医院耳鼻喉-头颈外科2006年7月至2007年9月序贯入院的40例喉鳞状细胞癌病人术前血浆标本,同时收集到15例喉癌术后复发者血浆标本、10例随访5年以上术后未复发者血浆标本、10例正常健康人群的血浆标本。②石蜡标本:在已采集过血浆标本的40例喉癌患者术后组织标本中,再随机选30例。组织标本来源于我院病理科。实验方法:①运用免疫组化染色对组织标本中MMP-9表达进行半定量分析。②运用ELISA法对血浆中总MMP-9浓度进行检测,包括游离型和结合型的MMP-9。结果:1.组织标本中有70%（21/30）MMP-9染色阳性。MMP-9的表达与喉癌原发部位（P=0.066）、病理分级无关（P=0.458）,但与T分期（P=0.02）及是否有淋巴结转移相关（P=0.029）。2.组织中MMP-9表达与相应患者血浆MMP-9浓度呈正相关（rs=0.524,P=0.003）,血浆MMP-9平均浓度随组织中MMP-9染色增强而升高。3.喉癌患者血浆MMP-9平均浓度明显高于正常人群（P<0.001）。4.喉癌患者血浆MMP-9浓度与淋巴结转移有显著相关（P<0.001）,有淋巴结转移的患者的血浆MMP-9平均浓度明显升高为258.71±74.53ng/ml,无转移组的平均浓度为129.58±31.44ng/ml。血浆MMP-9浓度与肿瘤原发部位（P=0.859）、病理分级（P=0.948）、T分期（P=0.301）,患者年龄（P=0.541）则未见有相关性。5.血浆MMP-9的浓度在喉癌术后复发组中要高于未复发组（P<0.05）及正常对照组（P<0.005）。未复发组的血浆MMP-9平均浓度与正常对照组的比较则无统计学差异（P<0.05）。结论:1.相对正常人群,血浆MMP-9在喉癌患者中的浓度明显升高,且对淋巴结转移具有一定的预测作用,可为喉癌手术方案的选择提供信息。2.由于血液标本釆集简单无创,血浆MMP-9可能成为用于喉癌术后随访、监测的生物学指标。3.组织中MMP-9的表达与相应患者血浆MMP-9浓度呈正相关,喉癌患者血液中丰富的MMP-9可能来源于组织中MMP-9的过度表达。