白英（Solanum Lyratum）糖苷甾体生物碱提取、纯化、检测技术与灭螺效果研究

论文摘要

目前,白英的研究主要集中在提取物药理方面,而对其甾体生物碱的研究甚少,对其提取、分离纯化与检测方面的研究国内外未见报道,本研究在这方面作了初步探讨,首次建立了白英甾体生物碱提取、纯化与检测方法,为其进一步的药理研究做基础;并首次对白英甾体生物碱灭螺效果进行了研究,其主要研究效果如下。 1、本研究采用紫外可见分光光度法建立了白英甾体生物碱的测定方法,该法操作简单、专属性强、重现性好、灵敏度高。白英甾体生物碱最佳检测波长为λ=491nm,以α-茄碱为标准品,在0.0394—0.3150mg/ml范围内其浓度与吸光度有良好的线性关系,回归方程为A=0.3012+0.7842C,相关系数为r:0.9960。稳定性、精密度和重现性均理想,其RSD分别为0.47%（n=6）、0.25%（N=5）、1.39%（n=5）。平均回收率分别为98.7%,102.3%,99.4%,RSD分别为1.16%,1.02%,1.09%,n=3。测定了白英地上部分全草和果实甾体生物碱含量,发现在果实中的含量远高于全草中的含量,其果实中的含量为1.255%,全草中的含量为0.0903%。 2、在提取工艺中,首先通过对影响提取效果的各因素进行单独研究,确定了提取条件,即乙醇浓度为90%左右,浸提温度在40℃左右,浸提时间在4～6h之间,固液比在1:10左右。在此基础上进行了正交试验,并对正交结果进行方差分析。综合考虑提取效果与甾体生物碱稳定性,确定了最佳提取工艺条件为乙醇浓度为90%,浸提温度为40℃,浸提时间4 h,固液比1:9。 3、在硅胶分离纯化研究中采用Glajch三角法对溶剂系统进行了组分优化,确定乙醇、乙酸乙酯、浓氨水作为溶剂系统的组成。用正交实验进行了溶剂配比的优化试验,发现乙酸乙酯:乙醇:浓氨水为6:5:0.5时的效果最好,Rf值分别在0.10,0.21,0.31。并对纯化产品进行了紫外吸收光谱测定。 4、采用浸杀法观察了白英各种提取物的灭螺效果。实验表明乙醇提物具有显著的灭螺效果,其大孔树脂富集物、硅胶分离纯化极性段1和极性段2的LC50分别为6.27mg/L,0.75mg/L和2.69mg/L（95%可行区间分别为6.09～6.45mg/L,0.48～1.02mg/L和2.45～2.93mg/L）。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 白英资源研究概况
• 1.1 白英的形态特征
• 1.2 白英的民间应用
• 1.3 化学成分研究
• 1.4 现代药理研究
• 1.5 毒理活性
• 2 研究目的和意义
• 材料与方法
• 1 实验材料、设备及试剂
• 2 实验方法
• 2.1 白英甾体生物碱检测方法
• 2.2 白英甾体生物碱的提取工艺设计
• 2.3 大孔吸附树脂富集白英生物碱
• 2.4 硅胶纯化甾体生物碱的研究
• 2.5 白英糖苷甾体生物碱灭螺效果研究
• 结果与分析
• 1 白英甾体生物碱检测方法的建立
• 1.1 最佳检测波长的选择
• 1.2 标准曲线的建立
• 1.3 显色时间的选择
• 1.4 稳定性试验
• 1.5 精密度试验
• 1.6 重现性试验
• 1.7 回收率试验
• 1.8 白英地上部分不同部位生物碱含量的测定
• 2 白英甾体生物碱的提取工艺
• 2.1 白英甾体生物碱提取条件的研究
• 2.2 正交实验
• 3 大孔吸附树脂富集白英生物碱
• 4 硅胶分离纯化白英甾体生物碱的研究
• 4.2 展开体系优化研究
• 4.2 硅胶纯化白英甾体生物碱的研究
• 5 生物活性试验
• 5.1 白英不同提取物浸杀钉螺效果
• 5.2 乙醇提取物进一步纯化物的灭螺效果研究
• 讨论
• 1 白英甾体生物碱含量的测定方法
• 1.1 方法的选择
• 1.2 标准品的选择
• 2 白英甾体生物碱提取工艺
• 2.1 提取溶剂的选择
• 2.2 提取工艺的优化
• 3 柱色谱溶剂系统的优化
• 4 白英甾体生物碱的灭螺效果及应用前景分析
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历