论文摘要
背景与目的轴蛋白(Axin)是一个构架蛋白,具有很多结构域,能与相应蛋白直接或间接结合,在胚胎发育、肿瘤发生、细胞凋亡等病理生理过程中扮演着重要角色。Axin参与调节Wnt、JNK、p53等信号通路,过表达Axin能促进细胞凋亡的发生。Axin的表达及其意义在许多恶性肿瘤及培养细胞都有相关的报道,但是没见在大鼠大脑中动脉缺血再灌注后损伤脑组织中的表达情况。我们的实验通过大鼠大脑中动脉阻断模型的建立和免疫组织化学技术研究Axin在大鼠大脑中动脉阻断模型中的表达情况及其意义。内容与方法选用SD大鼠40只,随机分为两组:⑴假手术组(Sham组n=20);⑵缺血再灌注组(IR组n=20) ,两组再根据再灌注时间的不同分为6h、12h、24h、48h四组,每组5只。手术组为采用线栓法制作缺血再灌注损伤模型,假手术组操作与手术组相同,只是不进行插线。两组均在缺血2h后分别再灌注6h、12h、24h、48h后经4%多聚甲醛灌注后断头取脑,在视交叉前后各1mm处作冠状切面,置于4%多聚甲醛中固定24h,流水冲洗12h,经脱水、透明、石蜡包埋,切片厚4μm,经过HE染色、免疫组织化学染色和图像分析系统检测大鼠海马CA1区和顶叶皮质区Axin的表达情况。结果结果表明:⑴神经功能评分:Sham组未见神经功能缺失表现。IR组可见神经功能缺失表现,以24h表现最为明显。⑵HE染色脑组织变化。Sham组:海马CA1区和顶叶皮层区神经细胞形态正常,结构完整,排列整齐紧密,边界清,胞浆淡染,胞核呈蓝色,胞核轮廓清楚,核大呈圆形或椭圆形。IR组:缺血侧海马CA1区和顶叶皮质区神经细胞排列紊乱,胞浆浓缩,甚至有胞浆空泡形成,核固缩浓染,间质稀疏,正常神经细胞数量减少。⑶Axin免疫组织化学染色的切片在光镜下观察。Sham组海马CA1区和顶叶皮质区Axin可见表达,神经元细胞其阳性表现部位在胞质中, IR组海马CA1区和顶叶皮质区Axin表达较Sham组增多,两组间比较有显著差异。(P<0.05)。IR组中不同再灌注后时间的Axin表达情况具有差异性(P<0.05),其中24h亚组表达较其他亚组高。结论⑴通过免疫组织化学染色首次提示了Axin蛋白在大脑大脑中动脉缺血再灌注模型中的表达情况。⑵大鼠脑缺血再灌注损伤后Axin表达上调,其表达的变化情况符合该模型细胞凋亡情况,提示Axin可能参与脑缺血再灌注后损伤中的凋亡机制,并可能与经线粒体途径的凋亡有关。⑶在大鼠大脑中Axin的阳性表达定位于细胞质中。
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